SBB-Analogue (GL13) Biotin

别名: GL13; SBB-AB
目录号: V100421
SBB-类似物 (GL13) 生物素 (GL13; SBB-AB) 由与生物素结合的苏丹黑 B (SBB) 衍生物组成。
SBB-Analogue (GL13) Biotin CAS号: 2171036-89-6
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
SBB类似物(GL13)生物素(GL13;SBB-AB)是由苏丹黑B(SBB)衍生物与生物素偶联而成。SBB类似物(GL13)生物素是检测衰老细胞的有效标志物,可消除血清饥饿和细胞融合引起的SA-β-半乳糖苷酶假阳性染色。SBB类似物(GL13)生物素可用于流式细胞术和免疫荧光分析。
SBB类似物(GL13)生物素(GL13,SBB-AB,CAS 2171036-89-6)是亲脂性染料苏丹黑B(SBB)的生物素偶联衍生物。其分子式为C39H38N8O3S,分子量为698.84。该研究用化学品是一种高效且特异的标记物,可用于检测各种生物学应用中的衰老细胞。它被广泛用作研究细胞衰老时替代传统SA-beta-半乳糖苷酶染色法的手段。
生物活性&实验参考方法
靶点
SBB-Analogue (GL13) Biotin does not target a specific protein in the traditional sense. Instead, it binds selectively to the lipofuscin pigment, which accumulates in the lysosomes of senescent cells. The compound consists of a Sudan Black B (SBB) derivative conjugated to biotin. The SBB portion enables robust detection of senescent cells, while the biotin tag allows for signal amplification using streptavidin-based detection systems. This design effectively detects senescent cells and eliminates false positive staining caused by serum starvation and cell fusion.
体外研究 (In Vitro)
在非细胞检测中,SBB类似物(GL13)生物素用于检测和可视化固定组织切片或细胞培养物中的衰老细胞。生物素标签可用于标准的免疫组织化学实验方案。将与荧光染料(例如,链霉亲和素-FITC、-Cy3)或酶(例如,HRP、AP)偶联的链霉亲和素加入到样品中,该偶联物可与生物素结合。然后,通过荧光显微镜或显色检测放大和可视化信号。
体内研究 (In Vivo)
在基于细胞的检测中,SBB类似物(GL13)生物素用于鉴定和定量衰老细胞。细胞经培养、固定和透化处理后,加入该化合物,洗涤后,再加入链霉亲和素偶联的检测试剂。然后通过流式细胞仪测量信号,对衰老细胞群进行定量分析。该化合物也用于免疫荧光分析,通过共聚焦显微镜观察培养物或组织切片中的衰老细胞。
酶活实验
对于非细胞成像方案,首先用PBS缓冲液洗涤生长在盖玻片或固定组织切片上的细胞。然后,将细胞与SBB类似物(GL13)生物素在封闭缓冲液(例如,1% BSA的PBS溶液)中于室温孵育1小时。洗涤后,加入链霉亲和素-FITC或链霉亲和素-HRP,孵育30分钟。最后一次洗涤后,用含DAPI的封片剂封片,显色后通过荧光显微镜或光学显微镜观察。
细胞实验
对于基于细胞的检测,将12孔板中的细胞用4%多聚甲醛固定并进行透化处理。将细胞与SBB类似物(GL13)生物素溶液在室温下孵育1小时。洗涤后,加入链霉亲和素-Alexa Fluor 488,并在黑暗中孵育30分钟。然后用胰蛋白酶消化细胞,重悬于FACS缓冲液中,并通过流式细胞仪进行分析。衰老细胞的百分比通过FITC通道中荧光强度的增加来确定。
动物实验
目前尚无使用SBB类似物(GL13)生物素作为注射剂的体内动物研究发表。该化合物通常不用作全身用药,而是用作动物研究中收集的固定组织的染色剂。例如,在衰老或化疗诱导衰老的小鼠模型中,可以使用该化合物对组织切片(例如肝脏、肾脏、肺)进行染色,以评估细胞衰老水平作为终点指标。
药代性质 (ADME/PK)
由于SBB类似物(GL13)生物素未用于动物体内试验,因此其药代动力学数据不适用。它是一种组织学和细胞学染色剂。用于研究时,粉末状生物素应避光保存于-20℃,最长可保存三年;溶液状生物素应避光保存于-80℃,最长可保存一年。该化合物可溶于DMSO,DMSO用于配制储备液。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
SBB类似物(GL13)生物素的毒性数据尚不可用。它是一种染色试剂,不可用于体内给药。作为研究用化学品,应按照标准实验室防护措施进行操作。它可能刺激皮肤、眼睛和呼吸道。应佩戴适当的个人防护装备(手套、实验服、护目镜)。
参考文献

[1]. Konstantinos Evangelou, et al. Robust, universal biomarker assay to detect senescent cells in biological specimens. Aging Cell. 2017 Feb;16(1):192-197.

[2]. Methods to Study Myc-Regulated Cellular Senescence: An Update. Methods Mol Biol. 2021:2318:241-254.

其他信息
SBB类似物(GL13)生物素是一种研究试剂,并非美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于人类治疗或诊断的药物。它是一种高性能化学工具,用于检测细胞衰老,细胞衰老与衰老、癌症和多种年龄相关疾病密切相关。它是验证衰老细胞清除药物疗效以及研究衰老细胞在疾病模型中生物学作用的关键试剂。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C39H38N8O3S
分子量
698.84
CAS号
2171036-89-6
外观&性状
Typically exists as solids at room temperature
别名
GL13; SBB-AB
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.4309 mL 7.1547 mL 14.3094 mL
5 mM 0.2862 mL 1.4309 mL 2.8619 mL
10 mM 0.1431 mL 0.7155 mL 1.4309 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们