α7 nAChR (Ki = 8.8 nM)[1]
α7 nicotinic acetylcholine receptor (α7 nAChR). The compound shows high selectivity for α7-nAChR over α3β4, α1β1γδ, α4β2, and 5-HT3 receptors. Ki = 8.8 nM.

N-[(3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]呋喃并[2,3-c]吡啶-5-甲酰胺（14，PHA-543613）是一种新型的α7神经元尼古丁乙酰胆碱受体（α7 nAChR）激动剂，已被确定为治疗精神分裂症认知障碍的潜在药物。化合物14是一种高效且选择性的α7 nAChR激动剂，具有优异的体外活性。 [1]化合物 2、10、11、13 和 14 (PHA-543613) 在 2 μM 和 20 μM 浓度下，通过膜片钳 hERG K+ 通道测定法进行了评估。²⁸苯并噻吩 10 对 hERG 通道的抑制作用与化合物 2 相似。基于化合物 2 的有效药物浓度，这些抑制水平被认为是较高的。^12,19苯并呋喃 11 和 13 以及呋喃并吡啶 14 在 20 μM 浓度下均表现出对 hERG 通道抑制作用的降低，这可能是由于硫原子被亲脂性较低的氧原子取代所致。²⁹为了进一步评估与 hERG 钾通道的相互作用，测定了化合物 2 和 14 的浓度-反应曲线。与筛选数据一致，化合物 14 对 hERG 通道介导电流的抑制作用较弱。尽管化合物 14 在最高测试浓度 20 μM 下阻断效果不足以确定 IC50 值，但将该浓度下产生的阻断效果（化合物 14 为 29%）外推至化合物 2 的拟合曲线表明，其阻断 hERG 通道的效力至少降低了 10 倍[1]。PHA-543613 是一种强效且选择性的 α7 nAChR 激动剂，Ki 值为 8.8 nM。它对 α7-nAChR 的选择性远高于其他尼古丁受体亚型和 5-HT3 受体。该化合物用于研究阿尔茨海默病和精神分裂症的认知缺陷。它能激活 α7 nAChR，α7 nAChR 是一种配体门控离子通道，在大脑中高表达，并参与认知过程。

东莨菪碱引起的短期记忆障碍可被PHA-543613（0.3 mg/kg）有效纠正[2]。PHA-543613（腹腔注射一次；4和12 mg/kg）可减轻脑水肿和行为异常[3]。化合物14（PHA-543613）的功能活性已通过大鼠海马神经元的天然α7 nAChR得到证实（图2）。当快速应用于全细胞膜片钳记录的神经元时，化合物14可诱发浓度依赖性的脱敏内向电流，且该电流可被选择性α7 nAChR拮抗剂甲基乌头碱（MLA，10 nM）完全抑制。当施加浓度为 0.3、3 和 30 μM 的化合物 14 时，引起的反应幅度分别为施加浓度为 100 μM (−)-尼古丁到同一细胞时引起的反应幅度的 34 ± 1%、103 ± 7% 和 220 ± 22%。这些结果表明，化合物 14 在天然 α7 nAChR 上的活性略高于化合物 2，12 这与本文报道的结合试验和使用 α7 5HT3 嵌合体的 FLIPR 试验中效力增强的结果一致。[3]

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化合物 14 (PHA-543613) 也在已验证的啮齿动物感觉门控受损模型中进行了测试。11,12 在麻醉大鼠中，静脉注射 d-安非他明 (1 mg/kg) 会显著破坏海马 CA3 区的听觉门控（对应于人类 P50 听觉门控），这是由于条件反射反应同时降低，而测试反应相应增加所致。37 随后静脉注射 α7 nAChR 激动剂 14 (0.3 或 1 mg/kg) 可显著逆转安非他明引起的门控缺陷（图 3）。相比之下，在对照组大鼠中应用载体并未使安非他明诱导的听觉门控缺陷恢复正常（门控率从 47 ± 5.5% 降至 41 ± 6.8%，n = 9）。在另一项实验中，较高剂量（静脉注射，10 mg/kg）的化合物 14 也显著改善了安非他明给药后的听觉门控（门控率从 51 ± 3.9% 升至 68 ± 3.9%，n = 16，p < 0.005）。静脉注射 1 mg/kg 和 10 mg/kg 激动剂后，脑内药物浓度分别为 0.56 ± 0.039 nM 和 14.9 ± 1.4 μM，表明化合物 14 在较宽的脑暴露范围内对听觉门控具有疗效。临床前研究表明，α7 nAChR激动剂能有效恢复药理学、遗传学或环境因素引起的门控缺陷。[3]PHA-543613在多种动物模型中均显示出体内活性。它能有效纠正东莨菪碱（0.3 mg/kg）引起的短期记忆障碍。在小鼠脑出血模型中，PHA-543613（4和12 mg/kg，腹腔注射）可减轻脑水肿和行为异常。它能增加p-Akt水平，降低p-GSK-3和CC3的表达，并减少同侧半球的神经元死亡。该化合物具有口服生物活性，且能穿透血脑屏障。

