| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ELF97 phosphate is a substrate for enzymes in the phosphatase family, including alkaline phosphatase (ALP) and acid phosphatase. It does not have a therapeutic target. Its molecular target is the active site of the phosphatase enzyme. The enzyme's nucleophilic cysteine residue attacks the phosphorus atom, cleaving the phosphate group and generating the fluorescent precipitate. This specificity makes it an ideal tool for detecting enzyme activity in situ.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验中，我们利用纯化的碱性磷酸酶对ELF97磷酸盐的动力学参数进行了表征。该底物水解符合米氏动力学，Km值约为2-5 uM。它并非抑制剂，而是一种报告底物。因此，EC₅0值不适用。荧光信号（激发/发射波长：360/530 nm）可稳定数小时，从而能够进行定量分析。该底物本身在工作浓度（1-100 uM）内无细胞毒性和毒性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，ELF97磷酸盐并非治疗药物，而是一种用于检测活体组织中磷酸酶活性的体内研究工具。它可以局部外用或注射（例如皮内、腹腔注射）于动物模型中。在活体小鼠中，它可用于可视化骨形成部位（ALP活性所在区域）或肿瘤。然而，它本身并不用于治疗任何疾病。其主要的体内用途是作为组织化学染色剂，用于对全组织或切片组织进行染色。
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| 酶活实验 |
不进行无细胞结合实验。采用无细胞酶动力学实验。对于ALP活性测定，将10 uL ELF97磷酸盐工作液（100 uM）与100 uL纯化的ALP（1-10 U/L）混合，ALP溶于含1 mM MgCl2的0.1 M Tris-HCl缓冲液（pH 9.0）中。反应在37℃下孵育10-30分钟。加入10 uL 0.5 M EDTA缓冲液（pH 8.0）终止反应。使用酶标仪测量荧光强度（激发波长360 nm，发射波长530 nm）。使用已知浓度的ELF97醇溶液绘制标准曲线。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测，细胞培养于96孔板或盖玻片上。为了检测内源性磷酸酶，细胞需进行固定（例如，用4%多聚甲醛）或直接使用活细胞。细胞用PBS洗涤后，在适当的缓冲液（例如，用于ALP检测的0.1 M Tris-HCl缓冲液，pH 9.0；或用于酸性磷酸酶检测的0.1 M醋酸盐缓冲液，pH 5.0）中，加入ELF97磷酸盐（10-100 uM），于37℃孵育30-60分钟。孵育后，洗涤细胞，并使用荧光显微镜（使用Texas Red或FITC滤光片）对黄绿色沉淀进行成像。该沉淀不用于细胞活力检测。
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| 动物实验 |
未进行动物疗效研究。对于体内成像，可将底物腹腔注射或静脉注射至小鼠模型，或将底物局部应用于小鼠。例如，在异位骨化的小鼠模型中，处死动物后，切取组织并在ELF97磷酸盐溶液中孵育。或者，在活体斑马鱼胚胎中，可将底物添加到水中以检测脊索ALP活性。最终获得定性或半定量成像数据。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于该化合物并非药物，因此未收集其传统的药代动力学数据（Cmax、Tmax、AUC）。它是一种组织化学底物，通常用于固定或安乐死的组织。如果全身给药，它会被血浆磷酸酶迅速清除或水解。在斑马鱼胚胎中（0.1-1 μM），该化合物在发生光漂白前可稳定存在 1-2 小时。对于固定组织检测，需终止反应以稳定信号。通常认为该化合物进入细胞的生物利用度可忽略不计。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在推荐的工作浓度（1-100 μM）内，ELF97 磷酸盐被认为无毒无害。由于其并非全身给药，因此尚未确定其急性毒性（LD₅₀）。在采用 HeLa 或 HEK293 细胞进行的细胞活力检测（MTT 或 Alamar Blue）中，浓度高达 500 μM 的 ELF97 处理 24 小时后，细胞活力未见显著下降。它不刺激皮肤或眼睛。它不属于危险物质（GHS）。标准实验室防护措施（手套、实验服）即可满足要求。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Elf 97 是一种芳基磷酸酯，属于喹唑啉类和一氯苯类化合物。它可用作荧光染料。（结构式见第一个来源。）
ELF97磷酸盐并非临床药物，也未获得任何监管部门的批准。它是一种高纯度生化试剂，专用于组织化学、免疫组织化学和流式细胞术等研究。该产品用于检测骨骼、肝脏和干细胞研究中的碱性磷酸酶（ALP）活性。由于其不溶于水，因此可以进行高分辨率的局部检测，优于可溶性荧光底物。该产品应避光保存于-20℃。ELF97磷酸盐也可用作酶标记荧光（ELF）技术的底物。 |
| 分子式 |
C14H9CL2N2O5P
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|---|---|
| 分子量 |
387.11
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| 精确质量 |
385.963
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| CAS号 |
147394-94-3
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| PubChem CID |
135424854
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| 密度 |
1.78g/cm3
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| 沸点 |
654.9ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
349.8ºC
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| 蒸汽压 |
4.84E-18mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.729
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| LogP |
3.781
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| tPSA |
122.58
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
584
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=P(O)(OC1=CC=C(Cl)C=C1C(NC2=C3C=C(Cl)C=C2)=NC3=O)O
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| InChi Key |
IXZONVAEGFOVSF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H9Cl2N2O5P/c15-7-1-3-11-9(5-7)14(19)18-13(17-11)10-6-8(16)2-4-12(10)23-24(20,21)22/h1-6H,(H,17,18,19)(H2,20,21,22)
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| 化学名 |
[4-chloro-2-(6-chloro-4-oxo-3H-quinazolin-2-yl)phenyl] dihydrogen phosphate
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| 别名 |
ELFP
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5832 mL | 12.9162 mL | 25.8325 mL | |
| 5 mM | 0.5166 mL | 2.5832 mL | 5.1665 mL | |
| 10 mM | 0.2583 mL | 1.2916 mL | 2.5832 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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