Oryzalin

别名: ORYZALIN; 19044-88-3; Surflan; Dirimal; 4-(Dipropylamino)-3,5-dinitrobenzenesulfonamide; 安磺灵;3,5-二硝基-N',N'-二丙基磺胺;3,5-二硝基-N4,N4-丙基磺胺;氨磺乐灵;氨磺灵;N,N-二丙基-4-氨基磺酰基-2,6-硝基苯胺;黄草消(除草剂);黄草消;消草磺灵; 氨磺乐灵标准品; 氨磺乐灵 标准品;3,5-二硝基-N,N-二丙基磺胺;氟醚菌酰胺; 氨磺乐灵/ 氨磺灵
目录号: V45094 纯度: ≥98%
Oryzalin 是一种二硝基苯胺除草剂,可在体外与植物微管蛋白结合并抑制微管 (MT) 聚合。
Oryzalin CAS号: 19044-88-3
产品类别: New3
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纯度: ≥98%

产品描述
奥利扎林是一种二硝基苯胺类除草剂,它能在体外与植物微管蛋白结合,抑制微管聚合。奥利扎林在有丝分裂周期的多个阶段都能使微管解聚,并阻止新微管的聚合。
奥利扎林是一种二硝基苯胺类除草剂。其除草作用源于其与微管主要结构成分——微管蛋白的结合,从而发挥抗有丝分裂活性。二硝基苯胺类化合物与微管蛋白的相互作用具有极高的特异性:这类物质能有效结合植物和原生动物的微管蛋白,而几乎不与动物和真菌的微管蛋白结合。由于这种特异性,这类化合物包含一些有前景的抗寄生虫药物,已被证实对多种寄生性原生动物(例如利什曼原虫属)的微管蛋白具有活性。由于水溶性低(2.5 mg/L)且体内清除迅速,ORZ 作为抗寄生虫药物的潜在用途受到限制。[2]
奥利扎林(CAS:19044-88-3)是一种二硝基苯胺类除草剂,用于控制杂草。它是一种无腐蚀性的黄橙色结晶固体。该化合物的分子量为 346.36,化学式为 C₁₂H₁₈N₄O₆S。它也被称为 4-(二丙基氨基)-3,5-二硝基苯磺酰胺。它属于二硝基苯胺类和磺酰胺类除草剂。其作用机制是通过抑制细胞分裂过程中微管的形成。
生物活性&实验参考方法
靶点
Plant tubulin (from Rosa sp. cv. Paul‘s scarlet): apparent affinity constant (Kapp) for tubulin-oryzalin complex formation = 1.19•10⁵ M⁻¹ (24°C, pH 7.1); inhibition constant (Ki) for rapid phase of taxol-induced MT polymerization = 2.59•10⁻⁶ M. [1]
Plant tubulin (from Chlamydomonas flagellar tubulin): binding constant (K) = 2.08•10⁵ M⁻¹. [1]
Leishmania infantum (intracellular amastigote form): IC50 = 16.4 μM (liposomal formulations F1 and F2). [2]
Microtubules; Oryzalin is a dinitroaniline herbicide that inhibits microtubule formation. By binding to tubulin, it prevents the polymerization of microtubules, which are essential for cell division. This disrupts mitosis, leading to the inhibition of root and shoot growth in plants. The compound is used as a pre-emergence or early post-emergence herbicide to control weeds in various crops.
