| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Natural product; Nrf2-ARE
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
sesaminol和/或6-OHDA对细胞存活率的影响[1]
我们评估了用sesaminol处理的SH-SY5Y细胞的细胞毒性。采用MTT法测定细胞活力。在0.25至10μg/ml的任何浓度下，芝麻酚均不影响细胞存活率（图4）。为了确定体外PD模型中6-OHDA的最合适浓度，用不同浓度的6-OHDA处理细胞。如图5所示，在20μM或更高的6-OHDA存在下，观察到细胞存活率显著降低。因此，本研究在后续实验中使用20μM 6-OHDA作为神经元损伤模型。 为了评估sesaminol对6-OHDA诱导的细胞死亡的保护作用，在加入20μM 6-OHDA之前，将细胞暴露于不同浓度的sesaminol2小时。经1或5μg/mlsesaminol预处理后，20μM 6-OHDA降低的细胞存活率得以恢复，这显著地将细胞存活率恢复到与对照组相同的水平（图6）。基于这些结果，在随后的实验中使用了1μg/ml的sesaminol。 对细胞内ROS产生的影响[1] ROS诱导氧化应激，并使用膜渗透探针DCFH-DA进行荧光染色。添加6-OHDA后，细胞内ROS的产生在培养后3小时和6小时显著增加（图7）。如图8（A，B）所示，单独用6-OHDA处理的细胞显示出非常强的绿色荧光。然而，用sesaminol预处理2小时并用6-OHDA培养3或6小时的细胞的荧光降低到对照水平。这些结果表明，sesaminol预处理抑制了6-OHDA诱导的细胞内ROS产生的增加。 sesaminol对6-OHDA诱导的凋亡细胞死亡的保护作用[1] 进行PI染色以研究6-OHDA诱导的细胞数量减少是否是由凋亡引起的。如图9所示，在仅接受6-OHDA的培养物中观察到形态异常，如核聚集，但在用sesaminol预处理2小时的组中，这些形态异常得到了缓解。这些结果表明，sesaminol可以防止6-OHDA诱导的凋亡细胞死亡。 6-OHDA和sesaminol对细胞内谷胱甘肽比值的影响[1] 细胞内谷胱甘肽比值（GSSG/GSH）是氧化应激的指标。加入6-OHDA和sesaminol并培养6小时后，测量细胞内谷胱甘肽比率。添加sesaminol可以抑制6-OHDA引起的谷胱甘肽比值（GSSG/GSH）的增加（图10）。这些结果表明，添加sesaminol增强了SH-SY5Y细胞的细胞内抗氧化特性。 6-OHDA和sesaminol对转录因子Nrf2核转位的影响[1] 转录因子核因子-红细胞介素-2相关因子2（Nrf2）向核内的易位对于激活Nrf2抗氧化反应元件（ARE）通路非常重要，ARE通路在氧化应激反应中起着重要作用。Nrf2通常位于细胞质中并与Keap1蛋白结合，它经历泛素化并促进蛋白酶体系统的降解。然而，Keap1的构象变化是由于亲电物质和ROS的刺激而发生的，Nrf2与Keap1和泛素解离并转移到细胞核中。核内转移Nrf2通过与DNA上的ARE结合，增强抗氧化酶的表达，如NQO1和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）。因此，我们进行了免疫荧光染色，以评估6-OHDA和sesaminol对Nrf2核转位的影响。在对照细胞中几乎没有观察到Nrf2在细胞核中的表达，在单独用6-OHDA处理的细胞中观察到轻微的表达。然而，在用sesaminol预处理的细胞的细胞质和细胞核中观察到Nrf2的表达（图11）。这些结果表明，sesaminol促进Nrf2的核转位。 6-OHDA和sesaminol对NQO1活性的影响[1] NQO1是一种典型的酶，在Nrf2-ARE途径的下游表达，它羟基化参与ROS产生的有毒醌。NQO1参与细胞对ROS的保护。因此，我们研究了6-OHDA和sesaminol对NQO1活性的影响，发现单独用6-OHDA处理的细胞中NQO1活性增加，sesaminol预处理显著增加（图12）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
鱼藤酮和sesaminol对小鼠肠道运动的影响[1]
为了评估肠道运动，我们测量了伊文思蓝从幽门的迁移距离（图14）。与对照组相比，鱼藤酮组的肠道运动明显降低，但在喂食少量含有鱼藤酮的sesaminol后，肠道运动功能得以恢复。 鱼藤酮和sesaminol对小鼠脑α-突触核蛋白表达的影响[1] 帕金森病的发病涉及一种名为α-突触核蛋白的蛋白质的聚集。对α-synuclein进行免疫染色（图15A），并计数黑质区域表达α-synoclein的路易体数量（图15B）。与对照组相比，鱼藤酮组的α-Synuclein表达增加，但当sesaminol（L）与鱼藤酮联合使用时，α-Synoclein表达趋于降低。 鱼藤酮和sesaminol对小鼠结肠黏膜形态的影响[1] 帕金森病可能始于肠道，而不是大脑。因此，观察了HE（苏木精-伊红）染色的结肠黏膜的形态（图16）。与对照组相比，鱼藤酮组观察到肠粘膜层缩短和粘膜表面损伤。然而，在给予鱼藤酮和少量sesaminol的组中，几乎没有观察到肠粘膜异常。 鱼藤酮和sesaminol对小鼠黑质TH表达的影响[1] 我们在黑质中进行了TH的免疫组织化学染色，以研究与运动障碍相关的神经变性（图17）。与对照组相比，鱼藤酮的给药减少了TH阳性多巴胺能神经元。然而，sesaminol倾向于从s TH下降中恢复。 |
