| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IRE1 RNase (IC50 = 0.29 μM)
MKC-8866 specifically targets the RNase domain of IRE1α, a key sensor of ER stress. Upon ER stress, IRE1α oligomerizes and undergoes autophosphorylation, activating its endoribonuclease (RNase) activity. This RNase activity catalyzes the unconventional splicing of XBP1 mRNA, which produces the active transcription factor XBP1s. XBP1s then upregulates the expression of genes involved in protein folding, ER-associated degradation (ERAD), and other adaptive responses. By binding to and inhibiting the IRE1α RNase domain, MKC-8866 prevents the splicing of XBP1 mRNA. This blocks the downstream signaling of the IRE1α branch of the UPR, thereby sensitizing cancer cells to ER stress and promoting cell death. The compound is selective for mammalian IRE1α and does not inhibit RNase A, RNase L, or yeast IRE1. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
MKC8866（20 μM；6 天）可抑制所有乳腺癌细胞系的生长[2]。当使用 MKC8866（20 μM；48 小时）时，进入 S 期的细胞频率降低[2]。在标准条件下，MKC8866（0.2-10 μM；3 天）对所有四种细胞系的活力均表现出剂量依赖性的抑制作用，其中对 LNCaP 细胞的影响最为显著[1]。MKC8866（20 μM）处理 72 小时足以完全抑制 NSC 125973 诱导的 XBP1 表达[1]。体外研究表明，MKC-8866 是 IRE1α RNase 结构域的强效选择性抑制剂。在使用重组人 IRE1α 蛋白的生化分析中，该化合物以 0.29 μM 的 IC50 值抑制合成 XBP1 RNA 探针的切割。该化合物对RNase A、RNase L或酵母IRE1均无活性，证实了其选择性。在细胞实验中，MKC-8866抑制乳腺癌细胞中IRE1 RNase的活性，表现为XBP1剪接减少和下游UPR靶基因表达降低。这些体外实验结果为该化合物的作用机制及其作为抗癌药物的潜力提供了强有力的证据。
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| 体内研究 (In Vivo) |
当停止使用 NSC 125973 后，MKC8866（口服；300 mg/kg；持续 28 天）可降低肿瘤复发率 [1]。MKC8866 作为单药疗法，在多种小鼠临床前模型中均能显著抑制前列腺癌 (PCa) 肿瘤的生长，并与现有 PCa 药物显示出协同抗肿瘤作用 [1]。MKC8866 在所有测试的 PCa 细胞系中均能显著抑制异种移植瘤的生长（图 2a）。与对照组相比，MKC8866 治疗组肿瘤中 XBP1s 的表达显著降低，证实 MKC8866 在携带肿瘤的小鼠体内具有活性，并且 IRE1α 活性在体内得到了适当的抑制（补充图 4a）。此外，PCNA表达降低，而cleaved Caspase-3水平升高，表明MKC8866治疗分别导致细胞增殖减少和细胞凋亡增加（补充图4b）。在治疗过程中停用MKC8866会导致XBP1s水平反弹和肿瘤生长增强（图2b和补充图4c），表明持续应用MKC8866对于其抑制肿瘤生长至关重要。这些结果表明，靶向IRE1α的药物在PCa的临床前小鼠模型中具有显著的抗肿瘤作用。[1]当MKC8866与恩扎卢胺联合用药时，肿瘤生长抑制作用表现出显著的协同效应。MKC8866与醋酸阿比特龙和卡巴他赛联合用药也表现出协同抑制肿瘤生长的作用。综上所述，这些数据表明，在临床前模型中，MKC8866 与目前临床上使用的一些前列腺癌核心药物方案具有协同作用。[1]
