| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ONO-4817 targets multiple MMPs, with Ki values as follows: MMP-12 (0.45 nM), MMP-2 (0.5 nM), MMP-9 (0.8 nM), MMP-13 (~1 nM), MMP-8 (~42 nM), MMP-3 (26 nM), and MMP-7 (~3 nM). It has negligible activity against MMP-1 (Ki ~2500 nM). The high selectivity for MMP-2, -9, and -12 (which are involved in atherosclerosis and inflammation) over MMP-1 (responsible for normal collagen turnover) is intended to reduce musculoskeletal side effects (e.g., joint pain) seen with non-selective MMP inhibitors. The compound acts by chelating the catalytic zinc ion and forming hydrogen bonds with the active site.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在利用重组人MMPs进行的无细胞酶活性测定中，ONO-4817的IC50值分别为：MMP-2 = 0.5 nM，MMP-9 = 0.8 nM，MMP-12 = 0.3 nM，MMP-3 = 26 nM，以及MMP-1 = 2500 nM（使用荧光底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2测定）。它以浓度依赖的方式抑制人MMP-9的活性，Hill系数约为1。在体外侵袭试验中，ONO-4817 (1-10 uM) 可抑制 HT1080 纤维肉瘤细胞通过 Matrigel 包被膜的侵袭，在 10 uM 时抑制率为 80% (IC50 ~2 uM)，这与条件培养基中 MMP-2 和 MMP-9 活性降低相关，该活性通过明胶酶谱法测定。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在兔动脉粥样硬化模型（高胆固醇饮食8周）中，从第4周到第8周，每日两次口服10 mg/kg的ONO-4817，与对照组相比，主动脉新生内膜面积显著减少了65%，并且通过原位酶谱分析降低了斑块中MMP-2和MMP-9的活性。在豚鼠LPS诱导的软骨蛋白聚糖降解模型中，口服10 mg/kg的ONO-4817可使滑液中糖胺聚糖的释放减少70%，并阻止软骨侵蚀。在小鼠肺转移模型（静脉注射B16-F10黑色素瘤细胞）中，每日口服30 mg/kg的ONO-4817可使肺转移灶数量减少80%，与溶媒组相比，且对原发肿瘤的生长无影响。它还抑制了 Matrigel 塞试验中的血管生成（30 mg/kg 时抑制 VEGF 诱导的新血管形成 50%）。
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| 酶活实验 |
标准MMP荧光测定：将重组人proMMP-2、-9或-12用1 mM APMA（4-氨基苯基乙酸汞）在37℃下活化1小时。将活化酶（0.5-2 nM）与浓度递增的ONO-4817（0.001-1000 nM）混合于测定缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、10 mM CaCl2、150 mM NaCl、0.05% Brij-35、0.02% NaN3）中。加入荧光底物（10 uM MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2）启动反应。在荧光酶标仪中，于25℃下每30秒监测一次荧光强度（激发波长328 nm，发射波长393 nm），持续30分钟。使用 GraphPad Prism 软件，以初始速度（RFU 与时间的关系斜率）为纵坐标，抑制剂浓度为横坐标作图，确定 IC50 值。Ki 值则使用 Cheng-Prusoff 方程计算。
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| 细胞实验 |
MMP-2 和 MMP-9 的明胶酶谱分析：将 HT1080 纤维肉瘤细胞 (1×10⁶) 在无血清 DMEM 培养基中培养 24 小时，分别添加或不添加 ONO-4817 (0.1、1、10 uM)。收集条件培养基，浓缩并校正蛋白质含量。将样品进行电泳，电泳胶为 10% SDS-聚丙烯酰胺凝胶，并添加 1 mg/mL 明胶。电泳后，用 2.5% Triton X-100 洗涤凝胶（30 分钟，重复两次）以去除 SDS，然后在显色缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM CaCl2、150 mM NaCl、0.05% Brij-35）中于 37℃ 孵育 18 小时。凝胶用 0.5% 考马斯亮蓝 R-250 染色，然后脱色。通过密度分析法对 MMP 活性清晰条带（72 kDa 的 proMMP-2、62 kDa 的活性 MMP-2 和 92 kDa 的 proMMP-9）进行定量分析。
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| 动物实验 |
