| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Interleukin-1 receptor-associated kinase 4 (IRAK4). ND-2158 is a potent and selective small molecule inhibitor of IRAK4 kinase activity, acting as a competitive inhibitor that binds in the ATP pocket. The in vitro inhibitory constant (Ki) against IRAK4 is 1.3 nM. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
ND-2158 可强效阻断人白细胞在 TLR4 激动剂 LPS 或 TLR9 激动剂 CpG 刺激下产生的促炎细胞因子 TNF。结构相关但不抑制 IRAK4 活性的化合物 ND-1659 则无此活性。 [1]
在弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系 panel 中，ND-2158 降低了携带 MYD88 L265P 突变的 ABC 亚型细胞系的活力，但不影响 MYD88 野生型的 GCB 亚型细胞系或携带其他 MYD88 突变 (S222R 和 S219C) 的 ABC 细胞系。 [1] 在 ABC DLBCL 细胞系中，基因表达谱分析显示，ND-2158 处理可下调生存信号，包括 NF-κB 以及自分泌 IL-6/IL-10 对 JAK-STAT3 通路的激活。 [1] 在 ABC DLBCL 细胞系中，ND-2158 可降低 BCL2L1 和 BCL2A1 的 mRNA 水平，但增加 BCL2 的表达。 [1] 在组合研究中，ND-2158 与 BTK 抑制剂 ibrutinib、Syk 抑制剂 PRT062607 或 Bcl-2 抑制剂 ABT-199 联用，可协同增强降低 ABC DLBCL 细胞系活力并促进凋亡（表现为 cleaved PARP 和活化 caspase-3 增加）的能力。即使在对照鲁替尼不敏感的 CARD11 突变型 ABC 细胞系 OCI-Ly3 中，也观察到了这种协同作用。 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在大鼠 LPS 诱导的 TNF 产生模型中，ND-2158 (1, 3, 和 30 mg/kg, 腹腔注射) 呈剂量依赖性地显著降低血清 TNF 水平。 [1]
在小鼠胶原诱导的关节炎模型中，ND-2158 (30 mg/kg, 腹腔注射, 每日两次) 在治疗开始后 2 天内即显效，降低了临床评分并改善了炎症的组织学参数（炎性细胞浸润、软骨损伤、骨吸收和骨膜骨形成）。 [1] 在小鼠气囊法痛风模型中，ND-2158 (3, 10, 和 30 mg/kg, 腹腔注射, 每日一次, 连续 6 天) 呈剂量依赖性地阻断白细胞浸润，高剂量组与溶剂对照组相比，白细胞浸润减少超过两倍。 [1] 在 ABC DLBCL (OCI-Ly10, MYD88 L265P+) 小鼠异种移植瘤模型中，ND-2158 (100 mg/kg/天, 腹腔注射, 每日两次) 可延缓肿瘤生长，且耐受性良好，未见明显体重下降。ND-2158 可降低肿瘤中 IRAK4 的磷酸化水平。 [1] 在 ABC DLBCL (OCI-Ly3, CARD11 突变型) 小鼠异种移植瘤模型中，ND-2158 (100 mg/kg/天, 腹腔注射, 每日两次) 与 ABT-199 (50 mg/kg/天, 口服) 联用可几乎完全抑制肿瘤生长，而两种药物单用仅能中等程度抑制生长。 [1] |
| 酶活实验 |
激酶实验： 使用放射性同位素标记的酶学实验评估了 ND-2158 对 IRAK4 和 IRAK1 的抑制活性。通过剂量抑制实验获得 IC50 和 Ki 值。在 10 μM 单一浓度下评估了 ND-2158 对 334 种激酶的广谱选择性。对于在 10 μM 下显示 ≥75% 抑制的激酶，进一步测定了 IC50 和 Ki。使用四参数拟合生成剂量-反应曲线。 [1]
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| 细胞实验 |
MTS 活力测定： 将约 10⁴ 个/孔的 DLBCL 细胞接种于 96 孔板中，与溶剂或指定药物共培养（三复孔）。第 2 天，更换新鲜配制的药物。第 4 天，加入 MTS 四唑盐试剂和电子耦合试剂，37°C 孵育 2 小时，在 490 nm 处测量吸光度。单药实验数据以 DMSO 处理组为对照进行标准化。联合用药实验数据先以 DMSO 处理组标准化，再以单独 ND-2158 处理组标准化。 [1]
凋亡检测（流式细胞术）： DLBCL 细胞系与指定药物共培养 72 小时。通过细胞内流式细胞术检测活化 caspase-3 和 cleaved PARP 来评估凋亡。凋亡细胞定义为两种标记物均呈阳性的细胞百分比。 [1] NF-κB 和 IκBα 报告基因实验： 构建了稳定表达 NF-κB 萤火虫荧光素酶报告基因的 ABC DLBCL 细胞系。细胞以 2.5 × 10⁵ 个/mL 的密度接种于 96 孔板，按指定时间加药处理。使用双荧光素酶报告基因检测系统测量萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶活性。通过将萤火虫荧光素酶读数对海肾荧光素酶读数进行标准化来确定相对 NF-κB 活性。 [1] IL-6 和 IL-10 ELISA： ABC DLBCL 细胞系与 ND-2158 或溶剂对照共培养 48 小时。使用 ELISA 试剂盒，按照制造商说明检测细胞培养上清液中 IL-6 和 IL-10 的浓度。每个实验均进行三复孔。 [1] LPS/CpG 诱导的细胞因子释放： 通过裂解红细胞从血沉棕黄层中分离人白细胞。细胞用 ND-2158 预孵育 1 小时，然后用 1 μg/mL LPS 或 0.5 μM CpG 刺激 20 小时。使用 ELISA 试剂盒检测上清液中的 TNF 产生。 [1] 基因表达谱分析： ABC DLBCL 细胞系用 10 μM ND-2158 或 10 μM 阴性对照化合物 ND-1659 处理 6、12、24 或 36 小时。使用 TRIzol 提取 RNA，并用 RNeasy 试剂盒纯化。使用双色人基因表达阵列进行基因表达谱分析，比较 ND-1659 处理的对照细胞与 ND-2158 处理细胞的信号。 [1] |
| 动物实验 |
