| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p2x1 Receptor (IC50 = 68 nM); P2X2 Receptor (IC50 = 214 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
Na+/Ca2+ 交换器反向模式 (NCXREV) 被 PPADS 四钠 a（1-30 μM；10-50 分钟）以浓度和时间依赖性方式抑制 [2]。四钠 PPADS 对重组和其他天然 P2XR 有效。人类 P2XR 对 PPADS 四钠的敏感性因亚型而异；最敏感的亚型是 hP2X1、-2、-3、-5 和 -7R，而 hP2X4R 的 IC50 分别约为 1-3 和 ~30 μM [3]。
在培养的系膜细胞中，PPADS以剂量依赖的方式抑制核苷酸，但FCS不刺激增殖。在抗Thy1模型中，PPADS在早期（第3天）特异性和剂量依赖性地减少了肾小球系膜细胞增殖以及系膜的表型激活和轻微的基质扩张，但在晚期（第8天）没有减少。虽然在系膜溶解程度、炎性细胞流入、蛋白尿或血压方面没有获得一致的效果，但PPADS治疗增加了抗Thy1大鼠的血清肌酐和尿素。在培养的MC和分离的肾小球中检测到P2Y受体表达（P2Y2和P2Y6），并在抗Thy1疾病期间表现出短暂的显著增加。 结论：这些数据强烈表明细胞外核苷酸在介导MC损伤后早期MC增殖中的体内作用[4]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PPADS 四钠 a（15-60 mg/100g 体重 (BW)；腹腔注射；每 12 小时一次，持续 8 天）可抑制系膜增殖性肾炎体内系膜细胞 (MC) 增殖，而不影响非 MC 体内增殖 [4 ]。
Na（+）/Ca（2+）交换器（NCX）的主要功能是从细胞质中取出1个Ca（2+）并引入3个Na（2+）。细胞质Na（+）浓度的增加诱导了NCX反向模式（NCX（REV）），有利于Ca（2+）内流。NCX（REV）可以被以下物质抑制：KB-R7943，一种阻断电压依赖性和储存操作的Ca（2+）通道的非特异性化合物；SEA0400似乎对NCX（REV）具有选择性，但很难获得，SN-6仅在心肌细胞中显示出疗效。我们发现，P2X受体拮抗剂PPADS在豚鼠气管肌细胞中起着NCX（REV）抑制剂的作用。在这些细胞中，我们通过用LiCl替代NaCl和NaHCO（3）来表征NCX（REV），从而使用fura 2-AM增加细胞内Ca（2+）浓度（[Ca（2+）]i）。我们每10分钟分析一次NCX（REV）的5次连续反应，发现它们之间没有差异。为了评估不同NCX（REV）阻断剂的作用，构建了KB-R7943（1、3.2和10μM）和SN-6（3.2、10和30μM）的浓度反应曲线，而PPADS的作用具有时间和浓度依赖性（1、3.2,10和30μM）。PPADS的效力和疗效与KB-R7943相似，而SN-6的效力最低。此外，对D600和硝苯地平敏感的KCl诱导的收缩被KB-R7943阻断，但不被PPADS阻断。KBR-7943（10μM）也显著降低了KCl诱导的心肌细胞[Ca（2+）]i增加。我们的研究结果表明，PPADS可以作为一种可靠的药理学工具来抑制NCX（REV），其优点是它比KB-R7943更具特异性，因为它不影响L型Ca（2+）通道。[1] 外周损伤引起的神经性疼痛与局部炎症以及局部募集的巨噬细胞、雪旺氏细胞和神经胶质细胞中一氧化氮合酶（NOS）和炎性细胞因子的过表达有关。我们在坐骨神经慢性压迫损伤诱导的单神经病小鼠模型中研究了一氧化氮合酶（NOS）和细胞因子在中枢（脊髓和丘脑）和周围神经系统（神经和背根神经节）中的时间过程和定位。ATP被认为是内源性疼痛介质。因此，我们还评估了嘌呤能信号传导在疼痛超敏反应中的作用，使用P2受体拮抗剂磷酸吡哆醛-6-偶氮苯基-2'，4'-二磺酸（PPADS）对疼痛行为、NOS和细胞因子进行了评估。从损伤后第3天开始每天服用PPADS，剂量和时间依赖性地降低了触觉异常性疼痛和热痛觉过敏。PPADS（25mg/kg）完全逆转了伤害性超敏反应，同时降低了参与疼痛信号传导的外周（受伤的坐骨神经和L4-L6同侧背根神经节）和神经系统中枢台阶（L4-L6脊髓和丘脑）中NO/NOS系统和IL-1β的增加。IL-6仅在外周神经系统中过表达，PPADS延长给药可降低其在坐骨神经中的表达。总之，我们假设NO/NOS和IL-1β在这种神经病变模型中具有促痛感作用，嘌呤能拮抗剂通过抑制其过度活动来减轻疼痛超敏反应[3]。 |
| 酶活实验 |
电生理学[2]