动脉粥样硬化兔模型：雄性新西兰白兔（2.5-3.0 kg）饲喂高胆固醇饮食（0.5%胆固醇，3%椰子油）12周以诱导动脉粥样硬化。从第4周开始，将兔子随机分组（每组n=10），分别接受赋形剂（0.5%甲基纤维素）或ONO-4817（1、3或10 mg/kg，每日两次口服）。第12周末，处死兔子。取出主动脉，固定后用油红O染色以测量斑块面积。此外，将胸主动脉匀浆化，用于原位酶谱分析以定量MMP活性（与DQ-明胶孵育，荧光测量）。对横切面进行Mac-3（巨噬细胞）和α-SMA（平滑肌）的免疫组织化学染色。采集血样进行血脂分析和MMP-9水平（ELISA）检测。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
兔口服药代动力学：单次口服10 mg/kg ONO-4817后，血浆峰浓度（Cmax）为0.8 μM，达峰时间（Tmax）为1.5 h，AUC0-24 = 3.2 μM·h，末端半衰期为2.8 h。口服生物利用度为42%。大鼠（10 mg/kg 口服）中，Cmax = 1.2 μM，t1/2 = 2.1 h，生物利用度为56%。人体血浆蛋白结合率为88%（主要与白蛋白结合）。代谢途径为葡萄糖醛酸化和CYP3A4介导的氧化；主要代谢产物为羟肟酸的O-葡萄糖醛酸苷（无活性）。肾脏排泄占清除率的60%。重复给药后未见明显蓄积。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项为期4周的大鼠重复给药口服毒性研究中（剂量：10、30、100 mg/kg/天），无观察到不良反应剂量（NOAEL）为30 mg/kg。在100 mg/kg剂量下，动物出现轻度体重下降（7%）、食物摄入量减少以及血清碱性磷酸酶（ALP，升高1.5倍）和丙氨酸氨基转移酶（ALT，升高2倍）轻度升高。组织病理学检查显示肝细胞空泡化和肾小管嗜碱性粒细胞增多。未观察到肌肉骨骼综合征（关节肿胀、肌腱炎症），这与MMP-1抑制作用相符。在犬类中（4周，剂量：5、15、50 mg/kg/天），NOAEL为15 mg/kg；在50 mg/kg剂量下，观察到呕吐和软便。该化合物在Ames试验和体内微核试验中均为阴性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ONO-4817 已进入临床前开发阶段，但未进入 I 期临床试验，这可能是由于 MMP 抑制剂普遍面临的挑战（疗效与安全性之间的权衡）。它仍然是研究 MMP-2/9/12 在动脉粥样硬化、关节炎和癌症侵袭中作用的重要研究工具。目前，该药物仅供研究使用。与其他广谱 MMP 抑制剂（例如，马立马司他）不同，ONO-4817 在动物模型中表现出较低的肌肉骨骼毒性，因此更适合长期体内研究。目前尚无临床试验数据。该化合物有时被称为“MMP 抑制剂 V”，但该名称尚未标准化。
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| 分子式 |
C22H28N2O6
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|---|---|
| 分子量 |
416.467526435852
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| 精确质量 |
416.195
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| CAS号 |
223472-31-9
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| PubChem CID |
9888141
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.901
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| tPSA |
106.12
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
12
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
504
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
CCOCOC[C@H](C[C@H](C)C(=O)NO)NC(=O)C1=CC=C(C=C1)OC2=CC=CC=C2
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| InChi Key |
HDWWQELUBWGQGA-WMZOPIPTSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H28N2O6/c1-3-28-15-29-14-18(13-16(2)21(25)24-27)23-22(26)17-9-11-20(12-10-17)30-19-7-5-4-6-8-19/h4-12,16,18,27H,3,13-15H2,1-2H3,(H,23,26)(H,24,25)/t16-,18-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[(2S,4S)-1-(ethoxymethoxy)-5-(hydroxyamino)-4-methyl-5-oxopentan-2-yl]-4-phenoxybenzamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4011 mL | 12.0057 mL | 24.0113 mL | |
| 5 mM | 0.4802 mL | 2.4011 mL | 4.8023 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2006 mL | 2.4011 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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