体外研究 (In Vitro)
在血红菊(Haemanthus katherinae)胚乳细胞中,0.01 μM 的草胺素将后期染色体的迁移速率从对照组的平均速率 1.2 μm•min⁻¹ 降低至 0.4-0.8 μm•min⁻¹;0.1 μM 的草胺素则立即(≤30 s)阻断了后期染色体的迁移。0.1 μM 的草胺素在所有有丝分裂阶段均能使微管解聚并阻止新微管的聚合,仅留下少量短微管与细胞核结合。染色体凝缩周期不受影响。用 0.1 μM 草胺素处理(≤2 min)的中期和后期细胞显示,非着丝粒微管完全解聚,而着丝粒微管部分解聚。 0.1 μM 奥利扎林可使末期细胞(成膜体)中的胞质微管解聚,但即使在 1.0 μM 奥利扎林处理 2 小时后,发育中的细胞板区域的许多微管仍未完全解聚。[1]
在非洲爪蟾心脏内皮细胞中,奥利扎林(10 μM,处理长达 10 小时)对染色体运动和凝聚没有影响,细胞内胞质和有丝分裂微管的分布正常。[1]
在体外玫瑰(Rosa sp. cv. Paul's scarlet)微管蛋白聚合实验中,在 24°C 下,用 1、5 或 7 μM 奥利扎林与 10 μM 微管蛋白和 40 μM 紫杉醇共同作用,可延长滞后期,并降低浊度发展的速率和程度。接近 1:1 摩尔比的 oryzalin 与微管蛋白混合可最大程度地抑制浊度。7 μM oryzalin 对牛脑微管蛋白聚合无影响。预先形成的玫瑰微管(10 μM 微管蛋白,40 μM 紫杉醇,1 小时稳态)可被 12.5 μM oryzalin 部分解聚(A400 在 3 分钟内从 0.033 降至 0.023)。电镜观察显示,随着 oryzalin 浓度的增加,微管数量减少、长度缩短,且无定形物质增多;在 7 μM oryzalin 浓度下,仅观察到无定形结构。沉降分析显示,5 μM oryzalin 可抑制玫瑰微管的产量约 50%,而 7 μM oryzalin 可抑制 94%。[1]
oryzalin 与玫瑰微管蛋白的结合:时间和 pH 依赖性。在 pH 5.5-6.0 时结合率最高。在 24°C、pH 7.1 时,结合在 2 小时后达到最大值 (r ≈ 0.08)。表观结合常数 Kapp = 1.19×10⁵ M⁻¹,估计最大结合化学计量比为 0.14。[1]
结合特异性:[¹⁴C]oryzalin 与玫瑰微管蛋白的结合率 (r = 8.00×10⁻²,100%) 比与牛脑微管蛋白的结合率 (r = 0.45×10⁻²,6%) 高约 17 倍。[1]
溶血活性:游离 oryzalin 显示出溶血活性,HC50 = 425 μM(在 100 μM 时溶血率约为 20%,在 500 μM 时溶血率约为 54%)。脂质体配方 F1 和 F2 即使在 500 μM 的浓度下也未显示出明显的溶血活性(溶血率 <6.1%)。[2]
对 THP-1 细胞的细胞毒性:游离的 oryzalin 显示出细胞毒性,CC50 = 39 μM。脂质体配方 F1 和 F2 在浓度高达 50 μM 时未显示出细胞毒性(CC50 > 50 μM)。[2]
对细胞内利什曼原虫无鞭毛体的抗利什曼原虫活性:游离的 oryzalin IC50 = 24.2 μM;脂质体配方 F1 和 F2 IC50 = 16.4 μM。[2]
在体外,Oryzalin 用于研究微管抑制对植物细胞分裂和生长的影响。它用于植物细胞培养,通过破坏纺锤体的形成来诱导多倍体。该化合物通常溶解在有机溶剂中用于体外研究。利用生化和细胞分析方法评估其对微管聚合的影响。