体外实验详情[1]
活性代谢物测定 (RMA)。该测定按先前所述方法进行⁴⁶。将测试化合物配制成甲醇储备液。孵育介质中甲醇的最终浓度为0.2% (v/v)。在37 °C摇床水浴中孵育60分钟。孵育体积为1 mL，包含以下成分：0.1 M磷酸钾缓冲液（pH 7.4）、人肝微粒体（P450浓度= 0.5 μM）、NADPH (1.2 mM)和底物 (200 μM)。反应混合物在加入NADPH前于37 °C预热2分钟。在NADPH反应开始3分钟后加入GSH-EE (2 mM)。不含 NADPH 或 GSH-EE 的孵育液作为阴性对照，反应通过加入冰冷的乙腈 (1 mL) 终止。溶液经离心 (3000 g，15 分钟) 后，上清液在稳定的氮气流下干燥。残余物用流动相复溶，并按照先前对其他外源性物质的分析方法，通过液相色谱串联质谱 (LC/MS/MS) 分析代谢物的生成。

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人肝微粒体稳定性测定 (HLM)。[1]
将底物（终浓度 = 1 μM）与人肝微粒体 (HL-mix-101，由 59 位供体制备，P450 终浓度为 0.25 μM) 和 100 mM 磷酸钾缓冲液 (pH 7.4) 孵育。反应通过添加 NADPH 生成系统（0.5 mM NADP+、10.5 mM MgCl2、5.6 mM dl-异柠檬酸和 0.5 U/mL 异柠檬酸脱氢酶）启动。用于扩展到体内条件的方程式已在之前描述过。

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大鼠肝微粒体稳定性测定 (RLM)。[1]
测定方案与 HLM 测定相同，只是在孵育过程中使用大鼠肝微粒体（RL-mix 142，由雌性 Sprque-Dawley 大鼠制备）。用于扩展到体内条件的方程式已在之前描述过。

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α7 5-HT3 嵌合体、5-HT3、神经肌肉接头 (α1β1γδ) 和神经节 (α3β4) nAChR 的功能性高通量筛选。 [1] α7 5-HT3嵌合体和5-HT3受体在SH-EP1细胞中稳定表达。TE671和SH-SY5Y细胞分别用作神经肌肉接头和神经节nAChR的内源性来源。⁴⁸ 所有功能性高通量筛选均采用荧光成像板读数仪（FLIPR，Molecular Devices）进行钙离子流测定。转染的SH-EP1细胞培养于添加了10%胎牛血清、L-谷氨酰胺、100单位/mL青霉素/链霉素、250 ng/mL两性霉素B、400 μg/mL潮霉素B和800 μg/mL遗传霉素的非必需氨基酸最小必需培养基（MEM）中。TE671和SH-SY5Y细胞的培养方法参照已发表的文献。所有细胞均在37℃、5-6% CO₂的培养箱中培养。细胞经胰蛋白酶消化后，接种于96孔或384孔黑色/透明检测板中。将细胞加入到由2 mM Calcium Green-1 AM（Molecular Probes公司）和20% Pluronic F-127（Molecular Probes公司）按1:1比例混合的无水二甲基亚砜溶液中。将该混合溶液直接加入到每个孔的培养基中，使最终Calcium Green-1 AM的浓度达到2 μM。细胞在37℃下与染料孵育1小时后，用洗板机洗涤两次。每个循环程序均设定为用Mark改良的Earle平衡盐溶液（MMEBSS）洗涤每个孔四次，该溶液成分为（单位：mM）：CaCl₂ (4)、MgSO₄ (0.8)、NaCl (20)、KCl (5.3)、D-葡萄糖 (5.6)、Tris-HEPES (20)、N-甲基-D-葡糖胺 (120)，pH 7.4。最后一个循环结束后，将细胞在MMEBSS中于37 °C孵育至少10分钟。FLIPR设置为使用500-600 mW的功率在488 nm处激发Calcium Green-1 AM，并读取525 nm以上的荧光发射。每个孔的曝光时间为0.5或0.7秒。在记录30秒基线后，将测试化合物从3倍或4倍浓度的储备液中加入到检测板的每个孔中。激动剂反应的评估方法是：加入测试化合物后，信号强度相对于基线的增加值。在一些实验中，拮抗剂活性的评估方法是：在加入测试化合物 2 分钟后，加入尼古丁（nAChRs）或血清素（5-HT3R），并测量已知激动剂反应的损失，与溶剂对照组相比。

