| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Marker dye
DNA minor groove, specifically AT-rich regions of double-stranded DNA. para-iodoHoechst 33258 is a marking dye from the Hoechst series that binds nucleic acids by binding to the minor groove in the DNA double strand. Hoechst dyes preferentially bind to AT-rich DNA sequences. The iodine substitution sensitizes DNA and cells to UVA, making this compound a photosensitizer. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Hoechst 工作液的制备：
1.1 储备液的制备 用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储备液。 注意： 建议将 Hoechst 储备液分装后避光保存于 -4 ℃ 或 -20 ℃。 1.2 工作液的制备 用预热的无血清细胞培养基或 PBS 将储备液稀释至终浓度为 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。 注意： 请根据您的具体需求调整 Hoechst 工作液的浓度，并使用新鲜配制的溶液。 2. 细胞染色（悬浮细胞） 2.1 离心收集细胞，用 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度为 1 × 10~6/mL 2.2 加入 1 mL Hoechst 工作液，室温孵育 3-10 分钟。 2.3 400 g 离心 3-4 分钟，弃上清液。 2.4 用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 将细胞重悬于 1 mL 无血清培养基或 PBS 中，使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 3.细胞染色（贴壁细胞） 3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 3.2 将盖玻片从培养基中取出，吸除多余的培养基。 3.3 加入100 μL染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育3-10分钟。 3.4 移除染料工作液，用培养基洗涤2-3次，每次5分钟，然后用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 在体外，对碘代Hoechst 33258可用作荧光DNA染料，用于DNA定量和细胞成像。该染料与DNA结合后会发出蓝色荧光，可通过紫外光激发进行可视化。它可用于流式细胞术、荧光显微镜以及其他需要DNA染色的应用。对碘代Hoechst 33258的对位异构体已被研究其DNA断裂和光敏化特性，结果表明，该对位异构体诱导的γH2AX焦点数量在照射后48小时内恢复至背景水平。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
对碘代Hoechst 33258的体内研究有限，因为该化合物主要用作体外研究工具。该化合物不适用于动物或人类的治疗。其体内效应可能与其DNA结合和光敏特性有关。需要进一步的体内研究来全面表征其生物学效应。
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| 酶活实验 |
利用DNA酶I和微球菌核酸酶足迹法分析了小沟结合配体DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）和Hoechst 33258（双苯并咪唑）的DNA结合位点。两种药物似乎都能结合到至少含有四个AT碱基对的富含AT的区域。Hoechst 33258与含有交替碱基对TpA的核苷酸序列的结合能力相对较弱。然而，与DAPI相比，它更容易适应结合位点末端的鸟苷残基。我们在相似的条件下，将DAPI和Hoechst 33258的DNA结合位点与相关的小沟结合配体贝尼尔、奈曲普辛和地斯他霉素A的DNA结合位点进行了比较，并讨论了在分析药物-DNA相互作用时使用不同足迹探针的重要性[2]。
对碘代Hoechst 33258的体外DNA结合实验用于测定其与DNA的亲和力。该实验使用纯化的双链DNA（例如，小牛胸腺DNA或合成的富含AT的寡核苷酸），并通过测量染料结合后的荧光增强来评估其亲和力。将不同浓度的染料与DNA在缓冲液中孵育，并在适当的激发/发射波长（Ex/Em ~350/461 nm）下测量荧光强度。结合亲和力（Kd）由滴定曲线计算得出。使用未标记的Hoechst 33258进行的竞争实验可用于评估相对结合亲和力。 |
| 细胞实验 |
体外细胞检测方法利用培养细胞进行对碘代Hoechst 33258的DNA染色和定量。细胞经固定和透化处理后，与浓度为0.1-10 μg/mL的染料孵育15-30分钟。洗涤后，通过流式细胞术或荧光显微镜测定DNA含量。在光敏化研究中，细胞用染料处理后暴露于UVA照射。DNA损伤通过γH2AX染色或彗星试验进行评估。
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| 动物实验 |
由于对碘代Hoechst 33258通常用作研究探针而非治疗药物，因此一般不进行体内动物实验。如果进行此类实验，典型的实验方案包括通过静脉或腹腔注射给药。之后会采集组织样本进行荧光成像或DNA含量分析。然而，此类研究在文献中报道甚少。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
对碘代Hoechst 33258的药代动力学性质具有小分子荧光染料的典型特征。该化合物分子量为534.39，分子式为C25H23IN6，可溶于DMSO。通常以粉末形式储存于-20℃，保质期为2年。该化合物的密度为1.587±0.06 g/cm3。作为一种研究用染料，通常不进行药代动力学研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
对碘代Hoechst 33258仅供研究用途，不可用于人体治疗。处理化学品时应遵守标准安全预防措施。该化合物未获准用于临床。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
本文描述了荧光显微镜在检测脱氧核糖核酸（DNA）合成方面的多种应用。这些应用包括：(a) 分析有丝分裂过程中姐妹染色单体的交换和分离；(b) 定位染色体上含有胸腺嘧啶残基且这些残基在多核苷酸链中不对称分布的DNA区域；以及 (c) 检测中期染色体中的晚期复制区域。在固定细胞学标本和未固定培养细胞中，均证实了掺入间期细胞核的5-溴脱氧尿苷的生物合成能够抑制Hoechst 33258的荧光。本文所述的许多细胞学观察结果为未来的生物化学研究奠定了基础。
对碘代Hoechst 33258是一种研究级碘化DNA结合联苯并咪唑类荧光DNA染料。它是Hoechst 33258的单碘代衍生物，分子式为C25H23IN6，分子量为534.39。该化合物是一种用于DNA定量分析的细胞染料，可增强DNA和细胞对UVA的敏感性。它可用于流式细胞术、荧光显微镜和光敏化研究。尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C25H23IN6
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|---|---|
| 分子量 |
534.394796609879
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| 精确质量 |
534.103
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| CAS号 |
158013-43-5
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| PubChem CID |
10437137
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
5.132
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| tPSA |
63.84
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
634
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
WSBVZEKIZWIJQO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H23IN6/c1-31-10-12-32(13-11-31)19-7-9-21-23(15-19)30-25(28-21)17-4-8-20-22(14-17)29-24(27-20)16-2-5-18(26)6-3-16/h2-9,14-15H,10-13H2,1H3,(H,27,29)(H,28,30)
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| 化学名 |
2-(4-iodophenyl)-6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazole
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| 别名 |
para-iodoHoechst 33258; 158013-43-5; P-Iodo Hoechst; Paraiodohoechst; 2-(4-iodophenyl)-6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazole; para-iodoHoechst33258; SCHEMBL340370; SCHEMBL26252732;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~20.5 mg/mL (~38.36 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8713 mL | 9.3565 mL | 18.7129 mL | |
| 5 mM | 0.3743 mL | 1.8713 mL | 3.7426 mL | |
| 10 mM | 0.1871 mL | 0.9356 mL | 1.8713 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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