体内研究 (In Vivo)
在血根草(Haemanthus katherinae)胚乳细胞中,用0.01-1.0 μM的草灵灌注对染色体周期没有明显影响。在间期、前期和中期用0.01 μM草灵处理的细胞均能进入下一个有丝分裂阶段。在前期或中期用0.1 μM草灵处理的细胞则呈现出c-有丝分裂的形态。长期观察(≥2小时)显示,许多细胞呈现c-有丝分裂的排列,且细胞核已恢复,但未形成细胞板。后期染色体迁移的抑制作用不易逆转(用0.1 μM草灵处理5分钟后,再洗涤1小时,染色体并未恢复向极移动)。 [1]
对经氟乐灵处理的血红素细胞进行免疫金染色,洗涤后发现微管未发生重聚,这与后期染色体迁移未能恢复相一致。[1]
在体内,氟乐灵作为除草剂施用于土壤或植物,以控制杂草生长。它被萌发杂草的根和茎吸收,抑制细胞分裂和生长。该化合物用于农业和园艺领域,以控制杂草种群。其药效取决于土壤条件和施用时间。
酶活实验
紫杉醇诱导微管聚合的浊度测定:将玫瑰微管蛋白(10 μM)与含有紫杉醇(40 μM)和草酰灵(1、5 或 7 μM)的缓冲液混合。在 24°C 下,通过 A400 处的浊度监测反应。采用 Wilson 等人 (1976) 的方法,根据浊度曲线最陡峭的部分计算聚合快速阶段的抑制常数 (Ki),得到 Ki = 2.59 μM。[1]
微管聚合物产率的沉降分析:将样品在有或无草酰灵存在下聚合 1 小时后离心,并对沉淀物进行蛋白质测定,以定量草酰灵对紫杉醇诱导聚合物质量的影响。 [1]
采用DEAE-纤维素滤膜圆片法测定水稻素结合:将蛋白质(3.5 μM,溶于蔗糖分离缓冲液)与[¹⁴C]水稻素在24°C下孵育。在所需时间点,取100 μl等分试样滴加到DEAE-纤维素滤膜圆片上,缓慢吸附,然后用10 ml冷的分离缓冲液洗涤5次。将滤膜圆片风干,并在闪烁液中计数。使用空白对照(不含微管蛋白)校正非特异性结合。结合与时间和pH值相关。Scatchard分析(Scatchard 1949)得到一条对应于单一结合位点类别的直线,其Kapp = 1.19×10⁵ M⁻¹,估计最大结合化学计量比为0.14。 [1]
差示扫描量热法 (DSC):在铝盘中,以 0.5°C/min 的升温速率,在 18-30°C 的温度范围内测量脂质体配方(脂质浓度约为 50 mM)。空 F1 脂质体(DMPC:DMPG 7:3)在 23.5°C 处显示出典型的转变温度 (Tt)(焓值为 34.9 J/g)。加入 ORZ 后,Tt 消失,焓值降低至 3.49 J/g。[2]
在体外,Oryzalin 用于研究植物细胞中的微管动力学。用不同浓度的化合物处理植物细胞培养物或根尖。使用显微镜和生化分析评估其对细胞分裂、微管组织和植物生长的影响。该化合物通常溶解于 DMSO 或其他有机溶剂中。该方案用于研究二硝基苯胺类除草剂的作用机制。
细胞实验
溶血活性测定:将人红细胞分装于96孔微孔板(100 μl/孔),并加入等体积的游离或脂质体包裹的ORZ(浓度范围为500至6 μM)。37℃孵育1小时后,离心(800 g,10分钟),取上清液在540 nm处测定吸光度(参考波长为620 nm)。溶血活性百分比 = [(A - A₀)/(A_max - A₀)] × 100。HC50采用S型回归分析计算。[2]
