| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Somatostatin sst4 receptor; - Somatostatin receptor subtype 4 (SST₄)
- NNC 26-9100 showed a Kᵢ of 6 nM at human SST₄ and >100-fold selectivity over SST₁, SST₂, SST₃, or SST₅ [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
- SST₄介导的cAMP抑制：
1. BHK细胞实验：稳定表达人SST₄的幼仓鼠肾（BHK）细胞经NNC 26-9100（0.1–100 nM）处理1小时后，完全抑制福司可林诱导的cAMP积累，EC₅₀为2 nM [1] 2. 选择性分析：NNC 26-9100对SST₄的选择性超过M₁毒蕈碱受体（Kᵢ=500 nM）和D₃多巴胺受体（Kᵢ=1000 nM）100倍以上 [1] - Aβ₄₂寡聚体缓解作用： 1. BV2小胶质细胞实验：NNC 26-9100（10–100 nM）以剂量依赖方式降低可溶性Aβ₄₂寡聚体诱导的细胞毒性（MTT法）和一氧化氮（NO）生成（Griess试剂检测） [2] 2. 金属蛋白酶激活：NNC 26-9100（100 nM）增加小胶质细胞中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）活性（明胶酶谱法）和Aβ₄₂吞噬作用（流式细胞术），该效应可被金属蛋白酶抑制剂阻断 [2] 本文描述了对肽激素生长抑素（SST）受体具有高亲和力的新型非肽化合物的发现。测试了这些化合物对哺乳动物细胞中单独表达的五种人类SST受体亚型的亲和力。化合物NNC 26-9100在SST4时显示Ki为6nM，SST4的选择性是SST1、SST2、SST3或SST5的100倍以上。NNC 26-9100与SST相互作用的竞争结合研究和Scatchard分析显示了SST4的特异性。此外，NNC 26-9100对SST4的选择性高于各种其他G蛋白偶联受体，对M1毒蕈碱乙酰胆碱和D3多巴胺受体的亲和力分别约为500和1000 nM。最后，发现NNC 26-9100可以完全抑制毛喉素诱导的幼仓鼠肾细胞中3'，5'-环磷酸腺苷的积累，表达人SST4受体，EC50为2 nM。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在这项研究中，研究人员使用加速衰老的小鼠prone-8（SAMP8）模型，评估了选择性SSTR4激动剂NNC 26-9100对学习和可溶性Aβ42寡聚体脑含量变化的影响，无论是否同时服用M13金属蛋白酶家族酶抑制剂磷酰胺。NNC 26-9100治疗（0.2µg i.c.v.in 2µL）改善了学习，这被磷酰胺（分别为1和10mM）阻断。NNC 26-9100降低了总可溶性Aβ42，这种作用被磷酰胺（10mM）阻断。然后从皮质组织中分离出细胞外、细胞内和膜部分，并评估可溶性寡聚体的改变。NNC 26-9100降低了细胞外和细胞内部分的Aβ42三聚体（12 kDa）形式，并在细胞外部分产生了Aβ42六聚体（25 kDa）的条带分裂效应。这些作用也被磷雷公藤（分别为1和10mM）阻断。随后在APPswe Tg2576转基因小鼠中对NNC 26-9100的评估显示，细胞外、细胞内和膜组分中的可溶性aβ42寡聚体也有类似的学习改善和相应的减少。这些数据支持NNC 26-9100减少可溶性Aβ42寡聚体并通过磷酰胺敏感的金属蛋白酶依赖机制增强学习的假设[2]。
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| 酶活实验 |
结合试验。[1]
将表达单个SST受体亚型的细胞重新悬浮在缓冲液（50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、1 mM EGTA、5 mM MgCl2）中，并均质化。通过均化和离心在缓冲液中洗涤膜两次。将最终的膜沉淀物以125μg/mL的蛋白质浓度重新悬浮在缓冲液中。使用75 pM 125I-Tyr11-SRIF（Amersham，IM-161）在体积为250μl的迷你球形聚丙烯管中进行两次结合分析。根据受体亚型，将试验在30-37°C下孵育30-90分钟。通过Whatman GF/B玻璃纤维过滤器过滤终止结合，该过滤器在0.5%聚乙烯亚胺和0.1%BSA中预浸4小时。用5毫升冰冷的0.9%盐水洗涤过滤器三次，并在Packard Cobra II伽马计数器中计数。 CRO公司使用表2中提到的放射性配体，使用来自兔肾上腺（ATII）、豚鼠回肠（B2）、大鼠胰腺（CCKA）、小鼠脑（CCKB）、人重组体（D3）、A10细胞（ETA）、大白鼠小脑（ETB）、大鼠类脑（甘丙肽）、鼠大脑皮层（M1）、大蟾蜍心脏（M2）、豚鼠颌下腺（NK1）、兔肾髓质（Y2）、大熊猫大脑皮层（5-HT1A）、兔回肠（5-HT3）和豚鼠肺（VIP）的质膜制剂，对其他G蛋白偶联受体进行了检测 功能测定。[1] 将表达人SST受体的细胞以200 000个细胞/孔的速度接种在24孔组织培养多层中，并生长16-20小时。