Olanzapine N-Oxide   中文名称: 奥氮平氮氧化物

Olanzapine metabolite

CYP2D6的多态性可能是CYP2D6活性个体间差异较大的原因（Ozawa等人，2004）；然而，据报道，奥氮平清除率不受CYP2D6基因型的影响（Carrillo等人，2003；Nozawa等人，2008）。此外，FMO3也有等位基因变体（Shimizu等人，2014；Yamazaki和Shimizu，2013）。FMO3的六种遗传变异在日本人群中出现频率很高：E158K、C197fsX、R205C、V257M、E308G和R500X（Shimizu等人，2014）。据报道，高加索人中FMO3纯合子携带者（p.E308G）的olanzapine N-oxide/奥氮平氮氧化物血浆浓度明显低于野生或杂合子基因型携带者（Soderberg等人，2013）。另一组报告称，奥氮平的副作用频率与欧洲裔美国人、拉丁美洲人、非裔美国人和亚裔美国人的FMO3变体E158K、V257M和E308G有关（Cashman等人，2008）。然而，在日本人群中，FMO3基因型对奥氮平清除率的影响尚未明确。
在本研究中，使用人肝微粒体、重组酶和取自接受奥氮平治疗的日本患者的血浆样本，研究了CYP1A2、CYP2D6和FMO3对奥氮平代谢清除的贡献。我们报告说，在目前的条件下，CYP2D6和FMO3基因型和吸烟行为不会影响奥氮平清除率作为单一决定因素[1]。

使用双辛可宁酸蛋白测定试剂盒估算微粒体蛋白浓度。使用高效液相色谱法（HPLC）测定奥氮平的N-去甲基化、N-氧化和2-羟基化活性以及底物消失率。典型的孵化混合物由100 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.4 或8.4），5-400 μM奥氮平、人肝微粒体（0.30 mg蛋白质/mL）或重组P450s/FMO3（20 pmol/mL）和NADPH生成系统（0.25 mM NADP+，2.5 mM葡萄糖6-磷酸和0.25单位/mL葡萄糖磷酸脱氢酶）的最终体积为0.25 除非另有说明，否则在不存在或存在与底物相同浓度的P450抑制剂的情况下，浓度为mL。为了研究FMO3活性对奥氮平氧合的贡献，将人肝微粒体预热至45℃ 5°C 在没有NADPH生成系统的情况下，至少灭活FMO3。37岁时进行孵化 45°C min，并通过添加250终止 μL冷乙腈。在这些培养中证实了奥氮平耗竭的线性。涡旋混合和离心后，将上清液注入HPLC系统。使用分析柱（Kinetex XB-C18，4.6 mm × 100 mm, 2.6 µm;Phenomenex，美国加利福尼亚州托兰斯），带防护柱（SecurityGuard Ultra C18，4.6 mm；现象）。流动相为55%甲醇（v/v），含75 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.0),流速为0.8 40时的mL/min °C.紫外线探测器设置为238 nm.
根据之前描述的方法，对非那西丁的N-脱甲基化、右美沙芬的O-脱甲基化和N-脱甲基以及苯丙胺的N-氧化活性进行了测定（Taniguchi Takizawa等人，2015；Uehara等人，2015，Uno等人，2010）。简而言之，标准培养混合物由100 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.4–8.4),NADPH生成系统，底物（50μM非那西丁，400 μM右美沙芬，或50 μM苯丙胺）和肝微粒体（0.125-0.300 mg蛋白质/mL），最终体积为0.20-0.25 mL。右美沙芬与肝微粒体在37℃下孵育 15°C min，通过加入10 μL 60%高氯酸（w/v）。苄胺在37℃下孵育 10°C min，通过加入200 μL冷乙腈。非那西丁在37℃下孵育 10°C min，通过加入1.5 mL乙酸乙酯和25 μL 3 M氯化钠。萃取后，在氮气流下蒸发有机相。产物形成通过HPLC用分析十八烷基硅烷（C18）柱（4.6mm × 150 mm, 5 µm），根据所述方法[1]。

Metabolism / Metabolites
Olanzapine N-Oxide is a known human metabolite of olanzapine.

Objective: The antipsychotic olanzapine is reportedly metabolized by inducible human cytochrome P450 (CYP) 1A2 and variable copy-number CYP2D6 and polymorphic flavin-containing monooxygenase 3 (FMO3) in different pathways. We investigated individual differences in the metabolite formation and clearance of olanzapine in vitro and in vivo. Methods: Human liver microsomal olanzapine oxidation activities were evaluated, and plasma concentrations of olanzapine were determined in 21 Japanese patients (mean age: 50 years, range: 32-69 years, 14 male and 7 female, including 6 smokers) genotyped for CYP2D6 (*1, *5, and *10) and FMO3 (E158K, C197fsX, R205C, V257M, E308G, and R500X). Results: Furafylline (a CYP1A2 inhibitor), quinidine (a CYP2D6 inhibitor), and heat treatment (inactivates FMO3) suppressed liver microsomal metabolic clearance of olanzapine by approximately 30%. Olanzapine N-demethylation and N-oxygenation were found to be catalyzed by CYP1A2 and CYP2D6 and by CYP2D6 and FMO3, respectively, in experiments using liver microsomes and recombinant enzymes. Plasma concentrations and clearance of olanzapine were not affected by CYP2D6 or FMO3 genotypes or smoking behavior. Conclusions: Olanzapine clearance was not affected by CYP2D6 or FMO3 genotypes or smoking behavior as a single factor under the present conditions because olanzapine clearance is mediated by multiple enzymes involved in two major and one minor pathways.[1]

C17H20N4OS

328.4319

328.135

C, 62.17; H, 6.14; N, 17.06; O, 4.87; S, 9.76

174794-02-6

135409492

Light brown to yellow solid powder

0.58

75.5

1

4

1

23

477

0

C[N+]1(CCN(C2NC3=CC=CC=C3N=C3SC(=CC=23)C)CC1)[O-]

LJVNYCDXBXGQIK-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C17H20N4OS/c1-12-11-13-16(20-7-9-21(2,22)10-8-20)18-14-5-3-4-6-15(14)19-17(13)23-12/h3-6,11,19H,7-10H2,1-2H3

2-methyl-4-(4-methyl-4-oxidopiperazin-4-ium-1-yl)-10H-thieno[2,3-b][1,5]benzodiazepine

174794-02-6; Olanzapine-N-oxide; Olanzapine specified impurity D [EP]; O055W43VHD; LY-170238; 10H-Thieno[2,3-b][1,5]benzodiazepine, 2-methyl-4-(4-methyl-4-oxido-1-piperazinyl)-; 1-Methyl-4-(2-methyl-10H-thieno(2,3-b)(1,5)benzodiazepin-4-yl)piperazin-1-oxide; 10H-Thieno(2,3-b)(1,5)benzodiazepine, 2-methyl-4-(4-methyl-4-oxido-1-piperazinyl)-;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。