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脑匀浆结合试验（[3H]MLA、[3H]金雀花碱、[3H]GR65630）。[1]
雄性 Sprague-Dawley 大鼠（300-350 g）断头处死，迅速解剖出脑组织（全脑，不包括小脑），称重后，用旋转研杵在 50 档（上下研磨 10 次）中，以每克湿重 9 倍体积的冰冷 0.32 M 蔗糖溶液匀浆。将匀浆液在 40 °C 下以 1000 g 离心 10 分钟。收集上清液，并在 40 °C 下以 20000 g 离心 20 分钟。将所得沉淀重悬至蛋白质浓度为 1−8 mg/mL。取 5 mL 匀浆液分装后于 −80 °C 冷冻保存，直至用于实验。实验当天，将分装好的匀浆液在室温下解冻，并用 Kreb 氏 20 mM HEPES 缓冲液（pH 7.0，室温）稀释。该缓冲液含有 4.16 mM NaHCO₃、0.44 mM KH₂PO₄、127 mM NaCl、5.36 mM KCl、1.26 mM CaCl₂ 和 0.98 mM MgCl₂，使每个试管中加入 25−150 mg 蛋白质。采用Bradford法测定蛋白质浓度，以牛血清白蛋白为标准。对于α7，在平行孵育的组织中测定非特异性结合，其中MLA在放射性配体加入前加入；在竞争性实验中，将化合物以递增浓度加入试管，然后加入约3 nM [3H]MLA (25 Ci/mmol)。对于α4，在平行孵育的组织中测定非特异性结合，其中(−)-尼古丁在放射性配体加入前加入；在竞争性实验中，将化合物以递增浓度加入试管，然后加入约1.0 nM [3H]金雀花碱。对于 5-HT3，非特异性结合的测定方法如下：将组织平行孵育，加入 1 μM ICS-205930（在加入放射性配体之前加入）；在竞争性结合实验中，将化合物以递增浓度加入试管，然后再加入约 0.45 nM [3H]GR65630。所有结合实验中，将 0.4 mL 匀浆加入含有缓冲液、待测化合物和放射性配体的试管中，并在 25 °C 下孵育 1 小时，最终体积为 0.5 mL。孵育结束后，使用安装在 48 孔 Brandel 细胞收集器上的 Whatman GF/B 玻璃滤纸进行快速真空过滤终止反应。滤纸预先浸泡在 50 mM Tris-HCl（pH 7.0）和 0.05% 聚乙烯亚胺溶液中。滤膜用5 mL冰冷的0.9%生理盐水洗涤两次，然后用液体闪烁计数法测定放射性。抑制常数（Ki）通过将放射性配体结合的浓度依赖性抑制数据拟合到Cheng-Prusoff方程计算得出。

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α7 nAChR结合亲和力通常使用放射性配体结合试验来评估，该试验使用表达重组α7 nAChR的细胞膜制备物。放射性标记的选择性α7激动剂，例如[³H]-甲基乌头碱或[¹²⁵I]-α-银环蛇毒素，用作示踪剂。进行不同浓度PHA-543613的竞争性结合实验以确定Ki值。在过量未标记配体存在下测定非特异性结合。