在电压钳条件下，使用双电极放大器记录了cRNA注射卵母细胞的核苷酸诱发膜电流。当填充KCl（3M）时，细胞内微电极的电阻为1-2MΩ。用含有（mM）NaCl 110、KCl 2.5、HEPES 5、BaCl2 1.8、pH 7.4-7.5的细胞外溶液持续灌注卵母细胞（5 ml min-1）。所有记录均在室温（18°C）下在-60至-90 mV的保持电位下进行。电生理数据最初以3 kHz的频率进行滤波，以20 Hz的频率在连接到MP100WSW接口的计算机上捕获，并使用商业软件显示。 酶联免疫吸附试验（ELISA）评价脊髓背侧IL-1β含量[3] 通过使用酶联免疫吸附试验对假手术、CCI和PPADS治疗的CCI动物的脊髓进行IL-1β蛋白的定量测定。如上所述，采集L4-L6脊髓切片，快速冷冻并储存在-80°C下。将样品在0.25ml含有蛋白酶抑制剂混合物的冰冷磷酸盐缓冲盐水中均质化并离心。上清液用于测量IL-1β水平。采用Lowry法测定颗粒中的总蛋白含量。 对于IL-1β的测量，使用小鼠IL-1β的CytoSet Elisa试剂盒。捕获抗体和二次生物素化抗体的浓度分别为1.25和0.125μg/ml。重组蛋白产生的标准曲线范围为15-1000pg/ml。 链霉抗生物素蛋白过氧化物酶和四甲基联苯胺用于显色。用2N H2SO4停止显色反应，并在450nm处读取光密度。 |
| 细胞实验 |
卵母细胞制备和P2X受体表达[2]
用Tricaine（0.2%，wt/vol）麻醉非洲爪蟾，并通过断头处死（根据机构规定）。卵巢的解剖和切除，以及去卵爪蟾卵母细胞的制备，在其他地方已有详细描述[King等人，1997]。去卵泡卵母细胞不具有天然的P1或P2受体，否则可能会使激动剂活性的分析复杂化[King等人，1996a，b]。此外，去卵泡卵母细胞在很大程度上缺乏胞外ATP酶活性，从而避免了P2受体拮抗剂抑制胞外酶的复杂问题[Ziganshin等人，1995]。用编码大鼠P2X1或大鼠P2X3受体亚基的封端核糖核酸（cRNA，1mg/ml）在细胞质中注射（40nl）成熟卵母细胞（V期和VI期）。将注射的卵母细胞在18°C下在含有（mM）NaCl 110、KCl 1、NaHCO3 2.4、Tris-HCl 7.5、Ca（NO3）2 0.33、CaCl2 0.41、MgSO4 0.82的沐浴液（pH 7.5）中孵育48小时，并补充50μg/l的硫酸庆大霉素，以使受体完全表达，然后在4°C下储存长达12天。 通过细胞计数和[3H]胸苷掺入试验测量PPADS对核苷酸或胎牛血清（FCS）刺激的培养MC增殖的影响。在诱导抗Thy1模型后，大鼠接受不同剂量（15、30、60mg/kg BW）的P2受体拮抗剂PPADS注射。在抗Thy1疾病期间评估增殖系膜和非系膜细胞、系膜细胞活化、基质积聚、炎性细胞流入、系膜溶解、微动脉瘤形成和肾功能参数。使用RT-PCR和实时PCR、Northern印迹分析、原位杂交和免疫组织化学评估P2Y mRNA和蛋白质表达[4]。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性 SD（SD（Sprague-Dawley））大鼠，体重 160 至 200 克（抗 Thy1 疾病模型）[4]
剂量：15 mg/100g 体重，30 mg/100g 体重，60 mg/100g 体重 给药途径：腹腔注射；每 12 小时（小时）注射一次，持续 8 天（首次 PPADS 注射在疾病诱导后 60 分钟进行，负荷剂量始终是后续注射剂量的两倍）。 实验结果：早期（第 3 天）特异性地、剂量依赖性地抑制系膜细胞增殖，而不影响非系膜细胞增殖。\n \n\n药物治疗[3] \n吡哆醛磷酸-6-偶氮苯基-2′,4′-二磺酸四钠盐（PPADS）溶于生理盐水，使用剂量分别为 6.25、12.5 和 25 mg/kg（0.1 ml/10 g）。剂量选择参考了 Gourine 等人 (2005) 的研究，旨在减轻脂多糖诱导的大鼠发热和细胞因子反应。从术后第三天开始，每天一次腹腔注射PPADS或生理盐水，连续11天，分别给予神经病理性疼痛小鼠和假手术小鼠。在损伤后第3天和第14天评估了急性给予最高剂量PPADS（25mg/kg）的效果：分别在给药后1小时和24小时进行行为学评估。对接受生理盐水治疗10天的小鼠（即坐骨神经结扎术后14天）也采用了相同的实验方案。\n \n\n热痛觉过敏和机械性痛觉异常[3] \n在手术前以及手术后第3天、第7天和第14天（最后一次给予PPADS或生理盐水后24小时）测量小鼠对热刺激和机械刺激的反应。所有小鼠的同侧和对侧后爪均由不知晓处理方式的研究人员进行测量。