THP-1细胞毒性测定:将THP-1细胞(1×10⁶个细胞/mL)与不同浓度(50-0.4 μM)的脂质体包裹和游离ORZ孵育72小时。使用 LIVE/DEAD 细胞活力检测试剂盒,用碘化丙啶和 SYBR-14 对约 4×10⁶ 个细胞进行染色。染色后的细胞通过流式细胞仪进行分析(激发波长 488 nm;SYBR-14 的绿色荧光波长为 545 nm,PI 的红色荧光波长为 645 nm)。每个样本至少分析 10,000 个细胞。CC50 值采用 S 型回归分析计算。[2]
胞内无鞭毛体药物敏感性试验:将 THP-1 细胞在 37°C/5% CO₂ 条件下用 1 μM 维甲酸诱导分化 72 小时。然后将细胞与利什曼原虫前鞭毛体以 4:1 的寄生虫/细胞比例在 37°C/5% CO₂ 条件下孵育过夜。用 Histopaque 1077 离心法(1000 g,20 分钟)去除游离前鞭毛体。将感染细胞(4×10⁵ 个细胞/mL)接种于 24 孔板(200 μl/孔),并与不同稀释度(50-6 μM)的游离 ORZ 或脂质体制剂孵育 48 小时。孵育后,用甲醇固定细胞,吉姆萨染色,并计数 100 个细胞中的感染细胞数。采用 S 型回归分析计算 IC50 值。 [2]
单倍体苹果枝条染色体加倍:在实验3(琼脂溶液包埋)中,将具有完整腋芽分生组织的枝条包埋在含有秋水仙碱(0.025、0.25、1.25 mM)或草胺(5、15、30 μM)的低熔点琼脂中。存活率:草胺组93.8-100%;秋水仙碱组41.7-100%。效率(E = 加倍枝条百分比 × 存活率):草胺组75-100%;秋水仙碱组20.8-77.8%。在30 μM草胺浓度下获得了混倍体枝条(2n = 17/34)。[3]
动物实验
在CD₁小鼠(25-30 g)中进行药代动力学和生物分布研究:经尾侧静脉注射200 μl含有痕量[¹⁴C]oryzalin(4.1×10⁶ cpm/mL)和[³H]-胆固醇(1.8×10⁶ cpm/mL)的ORZ脂质体制剂(F1:DMPC:DMPG 7:3,孔径0.15 μm,ORZ剂量0.15 μmol/只小鼠)。作为对照,同时评估了用Tween 80:柠檬酸缓冲液(40:60,v/v)配制的含有痕量[¹⁴C]oryzalin的游离ORZ溶液(注射0.15 μmol ORZ)。分别于给药后30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时和24小时处死每组5只小鼠。从眼眶静脉窦采集血样至含EDTA的试管中。取出肝脏、脾脏、心脏、肺脏和肾脏,用PBS缓冲液冲洗,干燥,称重并切碎。取0.05 g器官或0.05 mL血液样本,用72%高氯酸和30%过氧化氢在60℃下消化过夜,用乙酸中和,并测定放射性。[2]
血红花(Haemanthus katherinae)胚乳细胞的体内处理:用含草胺的缓冲液(1%乙醇)灌注细胞制备物。测试的草胺浓度为0.01-1.0 μM。处理时间各不相同。用微分干涉相差显微镜观察细胞。为了进行可逆性研究,先用0.1 μM草胺进行短时间(5分钟)处理,然后用不含草胺的缓冲液洗涤长达1小时。 [1]
在体内,奥利扎林作为除草剂施用于土壤或植物。该化合物通常配制成悬浮剂或颗粒剂,并在出苗前或出苗早期施用。施用量取决于目标杂草种类和作物。通过评估杂草控制效果和作物安全性来评价其药效。该化合物已应用于农业研究和实践中。
药代性质 (ADME/PK)
吸收、分布和排泄
在作为轮作作物种植的大豆或小麦中未观察到草甘膦的显著吸收或转运。