| 细胞实验 |
细胞培养和细胞活力测定[1]
使用含有10%胎牛血清（FBS）的Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM），将SH-SY5Y细胞以1.0×10⁵细胞/ml的速度接种在96孔培养板上。将细胞培养过夜并粘附在板上。将培养基替换为含有不同浓度的sesaminol和/或6-OHDA的培养基，并在培养箱中培养细胞不同时间。当sesaminol和6-OHDA一起使用时，在加入6-OHDA前2小时加入sesaminol。处理后，取出培养基，向每个孔中加入100μl含有10%5mg/ml 3-（4,5-二甲基-2-噻唑基）-2,5-二苯基溴化四唑（MTT）溶液的培养基。将细胞在培养箱中放置2小时。取出培养基，向每个孔中加入200μl DMSO。在平板混合器（Biotec，Tokyo，Japan）上搅拌培养板3分钟，并使用微孔板读数器测量波长535nm处的吸光度。 细胞内ROS产生的测量[1] 使用相对特异的过氧化氢探针2′，7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）分析细胞内ROS的形成。将细胞与2.4 mM DCFH-DA（5μL）一起孵育30分钟。然后，用PBS洗涤细胞两次。为了观察细胞内荧光，用FSX100生物成像导航器观察细胞，这是一种一体化荧光成像系统。通过测量荧光强度来评估细胞内ROS的产生。 细胞内谷胱甘肽比值（GSSG/GSH）的测定[1] 用sesaminol和/或6-OHDA处理的细胞用液氮冷冻和解冻两次，以破坏细胞膜。加入20μl 5%5-磺基水杨酸（SSA）溶液并进行脱蛋白处理后，将上清液用作测量样品。使用GSSG/GSH定量试剂盒（日本熊本Dojindo）测量谷胱甘肽比率，并使用酶标仪测量420nm波长下的吸光度。根据计算出的总谷胱甘肽（GSH+GSSG）浓度和GSSG浓度，使用以下公式计算GSH浓度。GSH浓度=总谷胱甘肽浓度-[GSSG浓度]x 2将GSH浓度除以GSSG浓度得到的值定义为GSSG/GSH比值。 凋亡细胞死亡的构象[1] 使用碘化丙啶（PI）证实凋亡细胞死亡。细胞在35 mm培养皿中培养24小时，用PBS洗涤两次，在4°C下用70%乙醇固定30分钟。用PBS进一步洗涤两次后，在37°C下加入400μl PI染色溶液1小时。取出PI染色溶液，用盖玻片（24×24 mm）覆盖培养皿，用荧光显微镜观察。 通过免疫荧光染色鉴定核Nrf2[1] SH-SY5Y细胞（1.0×105个细胞/ml）在Lab Tek小室载玻片系统中培养过夜。将细胞暴露于1μg/ml的sesaminol中2小时，并用20μM的6-OHDA处理3小时。用0.5ml PBS冲洗细胞三次，用0.1%的Triton-X渗透。用2滴无蛋白阻断血清阻断细胞30分钟。载玻片在4°C下暴露于抗Nrf2抗体过夜。用PBS洗涤载玻片，并用Alexa Fluor 488山羊抗兔IgG孵育1小时。免疫染色后，加入4'，6-二氨基-2-苯基吲哚二盐酸盐（DAPI）。使用荧光显微镜观察载玻片。 NAD（P）H:醌氧化还原酶（NQO1）活性的测定[1] 参照Prochaska等人的方法测量NQO1活性。将SH-SY5Y细胞（0.5×106个细胞/ml）在35 mm培养皿中培养过夜。将细胞暴露于1μg/mlsesaminol中2小时，并用20μM 6-OHDA处理6小时。使用超声波仪在冰冷却下对细胞进行超声波处理。在离心机（TOMY MX-160高速冷冻微型离心机）中离心（12000 rpm，4°C下20分钟）后，将上清液用于酶测定。向测定管中加入3.85ml反应混合物。通过加入150μl上清液开始反应，并用含有双香豆素的终止溶液终止反应。MTT消光系数e=11.3 mM–1 cm–1用于计算减少的MTT量，并定义为NQO1活性。 |
| 动物实验 |
动物处理[1]
25只7周龄雄性C57BL6/J小鼠先饲喂标准咀嚼饲料3天，再饲喂对照饲料3天，然后随机分为4组：（1）对照组，（2）鱼藤酮组，（3）芝麻酚（L）组，（4）芝麻酚（H）组。第（2）至（4）组小鼠经胃管灌注鱼藤酮（10 mg/kg体重），连续29天。每只小鼠灌注量为0.2 ml。鱼藤酮溶于3%羧甲基纤维素钠（CMC）和1.25%氯仿的混合溶液中。对照组仅灌注溶剂。饲料按表1所示比例混合。芝麻酚饲料（L）和芝麻酚饲料（H）分别含有0.0008%和0.008%的芝麻酚。小鼠饲养于25℃，光照周期为12小时光照/12小时黑暗（上午8点至晚上8点）。食物和水自由摄取。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