\n\n采用Hargreaves等人（1988）的方法，并根据我们对小鼠的描述稍作修改，使用足底测试仪测试热痛觉过敏。简而言之，将小鼠置于较小的透明有机玻璃隔间中，使其适应环境。将恒定强度的辐射热源（光束直径0.5厘米，强度20 IR）照射到后爪足底中部。记录从热源激活到小鼠缩爪的时间（秒）。\n\n使用动态足底感觉计评估机械性痛觉过敏。将动物置于底部为金属丝网的测试笼中，将von Frey纤维的刚性尖端（点状刺激）施加于后爪足底中部的皮肤上。细丝施加的力逐渐增大，在20秒内达到5克，初始力低于检测阈值，并逐渐增大直至动物缩回爪子。缩爪阈值以克表示。同侧和对侧爪子的缩爪阈值测量四次，取四次测量的平均值。\n\n \n\n生化评估[3] \n生化评估在接受最高剂量PPADS（25mg/kg）的动物身上进行，所有评估均由对治疗方案不知情的研究人员完成。在术后第3、7和14天，以及最后一次注射生理盐水或PPADS后24小时，记录痛觉阈值和机械阈值。行为学评估结束后，立即用戊巴比妥钠（60mg/kg，腹腔注射，0.1ml/10g）麻醉小鼠。在解剖显微镜下，取出同侧坐骨神经（位于三叉分支近端，约1cm处，CCI组小鼠在三处结扎前）、同侧L4、L5和L6背根神经节（DRG）、L4-L6节段的腰椎背侧脊髓以及同侧和对侧丘脑，立即置于液氮中冷冻，并保存于-80℃冰箱中，直至进行NOS含量和细胞因子表达检测。在一些实验中，取CCI组小鼠坐骨神经（位于三叉分支近端，CCI组小鼠在三处结扎前）和L4-L6节段的腰椎背侧脊髓的一小部分，用于制备核提取物，并保存于-80℃冰箱中，直至进行转录因子NF-κB的检测。在其他实验中，将CCI动物结扎线与三叉神经之间的一小段坐骨神经组织保存在−80°C，直至进行髓鞘蛋白测定。鉴于NO测定的技术难度，需要精确控制采样时间并在采样后立即进行测定（因为NO和亚硝酸盐不稳定），我们评估了NOS（诱导型和神经元型）的水平来代表NO的变化，正如Salake等人（2000）和Wang等人（2004）先前报道的那样。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
5'-磷酸吡哆醛-6-偶氮苯-2,4-二磺酸四钠是一种有机钠盐，是5'-磷酸吡哆醛-6-偶氮苯-2,4-二磺酸的四钠盐。它是一种嘌呤能受体P2X拮抗剂。它既是有机钠盐，也是有机磺酸盐。它含有5'-磷酸吡哆醛-6-偶氮苯-2,4-二磺酸基团。5'-磷酸吡哆醛-6-偶氮苯-2,4-二磺酸是一种芳烃磺酸，是吡哆醛5'-磷酸酯在6位上带有一个额外的2,4-二磺基苯基偶氮取代基。它是一种嘌呤能受体P2X拮抗剂。它是一种芳烃磺酸，属于偶氮苯类、甲基吡啶类、单羟基吡啶类、吡啶甲醛类和有机磷酸酯类。其功能与吡哆醛5'-磷酸酯相关。它是5'-磷酸萘并吡哆醛-6-偶氮苯-2,4-二磺酸酯的共轭酸。
血小板聚集抑制剂：拮抗或抑制任何导致血小板聚集的机制的药物或制剂，无论是在激活和形态改变阶段，还是在致密颗粒释放反应和前列腺素-血栓素系统刺激之后。 ATP是细胞表面配体门控P2X受体（P2XR）阳离子通道的天然激动剂。七个哺乳动物亚基（P2X1-7）形成同源和异源三聚体P2XR，具有重要的生理和病理生理作用。吡哆醛磷酸-6-偶氮苯基-2',4'-二磺酸 (PPADS) 是大多数哺乳动物 P2X 受体的有效拮抗剂。先前研究表明，P2X 受体胞外结构域中的 Lys-249 参与了 PPADS 的作用。为了确定该拮抗位点，我们构建了以 Lys-249 为中心、半径为 13 Å（与 PPADS 分子长度相同）的圆内的人 P2X1R 半胱氨酸残基突变体。我们假设，PPADS 结合位点的半胱氨酸残基突变会：(i) 降低半胱氨酸残基的可及性（通过 MTSEA-生物素化法测定）；(ii) 改变 PPADS 的亲和力；(iii) 猝灭 MTS-TAMRA 修饰的半胱氨酸残基的荧光。在测试的26个残基中，只有四个残基（Lys-70、Asp-170、Lys-190和Lys-249）符合这些标准，从而确定了拮抗剂结合位点，验证了分子对接结果，并由此提供了第一个经实验证实的PPADS结合模型。该结合位点与ATP结合位点重叠，表明PPADS通过空间位阻阻碍激动剂的进入。此外，PPADS诱导了邻近正构ATP结合口袋的富含半胱氨酸的头部（CRH）区域的构象变化。通过证明在hP2X1R的CRH区域引入正电荷的取代会导致通常对PPADS不敏感的大鼠P2X4R产生PPADS敏感性，从而证实了这种构象变化的重要性。这项研究为基于哺乳动物亚基在正构P2XR结合位点和CRH区域周围的差异来开发P2XR亚型选择性提供了模板。[2] 尽管已有研究表明，胞外核苷酸可通过激活嘌呤能P2受体（P2Y受体）在培养的大鼠系膜细胞中发挥促有丝分裂作用，但这些发现的体内相关性尚不明确。几乎所有细胞，尤其是血小板的致密颗粒，都含有高水平的核苷酸，这些核苷酸会在细胞损伤或血小板聚集时释放。在大鼠实验性系膜增生性肾小球肾炎（抗Thy1模型）中，系膜溶解和肾小球血小板聚集之后，会出现显著的系膜细胞增殖反应，最终导致肾小球细胞增生。因此，我们使用P2受体拮抗剂PPADS[4]研究了胞外核苷酸及其相应受体在核苷酸刺激的培养系膜细胞和炎症性肾小球疾病中的作用。 |