LPS诱导的TNF生成模型（大鼠）：雌性Lewis大鼠（每组n=10）腹腔注射ND-2158（1、3和30 mg/kg）或载体（10%羟丙基-β-环糊精生理盐水）。口服地塞米松作为阳性对照。给药30分钟后，大鼠静脉注射0.1 mg/kg LPS（溶于PBS）。1小时后，采集大鼠血液，并通过ELISA法分析血清中TNF的生成。[1]胶原诱导的关节炎模型（小鼠）：雄性DBA小鼠于第0天和第21天用完全弗氏佐剂乳化的II型胶原进行免疫。在疾病发作时随机分组小鼠（每组n=8，除n=4的未免疫对照组外）。腹腔注射ND-2158或载体（10%羟丙基-β-环糊精的ddH₂O溶液）。地塞米松（0.1 mg/kg，腹腔注射，每日两次）作为阳性对照。ND-2158的给药剂量为30 mg/kg，腹腔注射，每日两次。每天评估小鼠的临床评分，直至第11天。对收集的组织切片进行组织学分析。[1]
密歇根州立大学气囊痛风模型（小鼠）：将BALB/c小鼠随机分为10只一组。腹腔注射ND-2158或载体（10%羟丙基-β-环糊精的ddH₂O溶液）（3、10和30 mg/kg）。首次给药后，通过向颈背部注射6 mL空气形成气囊。随后，小鼠每天一次接受ND-2158或载体给药，持续6天。末次给药30分钟后，向气囊内注射3 mL尿酸钠（MSU）悬浮液。MSU注射4小时后，取出渗出液进行白细胞计数和分类分析。[1] 肿瘤异种移植模型（小鼠）：将含有Matrigel/PBS（1:1）的肿瘤细胞悬液皮下接种到6-8周龄的雌性NOD/SCID小鼠体内。OCI-Ly10接种10 × 10⁶个细胞；OCI-Ly3接种10⁶个细胞。当肿瘤平均体积达到150 mm³时，开始治疗。ND-2158（100 mg/kg/天）或载体每日两次腹腔注射。在联合用药实验中，伊布替尼（9 mg/kg/天，腹腔注射，每日一次）或ABT-199（50 mg/kg/天，灌胃，每日一次）在ND-2158给药4小时后给药。每日使用数字游标卡尺测量肿瘤生长情况。[1] 小鼠药代动力学分析：对于ND-2158，雄性C57BL/6小鼠分别以3 mg/kg的剂量静脉注射或腹腔注射给药，药物溶于10%羟丙基-β-环糊精溶液中。分别在给药前以及给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12和24小时采集血液样本。制备血浆，并使用LC/MS/MS定量分析ND-2158的浓度。使用Phoenix WinNonlin软件计算药代动力学参数。[1] |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C22H30N4O4S
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|---|---|
| 分子量 |
446.563004016876
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| 精确质量 |
446.198
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| 元素分析 |
C, 59.17; H, 6.77; N, 12.55; O, 14.33; S, 7.18
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| CAS号 |
1388896-07-8
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| 相关CAS号 |
1388896-07-8;
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| PubChem CID |
86343751
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
2
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| tPSA |
139
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
629
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
C1CC2=C([C@H]1C[C@@H](C(=O)N)O)C3=C(N=CN=C3S2)OC4CCC(CC4)N5CCOCC5
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| InChi Key |
ZSMULWAVKYFPSS-FPCVCCKLSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H30N4O4S/c23-20(28)16(27)11-13-1-6-17-18(13)19-21(24-12-25-22(19)31-17)30-15-4-2-14(3-5-15)26-7-9-29-10-8-26/h12-16,27H,1-11H2,(H2,23,28)/t13-,14-,15-,16+/m1/s1
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| 化学名 |
(S)-2-hydroxy-3-((R)-4-(((1r,4R)-4-morpholinocyclohexyl)oxy)-6,7-dihydro-5H-cyclopenta[4,5]thieno[2,3-d]pyrimidin-5-yl)propanamide
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| 别名 |
ND-2158; ND 2158; 1388896-07-8; CHEMBL3361255; (S)-2-Hydroxy-3-((R)-4-((trans-4-morpholinocyclohexyl)oxy)-6,7-dihydro-5H-cyclopenta[4,5]thieno[2,3-d]pyrimidin-5-yl)propanamide; (2S)-2-hydroxy-3-[(3R)-12-(4-morpholin-4-ylcyclohexyl)oxy-7-thia-9,11-diazatricyclo[6.4.0.02,6]dodeca-1(12),2(6),8,10-tetraen-3-yl]propanamide; ND2158.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2393 mL | 11.1967 mL | 22.3934 mL | |
| 5 mM | 0.4479 mL | 2.2393 mL | 4.4787 mL | |
| 10 mM | 0.2239 mL | 1.1197 mL | 2.2393 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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