静脉注射(0.15 μmol ORZ/只小鼠)后,CD₁小鼠的血液清除情况:游离[¹⁴C]草甘膦在30分钟时迅速下降至ID的17%,24小时后仅残留少量。脂质体草甘膦(Lip-¹⁴C-ORZ)在30分钟时下降至ID的58%,24小时后仍保持在ID的20%。给药后4小时观察到游离草甘膦的短暂小幅升高;脂质体草甘膦在6小时时也出现类似的升高。 [2]
CD₁小鼠体内的生物分布:给药2小时后,脂质体包裹的奥氮平(Lip-¹⁴C-ORZ)在肝脏中的浓度(14% ID/g)比游离奥氮平高9倍,在脾脏中的浓度(21% ID/g)高13倍(游离奥氮平在两个器官中的浓度均约为4% ID/g)。24小时后,脂质体包裹的奥氮平在肝脏中的浓度仍约为6% ID/g,在脾脏中的浓度约为5% ID/g;游离奥氮平仅残留少量。[2]
胆囊蓄积:脂质体包裹的奥氮平成分(Lip-¹⁴C-ORZ和³H-Lip)在胆囊中的蓄积呈现两个阶段:给药后30分钟至2小时内浓度升高,然后逐渐下降。游离奥氮平组的胆囊为空。 [2]
奥利扎林分子量为346.36,化学式为C₁₂H₁₈N₄O₆S。它是一种黄橙色结晶固体,无腐蚀性。该化合物微溶于水,可溶于有机溶剂。应将其储存在密封容器中,置于阴凉干燥处,避光保存。本品仅供研究使用,不得用于人体治疗。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在血根草(Haemanthus katherinae)胚乳细胞中,0.1 μM 的草灵可在 2 分钟内完全解聚微管,但不影响染色体凝缩周期。[1]
在非洲爪蟾(Xenopus leavis)心脏内皮细胞中,10 μM 的草灵(作用长达 10 小时)未显示毒性(染色体运动和凝缩正常,微管分布正常)。[1]
溶血活性:游离草灵的半数致死浓度 (HC50) 为 425 μM。脂质体制剂的 HC50 > 500 μM。[2]
对 THP-1 细胞的细胞毒性:游离草灵的半数致死浓度 (CC50) 为 39 μM。脂质体制剂的 CC50 > 50 μM。 [2]
在单倍体苹果幼苗中,经草甘膦(5-30 μM,琼脂包埋法)处理后的存活率为93.8-100%;经秋水仙碱(0.025-1.25 mM)处理后的存活率为41.7-100%。30 μM草甘膦处理可产生混倍体幼苗(2n = 17/34)。[3]
草甘膦是一种除草剂,可能对植物和动物有毒。在5%的阿拉伯胶悬浮液中,草甘膦可导致兔眼轻微角膜损伤,但在第7天恢复(III类毒性)。该化合物仅供研究使用,不得用于人类治疗。操作时应采取适当的安全预防措施,包括使用个人防护装备。该化合物应储存在密封容器中,置于阴凉干燥处,远离不相容的物质。
参考文献

[1]. Oryzalin, a dinitroaniline herbicide, binds to plant tubulin and inhibits microtubule polymerization in vitro. Planta. 1987 Oct;172(2):252-64.

[2]. Formulation of oryzalin (ORZ) liposomes: in vitro studies and in vivo fate. Eur J Pharm Biopharm. 2012 Oct;82(2):281-90.

[3]. Oryzalin as an efficient agent for chromosome doubling of haploid apple shoots in vitro. Plant Breeding, 1994, 113(4): 343-346.