膜片钳电生理学。[1]
培养神经元取自Sprague-Dawley大鼠（出生后第3天），方法参照Brewer（1997）所述。大鼠断头处死后，取出脑组织并置于冰冷的Hibernate-A培养基中。轻轻取出海马区，切成小块，置于含1 mg/mL木瓜蛋白酶的Hibernate-A培养基中，35℃消化60分钟。消化后，用Hibernate-A培养基多次洗涤组织，然后转移至装有6 mL含2% B-27补充剂的Hibernate-A培养基的50 mL锥形管中。将神经元通过轻柔研磨法分离，并以300-700个细胞/mm²的密度接种于聚赖氨酸/层粘连蛋白包被的盖玻片上，然后转移至含有预热培养基的24孔组织培养板中。该培养基由Neurobasal-A培养基、2% B-27添加剂、0.5 mM L-谷氨酰胺、100 U/mL青霉素、100 mg/mL链霉素和0.25 mg/mL两性霉素B组成。细胞在37℃、6% CO₂的加湿培养箱中培养1-2周。培养基在24小时后更换，之后大约每3天更换一次。使用 Flaming/Brown 微量移液管拉制仪（P97，Sutter Instrument，Novato，CA）从硼硅酸盐毛细管玻璃上拉制膜片钳电极，并填充内液，内液成分为：CsCH3SO3 (126 mM)、CsCl (10 mM)、NaCl (4 mM)、MgCl2 (1 mM)、CaCl2 (0.5 mM)、EGTA (5 mM)、HEPES (10 mM)、ATP-Mg (3 mM)、GTP-Na (0.3 mM)、磷酸肌酸 (4 mM)，pH 7.2。填充内液后，膜片钳电极的电阻范围为 3 至 6 MΩ。所有实验均在室温下进行。培养细胞持续灌注含有以下成分的外部浴液：NaCl (140 mM)、KCl (5 mM)、CaCl₂ (2 mM)、MgCl₂ (1 mM)、HEPES (10 mM)、葡萄糖 (10 mM)、比库啉 (10 μM)、CNQX (5 μM)、D-AP-5 (5 μM) 和河豚毒素 (0.5 μM)，pH 7.4。化合物溶于水或DMSO，并稀释到外部浴液中，使DMSO的最终浓度为0.1%，通过多管快速灌注系统进行灌注。使用Axopatch 200B放大器记录全细胞电流。模拟信号经1/5采样频率滤波后，数字化、存储，并使用pCLAMP软件进行测量。所有数据均以平均值±标准误(SEM)表示。

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hERG 检测。 [1]
简而言之，将稳定表达hERG通道的HEK293细胞电压钳制在-80 mV，然后每隔10秒进行一次阶跃去极化，先去极化至+20 mV持续2秒，再去极化至-40 mV持续2秒。电流幅度通过测量膜电位阶跃至-40 mV时诱发的峰值外向电流来测定。PNU-28987的浓度-反应数据是根据已发表的方法⁵⁰，使用稳定表达hERG通道的CHO-K1细胞生成的。在这种情况下，将细胞电压钳制在-80 mV，并每秒施加一次心肌动作电位（AP）电压钳制方案来诱发电流，并在AP波形的复极化阶段测量峰值外向电流。在所有情况下，均在记录到稳定的基线后施加测试化合物，并监测诱发电流直至达到新的稳态幅度。电流抑制率以百分比表示，公式为：Itest = Icontrol / (Itest - Icontrol)，其中 Itest 为加入测试溶液后测得的电流，Icontrol 为加入测试溶液前测得的电流。每个细胞均作为自身的对照。连续曲线根据公式 [化合物] = [化合物] / (n) 确定，其中 [化合物] 为测试化合物的浓度，Hill 斜率 n 被限制为 1。所有数据均以平均值 ± 标准差表示。

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PHA-543613 的体外细胞活性测定采用钙离子流测定或电生理膜片钳记录来评估其在 α7 nAChR 上的功能活性。表达重组 α7 nAChR 的细胞加载钙敏感荧光染料，并测量化合物诱导钙离子内流的能力。或者，使用全细胞膜片钳记录来测量化合物应用后 α7 nAChR 介导的电流。

动物/疾病模型：雄性CD-1小鼠（脑出血）脑出血诱导或假手术[3]
剂量：4和12 mg/kg
给药途径：腹腔注射；4和12 mg/kg；术后1小时结果：同侧半球p-Akt升高，p-GSK-3和CC3表达降低，血肿周围区域神经元细胞死亡减少。脑出血后72小时，行为缺陷和脑水肿减轻。