MKC8866 增强紫杉醇在体内的疗效[2] 为了确定 MKC8866 在体内的疗效，我们在无胸腺裸鼠中建立了 MDA-MB-231 肿瘤异种移植模型。当肿瘤达到可触及的大小（225–250 mm3）时，将动物随机分为不同的治疗组，分别接受载体单药治疗、300 mg kg−1 MKC8866 单药治疗、10 mg kg−1 紫杉醇单药治疗或紫杉醇联合 MKC8866 治疗。所有治疗组均持续给药，直至肿瘤达到最大体积（2000 mm3）或第 60 天，以先到者为准。连续60次口服给药后，MKC8866耐受性良好，且基于药代动力学异速缩放，其全身暴露量远高于预期的临床治疗水平。与仅使用载体的对照组相比，单独使用MKC8866治疗并未抑制肿瘤生长（图7a）。对MKC8866治疗组肿瘤中XBP1 mRNA剪接百分比的分析证实了IRE1 RNase活性的降低，从而验证了靶向作用（图7b）。虽然紫杉醇治疗可抑制肿瘤生长，但与MKC8866联合用药显著增强了紫杉醇的疗效。在为期60天的实验中，与单独使用紫杉醇相比，接受紫杉醇-MKC8866联合治疗的动物的肿瘤生长显著减少（P ≤ 0.0001）（图7c）。与单独使用紫杉醇相比，在第14天（或肿瘤体积约为700 mm³）(P ≤ 0.001)或第28天（或肿瘤体积约为1300 mm³）(P ≤ 0.05)开始，紫杉醇联合MKC8866治疗后观察到类似的协同效应（图7c）。对肿瘤中XBP1剪接的检测显示，紫杉醇治疗增加了IRE1 RNase活性，而与MKC8866联合用药则降低了这种活性（图7d，补充图5）。紫杉醇联合MKC8866治疗后观察到的肿瘤体积缩小也转化为生存期的延长。在第1至60天、第14至60天以及第28至60天每日接受MKC8866联合紫杉醇治疗的小鼠，其生存期显著长于仅接受紫杉醇治疗的小鼠（图7e）。 体内实验表明，MKC-8866具有良好的口服生物利用度，并在癌症临床前模型中显示出显著的治疗活性。在前列腺癌小鼠模型中，口服MKC-8866已被证实能够抑制肿瘤生长。通过降低肿瘤组织中XBP1的剪接水平，证实了该化合物在体内抑制IRE1α通路的能力。这些结果表明，MKC-8866能够有效作用于其靶点并产生治疗效果，支持其作为一种新型癌症疗法的潜力。 |
| 酶活实验 |
荧光素酶报告基因检测[1]
将LNCaP或293T细胞培养于六孔板中，转染1 μg pGL3-MYC荧光素酶报告质粒，并加入指定浓度的空载体（pCDNA3）或pCDNA3-Flag-XBP1s质粒，培养24小时后收获细胞。使用荧光素酶检测系统和Wallac Victor2 1420多功能酶标仪测定荧光素酶活性。 MKC-8866的体外酶抑制试验包括测定IRE1α的RNase活性。在该试验中，将重组人IRE1α蛋白与模拟XBP1 mRNA底物的合成RNA探针孵育。然后定量IRE1α对探针的切割，通常使用荧光检测或凝胶电泳法。将 MKC-8866 以不同浓度加入，并测定其抑制 RNase 活性的能力，从而计算 IC50 值。这种生化测定是表征该化合物效力和选择性的主要方法。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖实验[2]
细胞类型： MCF7、SKBR3、MDA-MB-231 和 MCF10A 细胞 测试浓度： 20 μM 孵育时间： 6 天 实验结果： 所有乳腺癌细胞系的增殖均降低。 细胞周期分析[2] 细胞类型： MDA-MB-231、MCF7 和 SKBR3 细胞 测试浓度： 20 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 进入 S 期的细胞数量减少。 细胞周期分析[1] 细胞类型： LNCaP、VCaP、22Rv1 和 C4-2B 细胞 测试浓度： 0.2、0.5、1、5、10 μM 孵育时间： 3 天 实验结果： 以剂量依赖性方法抑制所有四种细胞系的活力。 细胞周期分析[2] 细胞类型： MDA-MB-231 细胞 测试浓度： 20 μM 孵育时间： 72 小时 实验结果： 完全阻断 NSC 125973 诱导的 XBP1 表达。 为验证 MKC-8866 在生物学环境中的功能活性，我们进行了细胞实验。在这些实验中，我们用 MKC-8866 处理癌细胞系，例如乳腺癌或前列腺癌细胞。通过 RT-PCR 检测 XBP1 mRNA 的剪接情况，或通过蛋白质印迹法检测剪接形式的 XBP1 (XBP1s)，来评估 IRE1α 活性的抑制情况。此外，我们还检测了下游 UPR 靶基因（例如 BiP/GRP78）的表达。细胞活力和凋亡检测用于评估化合物的细胞毒性作用。这些基于细胞的实验对于确认生化抑制作用能否转化为细胞环境中的功能性效应至关重要。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性无胸腺裸鼠MDA-MB-231肿瘤[1]