帕金森病（PD）是一种神经退行性疾病，由氧化应激导致黑质神经元退化引起。芝麻酚具有很强的抗氧化和抗癌作用。我们利用体外和体内帕金森病模型，研究了由芝麻酚糖苷制备的芝麻酚作为其新的生理作用对帕金森病的预防作用。为了构建体外帕金森病模型，我们向人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y细胞）中添加了6-羟基多巴胺（6-OHDA）。6-OHDA处理后，SH-SY5Y细胞的活力呈剂量依赖性下降，而添加芝麻酚后，细胞活力恢复至对照水平。6-OHDA增加了细胞内活性氧的产生，而添加芝麻酚显著抑制了这种增加。在对照组中未观察到细胞核内Nrf2的表达，但在6-OHDA组中观察到轻微的表达增加。芝麻酚组在细胞质和细胞核中均表现出Nrf2的强烈表达。6-OHDA组的NAD(P)H：醌氧化还原酶（NQO1）活性增强，芝麻酚组的NQO1活性进一步增强。此外，本研究采用口服神经毒素鱼藤酮的方法构建体内帕金森病模型。鱼藤酮处理组小鼠的运动功能较对照组缩短，但少量芝麻酚即可使其恢复至对照水平。鱼藤酮组小鼠的肠道蠕动显著低于对照组，而芝麻酚组小鼠的肠道蠕动与对照组相当。鱼藤酮组小鼠黑质中α-突触核蛋白的表达增加，而芝麻酚组小鼠黑质中α-突触核蛋白的表达降低。鱼藤酮组表现出结肠黏膜缩短和损伤，而芝麻酚组几乎未观察到这些结肠黏膜异常。这些结果提示芝麻酚对帕金森病具有预防作用。[1]本研究的体内实验系统结果表明，芝麻酚可预防帕金森病病理从肠道发展，并降低黑质中α-突触核蛋白的表达，从而抑制运动功能障碍和肠道运动功能的下降。芝麻酚能否穿过血脑屏障（BBB）是一个重要问题。因此，我们从以下几个决定芝麻酚血脑屏障穿透性的因素对其进行了评估。 (1) 高脂溶性（水油分配系数）[LogP] < 3，(2) 氢键数 < 8，(3) 中性电荷或低电离度（极性表面积）< 90 Å，(4) 较小的分子体积（可旋转键数）< 5，以及 (5) 较小的分子尺寸 < 450 Da。芝麻酚的 (1)、(2)、(3)、(4) 和 (5) 值分别为 2.14、7、75.61 Å、2 和 370.4。这些数值表明芝麻酚可能能够穿过血脑屏障。本研究还发现，芝麻酚在体外实验系统中具有神经保护作用，在体内实验系统中具有帕金森病预防作用。值得注意的是，少量芝麻酚即可观察到这种保护作用。这些结果表明，芝麻酚非常适合用于帕金森病的预防性治疗。为了实际应用，有必要进一步详细阐明其作用机制。[1]
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| 分子式 |
C20H18O7
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|---|---|
| 分子量 |
370.35
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| CAS号 |
74061-79-3
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| PubChem CID |
94672
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
504.7±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
259.0±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.644
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| LogP |
2.77
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
558
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
C1C2C(COC2C3=CC4=C(C=C3O)OCO4)C(O1)C5=CC6=C(C=C5)OCO6
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| 别名 |
Sesaminol; (+)-sesaminol; 74061-79-3; 6-[(1s,3ar,4s,6ar)-4-(1,3-benzodioxol-5-yl)tetrahydro-1h,3h-furo[3,4-c]furan-1-yl]-1,3-benzodioxol-5-ol; CHEBI:145778; (1S-(1alpha,3aalpha,4alpha,6aalpha))-6-(4-(1,3-Benzodioxol-5-yl)tetrahydro-1H,3H-furo(3,4-c)furan-1-yl)-1,3-benzodioxol-5-ol; 6-[(3S,3aR,6S,6aR)-3-(1,3-benzodioxol-5-yl)-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrofuro[3,4-c]furan-6-yl]-1,3-benzodioxol-5-ol; Justisolin;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7001 mL | 13.5007 mL | 27.0015 mL | |
| 5 mM | 0.5400 mL | 2.7001 mL | 5.4003 mL | |
| 10 mM | 0.2700 mL | 1.3501 mL | 2.7001 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PtdIns-(3)-P1 (1,2-dipalmitoyl) ammonium
Ceramide (Egg)
Homoeriodictyol chalcone
TBE56
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