取出培养基，加入新鲜的DMEM培养基，补充（1）3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX），（2）福司克林或培养基，以及（3）培养基、SRIF、SST类似物或化合物。将平板在37°C下孵育15-30分钟，取出反应培养基，用0.1 M氢氧化钠裂解细胞。用0.1M盐酸中和后，取一等分试样，使用Amersham SPA RIA（RPA 538）测定c-AMP。 - SST₄受体结合实验[1]： 1. 膜制备：将表达人SST₄的HEK293细胞膜与[¹²⁵I]-Tyr¹¹-生长抑素-14（0.1 nM）及递增浓度的NNC 26-9100（0.1–10,000 nM）在结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4）中于25°C孵育2小时。 2. 分离：通过GF/C滤膜过滤分离结合的放射性配体，γ计数测量放射性。 3. 数据分析：特异性结合通过减去非特异性结合（1 μM未标记生长抑素-14）计算。Kᵢ值使用Cheng-Prusoff方程确定。 - MMP-9酶谱实验[2]： 1. 细胞培养：BV2小胶质细胞经NNC 26-9100（100 nM）或溶媒处理24小时。 2. 样品制备：条件培养基在含明胶（1 mg/mL）的10% SDS-PAGE凝胶上电泳。 3. 活性检测：凝胶在Triton X-100（2.5%）中复性，于显影缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM CaCl₂）中孵育48小时，考马斯亮蓝染色。清晰条带指示MMP-9活性。 |
| 细胞实验 |
生物测定。[1]
表达SST受体亚型的细胞系。BHK细胞（tk-ts13，ATCC CRL编号1632）和HEK 293细胞（ATCC CRL编号1573）在含有1%青霉素/链霉素、10%胎牛血清和1%谷氨酸的DMEM组织培养皿中生长至20-40%融合。转染前，用无钙PBS洗涤细胞两次，然后向细胞中加入20mL无血清DMEM 如前所述进行转染（产品描述：脂质体）。简而言之，将10μg编码SST受体亚型的c-DNA插入哺乳动物表达载体pcDNA3中，在300μL无菌水中稀释。将脂质体（30μg）稀释在300μL无菌水中。将c-DNA和脂质体蛋白溶液混合，在室温下放置15分钟。将脂质体蛋白/c-DNA混合物滴加到细胞中（SST2为HEK 293细胞，其他受体亚型为BHK），同时轻轻旋转平板。然后将细胞孵育16-24小时，之后用含有1mg/mL Geneticin（G-418硫酸盐）的标准培养基替换培养基。分离1-2周后出现的抗性菌落并繁殖以进一步鉴定。 - cAMP积累实验[1]： 1. 细胞培养：将BHK-SST₄细胞接种于96孔板（2×10⁴细胞/孔），与NNC 26-9100（0.1–100 nM）预孵育15分钟。 2. 刺激：细胞用福司可林（10 μM）于37°C处理30分钟。 3. 检测：使用竞争性ELISA试剂盒测量细胞内cAMP水平，以蛋白含量（BCA法）归一化。 - Aβ₄₂吞噬实验[2]： 1. 细胞标记：Aβ₄₂寡聚体用Alexa Fluor 488标记，与BV2小胶质细胞孵育2小时。 2. 药物处理：细胞在Aβ₄₂暴露前用NNC 26-9100（100 nM）或溶媒预处理1小时。 3. 分析：通过流式细胞术量化吞噬作用，测量内化Aβ₄₂的平均荧光强度。 |
| 动物实验 |
动物[2]
本研究采用12月龄雄性SAMP8或APPswe Tg2576（模型002789）小鼠进行评估。小鼠饲养于光照/黑暗周期为12小时（20–22°C）的房间内，并可自由摄取水和食物。所有实验均按照机构动物使用小组委员会的批准进行，该小组委员会遵循美国国立卫生研究院（NIH）《实验动物饲养和使用指南》。 给药[2] NNC 26-9100通过脑室内（icv）注射给药。先前研究发现，脑室内注射NNC 26-9100（0.2 μg）可增强12月龄SAMP8小鼠的学习能力（Sandoval等，2012）。本研究采用联合给药的方式，测试了NNC 26-9100与M13家族抑制剂磷酰胺酮（1或10 mM）（美国肽公司，加利福尼亚州桑尼维尔）的联合作用，并与相应的对照组进行比较。既往研究表明，脑室内注射磷酰胺酮可在2小时内提高可溶性Aβ水平（Eckman等，2006）。 简而言之，在T迷宫测试前24小时，用异氟烷麻醉小鼠，并将其固定在立体定位仪上。打开头皮，在颅骨囟前0.5 mm、右1.0 mm处钻一个单侧孔。使用连接汉密尔顿注射器的30G钝头针，将NNC 26-9100（0.2 μg）与磷酰胺（1或10 mM）或溶剂对照（20%乙醇/生理盐水）进行单次脑室内（icv）注射（2 μL），注射深度为2 mm。注射器通过侧臂固定。注射过程缓慢进行，持续约1分钟，注射完成后注射器保持原位3秒，以确保无回流。注射孔用骨蜡填充，头皮用Vetbond胶水密封。在行为学评估之后，并在进行相应的组织学评估之前，沿注射部位切开脑组织，以确保注射的准确性。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
机制研究：