剂量：300 mg/kg 给药途径：口服；持续28天 实验结果：NSC 125973可减少停药后的肿瘤再生。 体内MDA-MB-231异种移植模型[2] 小鼠每周静脉注射10 mg kg−1紫杉醇。IRE1抑制剂MKC8866以30 mg ml−1的浓度溶于1%微晶纤维素单糖中，每日灌胃给药，剂量为10 ml kg−1（载体2）。各治疗组如下：第1组，每周静脉注射紫杉醇赋形剂，每日口服MKC8866赋形剂，持续整个研究过程。第2至6组，每周给予紫杉醇，持续整个研究过程。MKC8866与紫杉醇联合用药，分别于第1至28天（第3组）、第14至60天（第4组）、第28至60天（第5组）以及第1至60天（第6组）每日口服给药。所有组的治疗均持续至肿瘤达到最大体积或第60天，以先到者为准。[2] MKC8866的给药方案为：每日灌胃给药，剂量为10 ml kg⁻¹，由30 mg ml⁻¹的MKC8866悬浮液配制而成，悬浮液溶于1%微晶纤维素和单糖中，每日剂量为300 mg kg⁻¹（赋形剂2）。第 1 组单独接受紫杉醇（7.5 mg kg−1），而第 2 组接受紫杉醇（7.5 mg kg−1）加 300 mg kg−1 MKC8866。 可触及的肿瘤出现后，将小鼠随机分组，每天接受 300 mg kg−1 MKC8866 或载体（1% 微晶溶于 1 g ml−1 蔗糖）。在MKC8866和恩扎卢胺的联合用药实验中，小鼠被分为四组（每组n=6）：隔日灌胃给予300 mg kg⁻¹ MKC8866；隔日灌胃给予30 mg kg⁻¹恩扎卢胺；每日灌胃给予MKC8866或恩扎卢胺；以及每日灌胃给予MKC8866或0.5% HP甲基纤维素（含0.1% Tween 20）作为溶剂对照。在MKC8866和醋酸阿比特龙的联合用药实验中，小鼠被分为四组（每组n=6）：隔日灌胃给予300 mg kg⁻¹ MKC8866；隔日灌胃给予20 mg kg⁻¹醋酸阿比特龙；两种药物联合给药；以及相应的溶剂对照。 MKC8866 和卡巴他赛联合治疗的四个组（每组 n = 6）分别为：每隔一天灌胃给予 300 mg kg⁻¹ MKC8866；每周两次腹腔注射 5 mg kg⁻¹ 卡巴他赛；两种治疗方案联合应用；以及相应的溶剂对照组。实验结束时测量肿瘤重量。[1] MKC-8866 的体内动物实验在癌症小鼠模型中进行，通常采用前列腺癌或乳腺癌异种移植模型。在这些模型中，将癌细胞皮下植入免疫缺陷小鼠体内。当肿瘤达到一定大小时，口服给予 MKC-8866。持续监测肿瘤生长情况，并在研究结束时收集肿瘤组织，分析 IRE1α 抑制的生物标志物，例如 XBP1 剪接。这些体内研究对于证明该化合物的治疗功效以及评估其药代动力学和药效学特性至关重要。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
MKC-8866 的分子量为 361.35 g/mol，分子式为 C18H19NO7。它是一种口服生物利用度高的小分子化合物。该化合物通常以粉末形式储存在 -20°C 的环境中。其溶解性和渗透性等理化性质使其适用于口服给药。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
MKC-8866 的毒性特征已在临床前研究中得到评估。作为一种 UPR 抑制剂，其安全性正在接受仔细评估。常见的副作用可能包括胃肠道反应，因为 UPR 在维持分泌组织健康方面发挥着重要作用。然而，该化合物对 IRE1α 的选择性是最大限度降低脱靶毒性的关键特征。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ORIN1001 是一种 IRE1 核糖核酸酶抑制剂，具有口服生物利用度，可抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶/核糖核酸酶肌醇需求酶 1 (IRE1)，并具有潜在的免疫激活、化疗增敏和抗肿瘤活性。口服后，ORIN1001 靶向并结合 IRE1 的核糖核酸酶结构域，从而抑制 IRE1 的活性。这可阻止 IRE1/X-box 结合蛋白 1 (XBP1) 通路的激活，抑制未折叠蛋白反应 (UPR) 应激适应，并阻止促肿瘤因子的产生。这可能抑制由 IRE1 过度激活引起的肿瘤生长。此外，ORIN1001 可通过浸润细胞毒性 T 细胞和清除肿瘤微环境 (TME) 中的免疫抑制性髓源性抑制细胞 (MDSC) 来消除免疫抑制性肿瘤微环境。 