其他信息
奥利扎林(Oryzalin)是一种二硝基苯胺类除草剂(3,5-二硝基-N⁴,N⁴-二丙基磺胺),分子量为346.36。它是一种黄橙色结晶固体,在pH 7/25℃时溶于水,溶解度为2.5 mg/L,pKa值为8.6。其除草作用是通过与植物微管蛋白结合,使微管解聚,从而抑制新微管的聚合而发挥抗有丝分裂活性。[1][2]
奥利扎林对植物和动物微管蛋白的药理作用存在差异。它能以中等亲和力(Kapp = 1.19×10⁵ M⁻¹)选择性地与植物微管蛋白结合,并在低微摩尔浓度下抑制植物微管聚合,但对动物微管蛋白聚合或微管依赖性过程没有影响。微管蛋白上的二硝基苯胺结合位点在植物界的进化过程中一直保守存在。[1]
为治疗利什曼病,研究人员采用脱水-复水法开发了脂质体奥氮平制剂(DMPC:DMPG 7:3 或 9:1)。这些制剂在不使用有毒溶剂的情况下,使水悬浮液中的奥氮平浓度至少提高了150倍,降低了溶血活性和细胞毒性,并显著提高了药物向肝脏和脾脏的递送(积累量比游离奥氮平高9-13倍)。[2]
在植物育种方面,与秋水仙碱相比,奥氮平(5-15 μM)在体外诱导单倍体苹果芽染色体加倍方面更有效,具有更高的存活率(93.8-100% vs. 41.7-100%)和更高的效率(75-100 vs. 20.8-77.8)。奥利扎林与植物微管蛋白具有很强的结合亲和力,在低微摩尔浓度下即可使微管解聚,阻滞细胞处于中期。[3]
根据美国环境保护署 (EPA) 的说法,奥利扎林可能具有致癌性。奥利扎林是一种黄橙色结晶粉末,无腐蚀性,用作除草剂。奥利扎林是一种磺酰胺类化合物,其结构为苯磺酰胺,在3位和5位被硝基取代,在4位被二丙氨基取代。它是一种除草剂、农用化学品和抗有丝分裂剂。它是一种磺酰胺类化合物、C-硝基化合物、芳香胺和叔胺化合物。奥利扎林是一种苗前表面施用的除草剂。其作用机制是破坏(解聚)微管,从而阻断植物细胞的各向异性生长。它通过选择性地影响生理生长过程,用于控制果树、坚果树、葡萄园、草坪和观赏植物周围的一年生禾本科杂草和阔叶杂草。它还可以作为秋水仙碱的替代品,用于诱导种子倍性。它水溶性低,不易挥发,并且根据其化学性质,预计不会渗入地下水。然而,地下水监测计划已将其识别为污染物。它通常不会在土壤或水生系统中残留。它对哺乳动物的毒性较低,但是一种潜在的致癌物。它对鸟类、大多数水生生物、蜜蜂和蚯蚓具有中等毒性。
作用机制
它影响与种子萌发相关的生理生长过程。
奥利扎林是一种二硝基苯胺类除草剂,用于控制杂草。它也称为4-(二丙基氨基)-3,5-二硝基苯磺酰胺。它能抑制细胞分裂过程中微管的形成。它是一种黄橙色结晶固体,分子量为346.36。它用于农业研究,以研究除草剂的作用机制和杂草控制。仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C12H18N4O6S
分子量
346.35952
精确质量
346.095
CAS号
19044-88-3
PubChem CID
29393
外观&性状
Orange to red solid powder
密度
1.2
沸点
514ºC at 760mmHg
熔点
141°C
闪点
264.6ºC
蒸汽压
1.13E-10mmHg at 25°C
折射率
1.588
LogP
4.604
tPSA
163.42
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
23
分子复杂度/Complexity
493
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CCCN(CCC)C1=C(C=C(C=C1[N+](=O)[O-])S(=O)(=O)N)[N+](=O)[O-]
InChi Key
UNAHYJYOSSSJHH-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C12H18N4O6S/c1-3-5-14(6-4-2)12-10(15(17)18)7-9(23(13,21)22)8-11(12)16(19)20/h7-8H,3-6H2,1-2H3,(H2,13,21,22)
化学名
4-(dipropylamino)-3,5-dinitrobenzenesulfonamide
别名
ORYZALIN; 19044-88-3; Surflan; Dirimal; 4-(Dipropylamino)-3,5-dinitrobenzenesulfonamide;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~250 mg/mL (~721.79 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.8872 mL 14.4358 mL 28.8717 mL
5 mM 0.5774 mL 2.8872 mL 5.7743 mL
10 mM 0.2887 mL 1.4436 mL 2.8872 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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