NP-BSA

别名: 4-Hydroxy-3-nitrophenylacetyl-bovine serum albumin

目录号: V106111 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

NP-BSA（4-羟基-3-硝基苯乙酰-牛血清白蛋白）是 4-羟基-3-硝基苯乙酰 (NP) 与牛血清白蛋白 (BSA) 结合的抗原佐剂结合物，BSA 是一种免疫复合物。

NP-BSA 产品类别: Biochemical Assay Reagents

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
生物数据图片
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产品描述

NP-BSA（4-羟基-3-硝基苯乙酰-牛血清白蛋白）是一种抗原-佐剂偶联物，由4-羟基-3-硝基苯乙酰（NP）与牛血清白蛋白（BSA）偶联而成，是一种免疫复合物。通过将抗原与蛋白质佐剂偶联，可以增强疫苗模型中抗原特异性抗体的产生。该偶联物不影响蛋白质折叠或破坏主要表位，并且可以增强交叉呈递和抗原特异性T细胞的生成。
NP-BSA（4-羟基-3-硝基苯乙酸酯-牛血清白蛋白）是一种半抗原-载体蛋白偶联物，由合成的半抗原4-羟基-3-硝基苯乙酸酯（NP）与具有免疫原性的牛血清白蛋白（BSA）载体共价连接而成。它是一种广泛应用的免疫学工具，可用作模型抗原-佐剂偶联物，用于研究疫苗研发中T细胞依赖性免疫反应。BSA载体赋予半抗原免疫原性。