1. SST₄ 激活：NNC 26-9100 通过 Gαᵢ 蛋白偶联抑制腺苷酸环化酶，从而降低 cAMP 水平 [1] 2. 神经保护作用：在小胶质细胞中，NNC 26-9100 通过激活 MMP-9 依赖的 Aβ 清除途径来减轻 Aβ₄₂ 寡聚体的毒性 [2] - 选择性原理：该化合物的螺环核心和硫脲连接基使其具有较高的 SST₄ 结合特异性 [1] - 临床前意义：像 NNC 26-9100 这样的 SST₄ 激动剂正在被探索用于治疗阿尔茨海默病和神经炎症性疾病 [2] 1-[3-[(5-溴-2-吡啶基)-[(3,4-二氯苯基)甲基]氨基]丙基]-3-[3-(1H-咪唑-5-基)丙基]硫脲是一种氨基吡啶。 |
| 分子式 |
C22H25BRCL2N6S
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|---|---|
| 分子量 |
556.35
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| 精确质量 |
554.042
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| 元素分析 |
C, 47.50; H, 4.53; Br, 14.36; Cl, 12.74; N, 15.11; S, 5.76
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| CAS号 |
199522-35-5
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| PubChem CID |
9893924
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.482g/cm3
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| 沸点 |
731.167ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
395.996ºC
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| 蒸汽压 |
0mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.668
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| LogP |
6.149
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| tPSA |
100.96
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
11
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
563
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC(=C(C=C1CN(CCCNC(=S)NCCCC2=CN=CN2)C3=NC=C(C=C3)Br)Cl)Cl
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| InChi Key |
UREJDUPKGMFJRU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H25BrCl2N6S/c23-17-5-7-21(29-12-17)31(14-16-4-6-19(24)20(25)11-16)10-2-9-28-22(32)27-8-1-3-18-13-26-15-30-18/h4-7,11-13,15H,1-3,8-10,14H2,(H,26,30)(H2,27,28,32)
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| 化学名 |
1-[3-[(5-bromopyridin-2-yl)-[(3,4-dichlorophenyl)methyl]amino]propyl]-3-[3-(1H-imidazol-5-yl)propyl]thiourea
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| 别名 |
NNC-269100; NNC 269100; 199522-35-5; ML156; CHEMBL103769; 9X9D329ZX2; 1-[3-[(5-bromo-2-pyridinyl)-[(3,4-dichlorophenyl)methyl]amino]propyl]-3-[3-(1H-imidazol-5-yl)propyl]thiourea; NNC269100
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7974 mL | 8.9871 mL | 17.9743 mL | |
| 5 mM | 0.3595 mL | 1.7974 mL | 3.5949 mL | |
| 10 mM | 0.1797 mL | 0.8987 mL | 1.7974 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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