IRE1 是一种位于内质网 (ER) 的跨膜蛋白，包含一个内质网介导的应激感知结构域和一个胞质 RNase 结构域。它是内质网未折叠蛋白反应 (UPR) 的关键传感器，在内质网应激的响应和消退中发挥着至关重要的作用。IRE1 参与内质网应激依赖性信号通路介导的蛋白质磷酸化，以及 mRNA 的加工和降解。IRE1 经常与 MYC 癌基因共扩增。MKC-8866 (ORIN1001) 是一种高效、选择性强且口服生物利用度高的 IRE1α RNase 结构域抑制剂，已被开发为一种潜在的抗癌疗法。其作用机制是阻断 UPR 的 IRE1α 分支，该通路在癌细胞中经常被上调以应对内质网应激。该化合物在前列腺癌和乳腺癌的临床前模型中显示出显著的治疗活性，并已进入临床试验阶段。作为一种研究性药物，MKC-8866 代表了一种靶向癌细胞存活机制的新方法，有望用于治疗依赖于 UPR 的各种癌症。
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| 分子式 |
C18H19NO7
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|---|---|
| 分子量 |
361.3460
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| 精确质量 |
361.12
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| 元素分析 |
C, 59.83; H, 5.30; N, 3.88; O, 30.99
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| CAS号 |
1338934-59-0
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| PubChem CID |
89542346
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
0.5
|
| tPSA |
102Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
611
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
IFDGMRMUJYGWQQ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C18H19NO7/c1-10-11-7-14(24-2)16(22)13(9-20)17(11)26-18(23)12(10)8-15(21)19-3-5-25-6-4-19/h7,9,22H,3-6,8H2,1-2H3
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| 化学名 |
7-Hydroxy-6-methoxy-4-methyl-3-(2-morpholino-2-oxoethyl)-2-oxo-2H-chromene-8-carbaldehyde
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| 别名 |
ORIN1001; ORIN-1001; ORIN 1001;
MKC-8866; MKC 8866; 2H-1-Benzopyran-8-carboxaldehyde, 7-hydroxy-6-methoxy-4-methyl-3-(2-(4-morpholinyl)-2-oxoethyl)-2-oxo-; UNII-1NZ0YBP9HB;MKC8866; IRE1-IN-8866; IRE1IN8866; IRE1;
IN 8866; IRE1-IN8866; IRE1-IN 8866; IRE1IN-8866; IRE1IN 8866
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~6.67 mg/mL (~18.46 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7674 mL | 13.8370 mL | 27.6740 mL | |
| 5 mM | 0.5535 mL | 2.7674 mL | 5.5348 mL | |
| 10 mM | 0.2767 mL | 1.3837 mL | 2.7674 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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