N-Aminofluorescein

目录号: V43370 纯度: ≥98%
N-氨基荧光素、酰肼荧光素
N-Aminofluorescein CAS号: 98907-26-7
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
Other Sizes
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
N-氨基荧光素是一种螺环结构的荧光素酰肼。它是一种对Cu2+具有高选择性和高灵敏度的荧光探针。N-氨基荧光素对其他常见金属离子没有选择性荧光响应,可用于在λex/em=495/516 nm处直接检测生物体系中的Cu2+。
N-氨基荧光素(CAS号:98907-26-7)是一种荧光素衍生物,其内酯氮原子上连接有一个氨基,分子式为C20H13NO5,分子量为347.33 g/mol。该化合物是一种用途广泛的荧光标记试剂,可通过形成稳定的腙键来检测和定量含醛和酮的化合物。其激发/发射波长最大值分别为494 nm/520 nm(绿色荧光),与荧光素相似,因此可与荧光显微镜和流式细胞仪中的FITC滤光片组兼容。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary target of N-aminofluorescein is not a biological receptor but rather aldehyde and ketone functional groups present on biomolecules. The amino group at the lactone nitrogen reacts specifically with carbonyl groups (aldehydes and ketones) under mild acidic conditions (pH 4-6) to form stable hydrazone linkages. This property allows for the fluorescent labeling of oxidized sugars, glycoproteins, aldehydic residues in DNA (e.g., apurinic/apyrimidinic sites), and other carbonyl-containing molecules. The compound is a chemical tool for bioconjugation and detection, not a therapeutic drug.
体外研究 (In Vitro)
建议(以下是我们建议的方案,仅供参考,请根据您的具体情况进行调整)。N-氨基荧光素由酰肼基团和荧光素部分组成,二者可以结合并识别Cu²⁺,从而促进酰胺的水解[1]。在含有Cu²⁺的70% HEPES缓冲溶液(pH 7.4)中,N-氨基荧光素(FG)对Cu²⁺具有选择性,并在632 nm和515 nm处显示吸收带和发射带[2]。建议(以下是我们建议的方案,仅供参考,请根据您的具体情况进行调整)。测定Cu²⁺的一般步骤[1]:1. 配制1.0 mM螺旋状荧光素酰肼乙醇储备液;2. 使用10 μM N-氨基荧光素和0.01 M Tris-HCl缓冲液(pH 7.2)进行荧光测定。启动反应; 3. 加入适量样品溶液,确保最终 Cu²⁺ 浓度不超过 10 μM。使用 0.01 M Tris-HCl 缓冲液(pH 7.2)将最终体积调整至 10 mL;4. 两小时后,取 3 mL 溶液转移至 1 cm 石英比色皿中。在室温下测量荧光光谱和强度(激发/发射波长 λex/em = 495/516 nm),激发和发射狭缝宽度均为 5 nm。同时制备不含 Cu²⁺ 的空白溶液,并在相同条件下进行测量,以作对比分析。
在体外,N-氨基荧光素可用于标记含醛基或酮基的生物分子,例如氧化聚糖、糖胺聚糖或合成醛类探针。标记反应在室温下于水性缓冲液(0.1 M 乙酸钠,pH 5.0)中进行 2-6 小时。生成的腙缀合物呈现明亮的绿色荧光(激发波长 494 nm,发射波长 520 nm),可通过荧光显微镜、流式细胞术或基于微孔板的荧光测定法进行检测。它还可用于检测 DNA 中含有活性醛基的脱嘌呤/脱嘧啶位点,为研究 DNA 损伤和修复提供了一种工具。
体内研究 (In Vivo)
在体内,N-氨基荧光素通常不作为治疗药物进行全身给药。然而,它可用于预先标记醛基或酮基功能化的生物分子,以便后续进行体内成像研究。例如,用酮基修饰的纳米颗粒或抗体可在体外用N-氨基荧光素标记,然后注射到动物体内以追踪其分布。绿色荧光可用于荧光成像进行组织定位。此外,它还可用作检测固定组织中氧化产物的探针,但由于其波长相对较短(绿色)且可能存在自发荧光,因此在活体动物成像中的应用受到限制。
酶活实验
对于非细胞标记实验,腙的形成采用标准方案。将含醛或酮的化合物(例如,磷酸吡哆醛,0.1-1 mM)溶解于 0.1 M 乙酸钠缓冲液(pH 5.0)中。加入 N-氨基荧光素(溶于 DMSO 至 10 mM),使其最终浓度为 0.5-2 mM。反应混合物在 37℃ 避光孵育 2-4 小时。腙产物的生成可通过薄层色谱(硅胶,乙酸乙酯/甲醇 9:1)或反相高效液相色谱-荧光检测(激发波长 494 nm,发射波长 520 nm)进行监测。标记产物可通过制备型高效液相色谱或沉淀法纯化。对于氧化抗体的标记,首先用高碘酸钠处理抗体以生成醛基,然后与 N-氨基荧光素反应。
细胞实验
对于体外细胞检测,首先将细胞暴露于能产生含醛基生物分子的刺激物,例如氧化应激(H2O2处理)或糖苷酶处理,以暴露糖蛋白上的醛基。细胞用4%多聚甲醛固定,用0.1% Triton X-100透化,然后在室温下避光,用10-100 uM N-氨基荧光素在0.1 M乙酸钠缓冲液(pH 5.0)中孵育1-2小时。用PBS洗涤后,用含DAPI的封片剂封片,并通过荧光显微镜成像(激发波长488 nm,发射波长520-540 nm)。绿色荧光表明存在含醛基或酮基的分子。或者,也可以在pH 6.0-6.5的条件下用该化合物标记活细胞30-60分钟,然后洗涤并成像。
动物实验
在体内动物研究中,N-氨基荧光素并不常用于直接动物注射。然而,它可用于离体标记研究。例如,在氧化应激小鼠模型(如肝脏缺血再灌注损伤)中,实验结束后,处死动物,灌注、固定、切片目标器官(如肝脏),然后在室温下用N-氨基荧光素(10-100 μM,溶于pH 5.0的醋酸缓冲液)染色1-2小时。洗涤后,使用配备FITC滤光片的荧光显微镜对切片进行成像,以检测醛类损伤产物。对照切片可预先用硼氢化钠处理以还原醛基,从而验证其特异性。该化合物也可用于在注射前对醛基修饰的脂质体或纳米颗粒进行离体标记,以追踪其生物分布。
药代性质 (ADME/PK)
N-氨基荧光素的分子量为347.33 g/mol,分子式为C20H13NO5。该化合物为淡橙色至红色粉末。它可溶于DMSO(10-25 mg/mL)和乙醇,但在水性缓冲液中的溶解度较低。体外标记时,先用DMSO配制储备液(10-20 mM),然后用水性缓冲液稀释(最终DMSO浓度≤5%)。该化合物的激发波长最大值为494 nm,发射波长最大值为520 nm(绿色),消光系数约为70,000 M-1cm-1。在-20℃避光防潮条件下储存稳定。在溶液中,它在-20℃下可稳定保存数周,但在中性至碱性pH条件下可能发生水解。形成的腙键在生理条件下稳定,但在极低的 pH 值 (<2) 或极高的 pH 值 (>10) 下可断裂。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
作为一种荧光标记试剂,N-氨基荧光素不适用于人体。目前尚无具体的毒理学数据。该化合物通常被视为潜在刺激物;应采取标准的化学品安全防护措施(佩戴手套、实验服和护目镜)。避免吸入粉尘。在细胞培养中,该化合物的使用浓度为10-100 μM,未见明显的细胞毒性报道。荧光素核心通常被认为毒性较低。然而,该化合物应作为研究用化学品处理,并应遵循正确的处置方法。
参考文献

