ODN-M-362

目录号: V44309 纯度: ≥98%
ODN-M-362 是一种新型 C 类寡脱氧核苷酸,作为强效 TLR9 激动剂,有可能用作癌症治疗的疫苗佐剂。
ODN-M-362 CAS号: 934655-87-5
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
ODN-M-362 是一种新型 C 类寡脱氧核苷酸,具有作为强效 TLR9 激动剂的潜力,有望用作癌症治疗的疫苗佐剂。它能够诱导癌细胞凋亡。ODN-M-362 通过上调 TLR9 诱导初始固有免疫反应,进而增强 MamA 特异性 CTL 依赖性适应性免疫反应,从而发挥强大的佐剂作用。这些数据为将 B/C 类 CpG-ODN 作为潜在的疫苗佐剂以提高基于 MamA 的乳腺癌疫苗的成功率提供了证据。
ODN-M-362(CAS号:934655-87-5)是一种合成的C类寡脱氧核苷酸(ODN),可作为强效的Toll样受体9(TLR9)激动剂。它特异性靶向人和小鼠的TLR9,并已显示出作为癌症治疗疫苗佐剂的潜力。其序列受商业秘密保护,旨在诱导平衡的免疫反应,最终导致癌细胞凋亡。
生物活性&实验参考方法
靶点
ODN-M-362 specifically targets Toll-like receptor 9 (TLR9), a pattern recognition receptor expressed in endosomes of immune cells, particularly plasmacytoid dendritic cells (pDCs) and B cells. By binding to TLR9, ODN-M-362 triggers an initial innate immune response via TLR9 upregulation. This is followed by the enhancement of MamA-specific CTL (cytotoxic T lymphocyte)-dependent adaptive immune responses, resulting in a powerful and balanced adjuvant effect.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,ODN-M-362可诱导树突状细胞活化和成熟,进而促进促炎细胞因子的产生。它已被证实能诱导癌细胞凋亡。在免疫细胞培养中,它能上调抗原呈递细胞上CD80和CD86等共刺激分子的表达。此外,它还能促进B细胞的增殖和分化,以及自然杀伤(NK)细胞的活化。
体内研究 (In Vivo)
体内实验表明,ODN-M-362具有显著的佐剂效应。当与肿瘤抗原联合使用时,它能促进产生抗原特异性CTL反应,从而清除已形成的肿瘤。ODN-M-362展现出作为癌症疫苗佐剂的潜力,它可以通过打破免疫耐受并产生强大的抗肿瘤免疫力来增强癌症疫苗的疗效。
酶活实验
对于非细胞介导的TLR9结合实验,标准方案包括使用固定在链霉亲和素包被表面上的生物素化CpG DNA配体。将重组人或小鼠TLR9与该配体板孵育。然后加入浓度范围为0.1 nM至10 uM的ODN-M-362以竞争性结合。使用特异性抗体和HRP标记的二抗检测结合的TLR9量。计算竞争性结合的IC50值。
细胞实验
对于体外细胞实验,将小鼠脾细胞或人外周血单核细胞 (PBMC) 接种于 96 孔板中。加入不同浓度 (0.1-10 uM) 的 ODN-M-362,孵育 24-48 小时。收集上清液,通过 ELISA 或多重免疫分析法检测细胞因子(例如 IFN-α、IL-6、TNF-α、IP-10)。或者,也可以使用在 TLR9 激活后表达 SEAP(分泌型碱性磷酸酶)的报告细胞系来检测 NF-κB 和 IRF7 通路的激活情况。
动物实验
对于体内动物模型,采用肿瘤疫苗模型。将肿瘤细胞(例如,EG7-OVA胸腺瘤细胞)皮下注射到小鼠体内。在肿瘤攻击后的第3、7和11天,用肿瘤抗原(例如,OVA蛋白)与ODN-M-362(每剂50微克)和合适的递送载体混合,对小鼠进行免疫接种。对照组仅接受抗原注射。监测肿瘤生长情况并记录小鼠存活率。当肿瘤体积超过2000 mm³时,对小鼠实施安乐死。使用来自已接种疫苗小鼠的脾细胞,通过标准的铬释放试验评估CTL活性。
药代性质 (ADME/PK)
ODN-M-362 是一种合成寡核苷酸,其骨架带有硫代磷酸酯基团,显著提高了代谢稳定性。这种修饰可保护其免受血清和组织中核酸酶的快速降解,从而延长其体内半衰期。它通常局部给药(例如,肌内注射或瘤内注射),以使免疫刺激作用集中在目标部位。虽然也会发生全身分布,这既有助于发挥全身佐剂效应,也可能导致潜在的毒性。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
作为一种强效的TLR9激动剂,ODN-M-362具有潜在的机制性毒性。免疫系统过度激活可导致“细胞因子释放综合征”(CRS),其特征为高热、低血压和多器官功能衰竭。在临床前模型中,高剂量全身给药可能导致短暂性脾肿大和淋巴滤泡增大。它还可能加重已存在的自身免疫性疾病。必须仔细优化剂量和给药方案,以平衡疗效和毒性。
参考文献

[1].Babaer D, et al. Oligodeoxynucleotides ODN 2006 and M362 Exert Potent Adjuvant Effect through TLR-9/-6 Synergy to Exaggerate Mammaglobin-A Peptide Specific Cytotoxic CD8+T Lymphocyte Responses against Breast Cancer Cells. Cancers (Basel). 2019 May 14;11(5):672.

[2].Zhang Y, et al. Phosphorothioate-modified CpG oligodeoxynucleotide (CpG ODN) induces apoptosis of human hepatocellular carcinoma cells independent of TLR9. Cancer Immunol Immunother. 2014 Apr;63(4):357-67.

其他信息
ODN-M-362 是一种研究级试剂,并非获批药物。作为一种 C 类 CpG ODN,其独特的结构使其能够同时具备 A 类 ODN 的强效 pDC 活化作用(产生 IFN-α)和 B 类 ODN 的强效 B 细胞活化作用(增殖和抗体产生)。这使其在需要同时产生强效抗体反应和强效 T 细胞反应的应用领域(例如癌症免疫疗法)中具有独特的吸引力。该产品尚未获准用于人体,仅供研究用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
NA  MOLECULARWEIGHT
CAS号
934655-87-5
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~100 mg/mL (~12.42 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们