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体内实验详情。听觉门控实验。 [1]
实验对象为雄性Sprague-Dawley大鼠（体重250-300 g），采用水合氯醛麻醉（400 mg/kg，腹腔注射）。分别对股动脉和股静脉进行插管，用于监测动脉血压和给药或追加麻醉剂。使用置于CA3区（坐标：前囟后方3.0-3.5 mm，侧方2.6-3.0 mm，腹侧3.8-4.0 mm；Paxinos和Watson，1986）的金属单极宏电极记录单侧海马场电位（EEG）。⁵¹ 场电位经放大、滤波（0.1-100 Hz）、显示和记录后，用于在线和离线分析（Spike3软件）。定量EEG分析采用快速傅里叶变换（Spike3软件）。听觉刺激由一对持续10毫秒、频率为5千赫兹的纯音脉冲组成，第一个“条件刺激”和第二个“测试刺激”之间有0.5秒的延迟。听觉诱发电位通过对50对刺激的反应取平均值计算得出，每对刺激的间隔为10秒。[1]

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物体识别任务。[1]
雄性Sprague-Dawley大鼠，体重在235至280克之间（测试时），成对饲养，在12小时光照/12小时黑暗循环（黑暗期为7:00至19:00）下自由摄取食物和水。大鼠饲养在底部为实心、铺有木屑垫料的笼子中。本研究中的所有程序均已获得批准，并严格遵守《动物福利法》（CFR 第 1-3 部分）和《实验动物饲养和使用指南》（ILAR，1996）以及所有公司内部政策和准则。所有测试和物体暴露均在一个 14 英寸 × 22 英寸 × 14 英寸的半透明 MaxCart 食物箱中进行。每次试验前，在地面上铺上一张干净的硬纸板状 Techboard 板。测试区域采用间接均匀照明，光照强度为 10-12 勒克斯。一台固定在距离测试区域地面约 4 英尺的摄像机连接到一台位于距离遮光区域数英尺外的监视器和录像机。本文报告的所有药物测试均使用两种类型的物体：一个500毫升的透明锥形瓶和一个500毫升的琥珀色瓶子（3英寸×2.25英寸×8英寸），瓶盖为黑色（瓶内装有水）。每次试验后，均使用70%的酒精溶液擦拭清洁这些物体。每种物体均使用两组或更多组不同的样本，以便在两次测试之间风干几分钟。[1]
采用与Moser类似的3天程序，具体如下。第一天进行2分钟的适应性训练，Techboard地板吸水面朝上，不放置任何物体。第二天进行5分钟的探索训练，Techboard地板吸水面朝下，放置两个相同的物体。物体放置在角落两侧墙壁2英寸处。每只动物最多有5分钟的时间，可以累计接近其中一个或两个相同物体的最大时间为20秒。因此，通过在大鼠接近目标物体20秒后终止实验，来确保所有大鼠对目标物体（熟悉物体）的探索性暴露时间一致。探索时间超过10秒的大鼠将被淘汰。通常，超过90%的大鼠达到了这一截止标准。第3天的测试持续3分钟，Techboard地板吸水面朝上，并放置两个不同的物体。分别记录大鼠接近每个物体的时间，并将其作为主要反应指标。在本研究中，“接近”定义为大鼠的鼻子距离物体2厘米以内。[1]
在每次实验前30分钟，皮下注射载体和化合物14。所有实验中，每个处理组在实验开始时均包含15只大鼠。每次实验时，将动物放置在实验场地中，使其鼻子背对物体（如有物体），并位于场地长边的中心位置。将大鼠放入实验场地后，实验人员立即坐在显示器前，在不干扰大鼠的情况下记录其接近行为。测试期间大鼠接近每个物体的时间分别记录，并作为主要反应指标。采用配对双尾t检验分析这些数据，以确定新奇物体和熟悉物体接近时间之间的显著差异，统计学显著性定义为p值小于0.05。[1]

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PHA-543613的体内动物研究包括东莨菪碱诱导的小鼠记忆障碍模型和雄性CD-1小鼠脑出血（ICH）模型。在ICH模型中，该化合物以4和12 mg/kg的剂量腹腔注射给药。终点指标包括脑水肿评估、行为学评价以及脑组织中Akt、GSK-3和caspase-3（CC3）表达的分子分析。