生物活性&实验参考方法

靶点	The target of NP-BSA is the immune system itself, not a specific receptor. As a hapten-carrier conjugate, it functions as a complete antigen, eliciting an immune response against the NP hapten. B cells specific for the NP hapten bind to NP-BSA via their B cell receptors (BCRs), internalize the conjugate, and present NP-derived peptides on MHC class II molecules to CD4+ T helper cells. This T cell-dependent activation leads to antibody production, class switching, and affinity maturation. NP-BSA is used to study the mechanisms of B cell activation, T cell help, and antibody responses.
体外研究 (In Vitro)	在体外，NP-BSA 可用于免疫学检测，以检测和表征 NP 特异性 B 细胞和抗体。它可用于 ELISA、ELISpot 和流式细胞术，以测量 NP 特异性抗体滴度并鉴定 NP 结合 B 细胞。它也是研究 B 细胞受体 (BCR) 亲和力成熟和 T 细胞依赖性 B 细胞活化的工具。在所用浓度 (1-10 ug/mL) 下，它不具有细胞毒性。它是一种研究试剂，而非治疗药物。
体内研究 (In Vivo)	在体内，NP-BSA 被用作模型抗原，用于研究小鼠体内的 T 细胞依赖性免疫应答。用佐剂（例如明矾、完全弗氏佐剂）免疫小鼠，可诱导产生强烈的 NP 特异性抗体应答，其特征是类别转换、亲和力成熟和记忆 B 细胞的生成。NP-BSA 免疫小鼠可用于研究 B 细胞发育、浆细胞分化和体液免疫机制。它还可与 NP-OVA（NP 与卵清蛋白偶联）联合使用，用于研究 T 细胞与 B 细胞的相互作用。
酶活实验	不适用。NP-BSA 是一种蛋白质缀合物，并非标准酶抑制剂。其纯度和取代率（每个 BSA 分子上的 NP 基团数）通过紫外分光光度法测定（蛋白质的 A280 值，NP 的 A430 值）。结构经质谱分析确认。理化性质：分子量约为 66 kDa + NP，白色至类白色粉末，可溶于 PBS 和水。ELISA 实验中，将 NP-BSA（1-10 ug/mL）包被于酶标板中，过夜孵育，封闭后加入血清样本；结合的抗体用抗 IgG-HRP 抗体检测。
细胞实验	对于B细胞染色，将免疫小鼠脾脏或淋巴结的单细胞悬液与荧光标记的NP-BSA（例如NP-BSA-FITC，1-10 ug/mL）在4℃下孵育30分钟。通过流式细胞术鉴定NP特异性B细胞，结果显示为B220+NP+。对于ELISpot实验，将NP-BSA（10 ug/mL）包被于酶标板上，然后加入脾细胞；检测NP特异性抗体分泌细胞（ASC）。对于增殖实验，用CFSE标记B细胞，并与NP-BSA和T细胞共培养；通过流式细胞术检测增殖情况。
动物实验	对于体内免疫，雌性BALB/c小鼠或C57BL/6小鼠（6-8周龄，每组n=5-10）于第0天腹腔注射（IP）或皮下注射（SC）50-100 μg NP-BSA乳化于弗氏完全佐剂（CFA，1:1）中。在第14天和/或第28天进行加强免疫（50 μg NP-BSA乳化于弗氏不完全佐剂，IFA中）。分别于第7、14、21、28、35和42天采集血液样本。采用ELISA法检测NP特异性血清抗体滴度（IgM、IgG1、IgG2a等）。在亲和力成熟研究中，于多个时间点收集血清，并通过在半抗原 NP 帽存在下的解离速率来测量 NP 特异性抗体的相对亲和力。生发中心 B 细胞通过脾细胞流式细胞术进行分析（B220+ GL7+ Fas+）。
药代性质 (ADME/PK)	NP-BSA 不适用于药代动力学研究，因为它是一种抗原而非药物。腹腔注射或皮下注射后，该蛋白偶联物会被引流淋巴结和脾脏中的抗原呈递细胞 (APC) 摄取。随后，它被加工并呈递给 T 细胞。该蛋白会在数天内降解。用于研究时，应将其以冻干粉末的形式储存在 -20℃（粉末：-20℃ 可保存 3 年，4℃ 可保存 2 年；溶液：-80℃ 可保存 1 年），并避光防潮。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	NP-BSA毒性低。用NP-BSA佐剂免疫小鼠通常耐受性良好。然而，该佐剂可能引起局部炎症。处理生物试剂时应遵循标准安全预防措施：佩戴个人防护装备（手套、实验服、护目镜），在通风橱内操作，避免吸入和皮肤接触。仅供研究使用。
参考文献	[1]. Site-specific antigen-adjuvant conjugation using cell-free protein synthesis enhances antigen presentation and CD8+ T-cell response. Sci Rep. 2021 Mar 18;11(1):6267.
其他信息	NP-BSA（4-羟基-3-硝基苯乙酸酯-牛血清白蛋白；CAS号未分配）是一种研究级半抗原-载体偶联物，用作免疫学研究中的模型抗原。它并非FDA批准的药物。它用于研究T细胞依赖性B细胞活化、亲和力成熟、生发中心反应和疫苗开发。仅供研究使用，不可用于诊断或治疗用途。储存：粉末在-20℃下可保存3年，在4℃下可保存2年；溶剂在-80℃下可保存1年。

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

外观&性状	Light yellow to yellow liquid
别名	4-Hydroxy-3-nitrophenylacetyl-bovine serum albumin
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)	注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。注射用配方 (IP/IV/IM/SC等) 注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline) 生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。注射用配方 2:* DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More 注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。注射用配方 5:* 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline) 注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline) 注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline) 注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil) 注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 口服配方口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More 口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 6: 做成粉末与食物混合注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

溶解度 (体内实验)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片

[1].The image shows, from left to right: the NP raw material, NP-BSA (with a modification rate >20), and NP-BSA reaction mixture 2 (with a modification rate of 1-4). The mobile phase used was a mixture of dichloromethane and methanol in a 7:1 ratio. It can be observed that after the NP raw material was conjugated with BSA, its Rf value decreased from 0.5 to 0, indicating an increase in polarity and successful labeling.