Nile Red

别名: 尼罗红;Nile Red 尼罗红;9-(二乙胺基)-5H-苯并[a]吩恶嗪-5-酮;尼罗丝
目录号: V29468 纯度: ≥98%
尼罗红(尼罗蓝恶酮)是一种亲脂性染色剂。
Nile Red CAS号: 7385-67-3
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
50mg
100mg
250mg
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
尼罗红(尼罗蓝噁嗪)是一种亲脂性染料。尼罗红具有环境敏感性荧光。在富含脂质的环境中,尼罗红发出强烈的荧光,而在水性介质中荧光较弱。尼罗红是一种优良且重要的染料,可用于荧光显微镜和流式细胞术检测细胞内脂滴。尼罗红可将细胞内脂滴染成红色。荧光波长为559/635 nm。
尼罗红(CAS号:7385-67-3),又称尼罗蓝A噁嗪或苯噁嗪9,是一种不带电荷的疏水性苯并苯噁嗪染料。它可用作极性敏感荧光探针,用于检测和可视化细胞内脂滴和蛋白质的疏水结构域。尼罗红广泛应用于细胞生物学、生物化学和环境研究,用于研究脂质代谢和脂质相关疾病。
生物活性&实验参考方法
靶点
Nile Red does not have a pharmacological target but serves as a fluorescent probe for lipids and hydrophobic environments. It selectively stains neutral lipids, including triglycerides and cholesteryl esters, within cells. It can also label the hydrophobic domains of proteins and identify lysosomal phospholipid inclusions. Its fluorescence intensity and wavelength are sensitive to the polarity of the local environment.
体外研究 (In Vitro)
1.1 使用DMSO配制1mM的储备液。1.2 用预热的无血清细胞培养基或PBS上样储存液替换工作液,最终浓度为200-1000 nM。注意:请根据实际情况调整尼罗红工作液的浓度。2. 细胞染色 2.1 悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS洗涤两次,每次5分钟。贴壁细胞:弃去培养基,加入胰岛消化后的细胞。离心并弃去上清液后,用PBS洗涤两次,每次5分钟。2.2 加入1 mL尼罗红工作液,过滤5-10分钟。2.3 4℃下以400 g离心3-4分钟,弃去上清液。2.4 用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。 2.5 将细胞重悬于 1 mL 无血清培养基或 PBS 缓冲液中,并使用荧光显微镜观察。
在体外,尼罗红可用作细胞内脂质和蛋白质疏水结构域的荧光探针。它能选择性地对多种细胞类型中的脂滴进行染色,使其成为研究脂质代谢、脂肪细胞分化和脂质相关疾病的有效工具。尼罗红在水性环境中荧光猝灭,但在疏水性环境中则发出强烈的荧光。尼罗红也可用于对溶酶体磷脂包涵体进行染色。
体内研究 (In Vivo)
观察用尼罗红染色的C线虫的绿色荧光,可以在其肠道和其他组织中看到明显的脂质体,这些脂质体均匀分布或呈簇状聚集,具体取决于动物的基因型和实验方法[3]。
在体内,尼罗红被用作荧光染料,用于对斑马鱼幼虫或秀丽隐杆线虫等活体生物中富含脂质的结构进行成像。它可以被施用于活体生物,以观察脂质储存和脂肪代谢。然而,由于其疏水性和高浓度下的潜在毒性,其应用受到限制。
酶活实验
尼罗红用于荧光显微镜和流式细胞术检测脂质。将细胞或组织与浓度通常为 0.1 至 10 µg/mL 的尼罗红在 PBS 或培养基中孵育 5 至 30 分钟。孵育后,洗涤细胞,并使用激发/发射波长约为 550-560/580-640 nm 的荧光显微镜或流式细胞仪测量荧光强度。
细胞实验
尼罗红用于对培养细胞中的脂滴进行染色。将细胞接种于盖玻片或多孔板中,用尼罗红(0.1-10 µg/mL)在37°C下处理5-30分钟,然后洗涤。染色后的细胞通过荧光显微镜观察(激发/发射波长约为550/580-640 nm)。脂滴含量可通过荧光强度测量或图像分析进行定量。
动物实验
利用尼罗红进行体内动物实验,可以观察斑马鱼幼体或秀丽隐杆线虫等活体生物体内的脂质储存情况。将生物体与尼罗红在水或培养基中孵育1-24小时,洗涤后,使用荧光显微镜成像。可以评估整个生物体或特定组织中的脂滴分布和丰度。
药代性质 (ADME/PK)
尼罗红是一种荧光染料,不具备药物的药代动力学特性。它在研究中以外源性方式应用于细胞或生物体。其细胞摄取主要依赖于其亲脂性,并会在富含脂质的细胞器中积聚。它不作为治疗药物进行全身给药。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
尼罗红是一种荧光染料,不可用于人类食用或治疗用途。操作时应采取适当的实验室安全防护措施,包括佩戴手套和护目镜。在细胞培养中高浓度使用时可能产生毒性。它被归类为潜在刺激物。
参考文献

[1]. Nile red: a selective fluorescent stain for intracellular lipid droplets. J Cell Biol. 1985 Mar;100(3):965-73.

[2]. How to use Nile Red, a selective fluorescent stain for microalgal neutral lipids. J Microbiol Methods. 2016 Sep;128:74-79.

[3]. Quantification of Lipid Abundance and Evaluation of Lipid Distribution in Caenorhabditis elegans by Nile Red and Oil Red O Staining. J Vis Exp. 2018 Mar 5;(133):57352.

[4]. Biochemical and high throughput microscopic assessment of fat mass in Caenorhabditis elegans. J Vis Exp. 2013 Mar 30;(73):50180.

其他信息
尼罗红是一种有机杂环化合物,是5H-苯并[a]吩恶嗪-5-酮,其9位被二乙氨基取代。它可用作荧光染料和组织学染料。它是一种有机杂环化合物、环酮、芳香胺和叔胺化合物。
尼罗红是一种极性敏感的荧光探针,适用于中性脂质和疏水环境,广泛用于细胞内脂滴和疏水性蛋白结构域的染色。它可用于研究脂质代谢、脂肪细胞分化和脂质相关疾病。它不是药物,也没有获得临床批准。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C20H18N2O2
分子量
318.36912
精确质量
318.136
CAS号
7385-67-3
PubChem CID
65182
外观&性状
Green to dark green solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
484.7±45.0 °C at 760 mmHg
熔点
203-205 °C(lit.)
闪点
246.9±28.7 °C
蒸汽压
0.0±1.2 mmHg at 25°C
折射率
1.644
LogP
3.65
tPSA
46.34
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
564
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
VOFUROIFQGPCGE-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C20H18N2O2/c1-3-22(4-2)13-9-10-16-18(11-13)24-19-12-17(23)14-7-5-6-8-15(14)20(19)21-16/h5-12H,3-4H2,1-2H3
化学名
9-(diethylamino)benzo[a]phenoxazin-5-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
Ethanol : ~1 mg/mL (~3.14 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1410 mL 15.7050 mL 31.4100 mL
5 mM 0.6282 mL 3.1410 mL 6.2820 mL
10 mM 0.3141 mL 1.5705 mL 3.1410 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们