在人体和鼠体内进行的进一步体外药代动力学 (PK) 评估表明，化合物 2、11、13 和 14 (PHA-543613) 具有中等的清除率和半衰期。在鼠恒速输注模型中进行的体内 PK 评估验证了体外 PK 数据，并预测每种化合物均具有良好的口服生物利用度 (>60%)，其清除率与 RLM 数据一致。化合物的区分源于 CYP2D6 评估，其中发现苯并呋喃 11 可抑制这种关键的 P450 酶。幸运的是，呋喃基吡啶 14 (PHA-543613) 在最高测试剂量 (10 μM) 下无活性。最后，使用小鼠脑摄取试验 (MBUA) 评估了中枢神经系统渗透性。化合物 2、11、13 和 14 (PHA-543613) 均表现出优异的脑渗透性。然而，除呋喃基吡啶 14 外，其他化合物均在中枢神经系统中表现出轻微蓄积。鉴于 α7 受体已知的脱敏特性，脑蓄积并非理想特性。一项独立的药代动力学研究评估了化合物 14 在大鼠体内 5 mg/kg 剂量下的药代动力学，结果与上述输注数据高度一致：口服生物利用度为 65%，清除率为 33.3 mL·min⁻¹·kg⁻¹，分布容积为 1.8 L·kg⁻¹。根据所提供的数据，化合物 14 与化合物 2、11 和 13 存在显著差异，因此需要进一步的体内评估。PHA-543613 具有口服生物活性，并能穿过血脑屏障。其分子量为 271.32 g/mol。该化合物配制用于动物研究中的腹腔注射给药。所提供的文献中并未广泛报道半衰期、Cmax 和口服生物利用度等详细的药代动力学参数，但其口服生物活性和脑渗透性已在体内得到证实。

现有文献中关于PHA-543613的具体毒性数据报道较少。作为一种选择性α7 nAChR激动剂，其安全性需要通过全面的毒理学研究来确定。该化合物属于研究级化学品，不适用于人体。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程。

[1]. Discovery of N-[(3R)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl]furo[2,3-c]pyridine-5-carboxamide, an agonist of the alpha7 nicotinic acetylcholine receptor, for the potential treatment of cognitive deficits in schizophrenia: synthesis and structure--activity relationship. J Med Chem. 2006 Jul 13;49(14):4425-36.

[2]. Potentiation of cognitive enhancer effects of Alzheimer's disease medication memantine by alpha7 nicotinic acetylcholine receptor agonist PHA-543613 in the Morris water maze task. Psychopharmacology (Berl). 2021 Nov;238(11):3273-3281.

[3]. α7 nicotinic acetylcholine receptor agonism confers neuroprotection through GSK-3β inhibition in a mouse model of intracerebral hemorrhage. Stroke. 2012 Mar;43(3):844-50.

Pha-543613 是一种磷酰胺和有机硫代磷化合物。

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PHA-543613 是一种强效、口服生物活性强且能穿透血脑屏障的选择性 α7 nAChR 激动剂，其 Ki 值为 8.8 nM。它对 α7-nAChR 的选择性远高于其他尼古丁受体亚型。目前，该化合物正被研究用于治疗阿尔茨海默病和精神分裂症的认知障碍。在脑出血模型中，它已被证实能有效纠正东莨菪碱引起的记忆障碍，并减轻脑水肿和行为异常。该化合物尚未获得 FDA 批准。

C15H17N3O2

271.32

307.109

C, 66.40; H, 6.32; N, 15.49; O, 11.79

478149-53-0

PHA-543613 dihydrochloride;478148-58-2; 1586767-92-1 (HCl)

9930121

White to off-white solid powder

2.782

58.37

1

4

2

20

381

1

IPKZCLGGYKRDES-ZDUSSCGKSA-N

InChI=1S/C15H17N3O2/c19-15(12-7-11-3-6-20-14(11)8-16-12)17-13-9-18-4-1-10(13)2-5-18/h3,6-8,10,13H,1-2,4-5,9H2,(H,17,19)/t13-/m0/s1

N-[(3R)-1-azabicyclo[2.2.2]octan-3-yl]furo[2,3-c]pyridine-5-carboxamide

PHA543613; PHA 543613; PHA-543613; 478149-53-0; PHA-543,613; N-[(3R)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl]furo[2,3-c]pyridine-5-carboxamide; (R)-N-(Quinuclidin-3-yl)furo(2,3-C)pyridine-5-carboxamide; R36R9KVD6Y; CHEMBL214268; DTXSID6047284; PHA-543613

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~250 mg/mL (~921.46 mM)
H2O : ~100 mg/mL (~368.58 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。