[1]. A selective fluorescence-on reaction of spiro form fluorescein hydrazide with Cu(II). Anal Chim Acta. 2006 Aug 11;575(2):217-22.

[2]. A water compatible turn ‘on’ optical probe for Cu2+ based on a fluorescein-sugar conjugate. Sensors and Actuators B: Chemical. 2014;196:345-351.

其他信息
N-氨基荧光素是一种研究用化合物,尚未获准用于临床。它是荧光素染料家族的成员,专门用于通过腙键形成对含羰基分子进行荧光标记。这一特性使其可用于检测和定量复杂生物样品中的醛和酮,包括氧化蛋白、晚期糖基化终产物(AGEs)和受损DNA。它还可用于在用高碘酸盐氧化裂解聚糖邻二醇后对聚糖进行标记。该化合物是化学生物学和糖生物学中研究氧化应激、聚糖结构和细胞代谢的重要工具。仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C20H14N2O4
分子量
346.3362
精确质量
346.095
CAS号
98907-26-7
PubChem CID
15883728
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
LogP
3.463
tPSA
96.02
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
26
分子复杂度/Complexity
558
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC=C2C(=C1)C(=O)N(C23C4=C(C=C(C=C4)O)OC5=C3C=CC(=C5)O)N
InChi Key
CHYVTSCIBXXQJT-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C20H14N2O4/c21-22-19(25)13-3-1-2-4-14(13)20(22)15-7-5-11(23)9-17(15)26-18-10-12(24)6-8-16(18)20/h1-10,23-24H,21H2
化学名
2-amino-3',6'-dihydroxyspiro[isoindole-3,9'-xanthene]-1-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~360.92 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.8873 mL 14.4367 mL 28.8734 mL
5 mM 0.5775 mL 2.8873 mL 5.7747 mL
10 mM 0.2887 mL 1.4437 mL 2.8873 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们