| 分子式 |
C14H10N3O12PS2-4.4[NA+]
|
|---|---|
| 分子量 |
599.3051
|
| 精确质量 |
598.903
|
| 元素分析 |
C, 28.06; H, 1.68; N, 7.01; Na, 15.34; O, 32.04; P, 5.17; S, 10.70
|
| CAS号 |
192575-19-2
|
| 相关CAS号 |
Iso-PPADS tetrasodium;207572-67-6
|
| PubChem CID |
135484645
|
| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
|
| LogP |
3.779
|
| tPSA |
288.3
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
15
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
918
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
KURWUCJJNVPCHT-UHFFFAOYSA-J
|
| InChi Code |
InChI=1S/C14H14N3O12PS2.4Na/c1-7-13(19)9(5-18)10(6-29-30(20,21)22)14(15-7)17-16-11-3-2-8(31(23,24)25)4-12(11)32(26,27)28;;;;/h2-5,19H,6H2,1H3,(H2,20,21,22)(H,23,24,25)(H,26,27,28);;;;/q;4*+1/p-4
|
| 化学名 |
tetrasodium;4-[[4-formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-(phosphonatooxymethyl)pyridin-2-yl]diazenyl]benzene-1,3-disulfonate
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| 别名 |
PPADS TETRASODIUM SALT; 192575-19-2; PPADS Tetrasodium; CHEMBL1256743; Pyridoxalphosphate-6-azophenyl-2',4'- disulfonic acid tetrasodium salt; 4-[[4-Formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy)methyl]-2-pyridinyl]azo]-1,3-benzenedisulfonic acid tetrasodium salt; PPADS tetrasodium salt, anhydrous; 4-[2-[4-Formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy)methyl]-2-pyridinyl]diazenyl]-1,3-benzenedisulfonic Acid Tetrasodium Salt;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~50 mg/mL (~83.43 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6686 mL | 8.3429 mL | 16.6859 mL | |
| 5 mM | 0.3337 mL | 1.6686 mL | 3.3372 mL | |
| 10 mM | 0.1669 mL | 0.8343 mL | 1.6686 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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463611831
