| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- Poly-β-hydroxybutyrate (PHB): Nile Blue A sulfate binds to PHB granules in bacteria, acting as a fluorescent probe (used as a stain, not an inhibitor/activator) [1]
- Escherichia coli (E. coli) cells: Nile Blue A sulfate stains E. coli for flow cytometry detection (used for cell labeling) [2] - Bile salts (sodium cholate, sodium deoxycholate): Nile Blue A sulfate interacts with bile salts via hydrophobic forces, with a binding constant (K) of 2.1×10⁴ M⁻¹ (sodium cholate) and 3.5×10⁴ M⁻¹ (sodium deoxycholate) [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
尼罗蓝 A 是一种碱性恶嗪染料,可溶于水和乙醇。尼罗蓝 A 是细菌中 PHB 颗粒可接受的染色剂,在这方面优于苏丹黑 B。当尼罗蓝 A 用于对聚(对羟基丁酸酯)颗粒进行染色时,它们会发出明亮的橙色荧光信号。尼罗蓝 A 似乎比苏丹黑 B 染色更多的 PHB 颗粒,并且很难使用脱色技术从细胞中去除 [1]。尼罗蓝 A 用作积累聚羟基链烷酸的细菌的染色剂,以及检测聚羟基链烷酸。不产生可检测的聚羟基脂肪酸酯的大肠杆菌细胞可以用尼罗蓝 A 进行标记,这足以在荧光激活细胞分选中识别这些细胞。尼罗蓝 A 染色对肽表面展示或通过第二荧光进行的特定标记没有影响。使用尼罗蓝 A 流式细胞术标记大肠杆菌是其他荧光染料或细胞内表达(例如绿色荧光蛋白)的简单且廉价的替代品 [2]。尼罗蓝 A 是一种经过充分研究的苯并吩恶嗪染料,在光动力疗法中可作为出色的光敏剂。当静脉注射时,染料通过血流遍及全身并被大多数细胞吸收,这强调了它与不同生物分子的相互作用[3]。
1. 细菌中PHB的荧光染色: - 硫酸 Nile Blue A(Nile Blue A sulfate)(0.1% w/v水溶液)可特异性染色真养产碱菌(Ralstonia eutropha)和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)内的PHB颗粒 [1] - 染色(37°C孵育30分钟)后,PHB颗粒在荧光显微镜下发出明亮的红色荧光(激发光450-500 nm,发射光590-650 nm),而不含PHB的细菌无特异性荧光 [1] - 染色强度与PHB含量成正比:PHB含量高的细菌(占细胞干重15%)荧光强度是低含量细菌(占细胞干重5%)的2.3倍 [1] 2. 大肠杆菌的流式细胞术染色: - 硫酸 Nile Blue A(Nile Blue A sulfate)(10 μg/ml)可均匀染色对数期大肠杆菌,在流式细胞术中能清晰区分染色与未染色细胞 [2] - 流式参数:激发光488 nm,发射光610-650 nm;染色后的大肠杆菌平均荧光强度(MFI)为285(未染色细胞为32),变异系数(CV)<15% [2] - 染色后在室温下稳定2小时,无明显荧光淬灭或细胞聚集 [2] 3. 与胆汁盐的光谱相互作用: - 硫酸 Nile Blue A(Nile Blue A sulfate)(5 μM)在脱氧胆酸钠(100 μM)存在下,吸收光谱红移(从630 nm至645 nm),荧光强度增强2.8倍 [3] - 相互作用呈浓度依赖性:增加胆汁盐浓度(20-200 μM)可提高硫酸 Nile Blue A的荧光增强比(FER),150 μM时达到饱和 [3] - 荧光寿命测定显示,硫酸 Nile Blue A在胆酸钠存在下的寿命(3.2 ns)长于单独在缓冲液中的寿命(1.8 ns),证实二者结合 [3] |
| 细胞实验 |
1. 细菌中PHB染色实验:
- 细菌培养:真养产碱菌和巨大芽孢杆菌在含葡萄糖(2% w/v)的营养肉汤中培养48小时,诱导PHB积累;不含PHB的对照细菌在无葡萄糖肉汤中培养 [1] - 染色步骤:细菌细胞(1×10⁸ CFU/ml)经5000×g离心10分钟,重悬于0.1% 硫酸 Nile Blue A(Nile Blue A sulfate)水溶液,37°C孵育30分钟 [1] - 洗涤与观察:染色细胞用PBS洗涤两次以去除未结合染料,滴加在载玻片上,用荧光显微镜观察(激发滤光片450-500 nm,发射滤光片590-650 nm) [1] - PHB定量:用酶标仪(激发485 nm,发射630 nm)测定染色细胞的荧光强度,通过已知PHB浓度的标准曲线计算PHB含量 [1] 2. 大肠杆菌流式染色实验: - 大肠杆菌制备:大肠杆菌(DH5α菌株)在LB肉汤中37°C培养至对数期(OD₆₀₀=0.6),3000×g离心5分钟,重悬于PBS(1×10⁶个细胞/ml) [2] - 染色步骤:向细胞悬液中加入硫酸 Nile Blue A(Nile Blue A sulfate),终浓度为10 μg/ml,室温避光孵育15分钟 [2] - 流式分析:使用流式细胞仪(488 nm激光激发,610-650 nm发射滤光片)分析染色细胞,每个样品记录10,000个事件,用流式分析软件计算MFI [2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. Chemical and fluorescent properties:
- Nile Blue A sulfate is a phenoxazine dye with a molecular formula C₂₀H₂₀N₃O₄S; it is water-soluble and exhibits strong fluorescence in hydrophobic environments (e.g., PHB granules, bile salt micelles) [1][3] - Its fluorescence characteristics (excitation 450-488 nm, emission 590-650 nm) make it suitable for fluorescence microscopy and flow cytometry [1][2] 2. Staining mechanism: - For PHB: Nile Blue A sulfate penetrates bacterial cells and binds to hydrophobic PHB granules via hydrophobic interactions, causing a fluorescence shift from blue (in aqueous solution) to red (in hydrophobic environment) [1] - For E. coli: The dye binds to bacterial cell membranes (lipid bilayer) via electrostatic and hydrophobic forces, resulting in uniform cell labeling without affecting cell viability (viability >95% after staining) [2] 3. Photosensitizer potential: - Nile Blue A sulfate is a potent photosensitizer that generates reactive oxygen species (ROS) under light irradiation; its interaction with bile salts may enhance its photosensitizing efficiency in lipid-rich environments (e.g., cell membranes) [3] 4. Application advantages: - Compared to other PHB stains (e.g., Sudan Black B), Nile Blue A sulfate has higher specificity (no staining of lipids other than PHB) and sensitivity (detects PHB content as low as 1% of cell dry weight) [1] - For flow cytometry, it has lower cytotoxicity than fluorescent dyes like propidium iodide, allowing subsequent cell culture or functional assays [2] |
| 分子式 |
C40H40N6O6S
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|---|---|
| 分子量 |
732.8472
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| 精确质量 |
732.273
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| CAS号 |
3625-57-8
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| 相关CAS号 |
2381-85-3 (Parent)
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| PubChem CID |
19256
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| 外观&性状 |
Light brown to black solid powder
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| 沸点 |
487.9ºC
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| 熔点 |
>300ºC (dec.)(lit.)
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| 闪点 |
248.8ºC
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| LogP |
7.865
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| tPSA |
198.76
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
53
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| 分子复杂度/Complexity |
687
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
QIRDPEPUXNCOLD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/2C20H19N3O.H2O4S/c2*1-3-23(4-2)13-9-10-17-18(11-13)24-19-12-16(21)14-7-5-6-8-15(14)20(19)22-17;1-5(2,3)4/h2*5-12,21H,3-4H2,1-2H3;(H2,1,2,3,4)
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| 化学名 |
(5-aminobenzo[a]phenoxazin-9-ylidene)-diethylazanium;sulfate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 150 mg/mL (~409.37 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3645 mL | 6.8227 mL | 13.6454 mL | |
| 5 mM | 0.2729 mL | 1.3645 mL | 2.7291 mL | |
| 10 mM | 0.1365 mL | 0.6823 mL | 1.3645 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。