| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The target of DT-2 is cGMP-dependent protein kinase (PKG), specifically PKG Ialpha and PKG Ibeta isoforms. PKG is a serine/threonine kinase that is activated by cGMP and plays a critical role in vasodilation, platelet inhibition, smooth muscle relaxation, and cardiac contractility. DT-2 binds to the substrate-binding site of PKG, acting as a competitive inhibitor. It is composed of two parts: the PKG tight-binding sequence (W45, LRKKKKKH) and a membrane-translocating sequence (DT-6, YGRKKRRQRRRPP). DT-2 inhibits both cGMP-stimulated PKG activity and basal (cGMP-independent) PKG activity. It is ~1000-fold selective for PKG over PKA.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，DT-2 (10-1000 nM) 能有效抑制 PKG 催化的磷酸化，其 Ki 值为 12.5 nM。它既能抑制 cGMP 刺激的 PKG 活性，也能抑制基础 PKG 活性。在细胞裂解液中，DT-2 (1-100 uM) 能抑制 PKG 介导的 VASP（血管舒张刺激磷蛋白）在 Ser239 位点的磷酸化。它对 PKG 的选择性比对 PKA 的选择性高 1000 倍。然而，在完整细胞中，DT-2 对 PKG 的特异性降低，在高浓度 (≥10 uM) 下可能抑制其他激酶（例如 ERK、p38、PKB、PKC）。浓度高达 20 uM 时，DT-2 无细胞毒性。
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| 酶活实验 |
DT-2 的抑制活性采用体外激酶活性测定法进行测定。将纯化的 PKG Iα 或 Iβ (0.1-1 ug) 与 10 uM cGMP、50 uM ATP（含 0.5-1 uCi [γ-32P]-ATP）和 PKG 特异性肽底物（例如，VASP 衍生肽，50-100 uM）在激酶缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl2、1 mM DTT、0.1% BSA）中孵育。加入 DT-2 (0.1-1000 nM)，并在 30℃ 下孵育 10-30 分钟。将磷酸化底物点样于 P81 磷酸纤维素滤纸上，用 0.5% H3PO4 溶液洗涤，并用液体闪烁计数器计数。计算 IC₅0 值。为评估选择性，平行实验中使用 PKA。利用 Cheng-Prusoff 方程，根据 IC₅0 值计算 Ki 值。
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| 细胞实验 |
在细胞实验中，将细胞（例如，大鼠平滑肌细胞、人血小板、NRVM心肌细胞）接种于6孔板中（3×10⁵个细胞/孔）。加入DT-2（1-50 uM）孵育30-60分钟。然后用PKG激活剂（例如，ANP，10-100 nM；SNP，1-10 uM；8-Br-cGMP，100-500 uM）刺激细胞。使用磷酸化特异性抗体，通过Western blotting检测VASP在Ser239位点（PKG特异性位点）的磷酸化水平。检测PKA特异性底物（例如，VASP的Ser157位点）的磷酸化水平，以监测PKA活性。对于细胞匀浆，用皂苷（0.05-0.1%）透化细胞，并在cGMP或cAMP存在下与DT-2（1-50 uM）孵育。PKG和PKA活性按上述方法测定。细胞毒性通过LDH释放或MTT法评估。
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| 动物实验 |
在体内，DT-2 可用于啮齿动物，以研究 PKG 功能。例如，在血管调节大鼠模型中，静脉注射 DT-2（0.1-1 mg/kg），并监测血压和心率。DT-2 可抑制 PKG 介导的血管舒张，从而导致血压升高。在血小板聚集研究中，可将 DT-2 添加到离体全血中，或静脉注射 DT-2（1-5 mg/kg）给小鼠，并通过聚集测定法评估血小板聚集情况。在神经再生研究中，DT-2 可通过鞘内注射给药。然而，需要谨慎，因为 DT-2 在完整细胞中可能失去特异性并抑制其他激酶。由于 DT-2 是一种研究工具，因此没有提供具体的实验方案。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
DT-2 是一种细胞渗透性肽。静脉注射后，其血浆半衰期较短（< 1 小时）。膜转位序列（DT-6）可促进细胞摄取。用于研究的 DT-2 以冻干粉末形式储存于 -20℃（粉末：-20℃ 可保存 3 年，4℃ 可保存 2 年；溶剂：-80℃ 可保存 1 年，-20℃ 可保存 6 个月）。它可溶于 DMSO（10-50 mM）和水。目前尚无详细的药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无DT-2的具体毒理学数据。细胞培养研究表明，20 μM的DT-2无毒性（无LDH释放）。动物实验中，在有效剂量（1-5 mg/kg，静脉注射）下，未见明显毒性报道。然而，由于DT-2能够抑制完整细胞中的其他激酶，因此可能出现脱靶效应。处理肽类化合物时，应遵循标准安全预防措施：佩戴个人防护装备（手套、实验服、护目镜），在通风橱内操作，避免吸入和皮肤接触。本品不可食用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
DT-2 乙酸酯（YGRKKRRQRRRPPLRKKKKKH；CAS 编号未分配；游离碱分子量 3462.17）是一种研究级、细胞渗透性肽类 cGMP 依赖性蛋白激酶 (PKG) 抑制剂。它并非 FDA 批准的药物。在体外，它是一种强效（Ki = 12.5 nM）且选择性（>1000 倍）的 PKG 抑制剂，但在完整细胞中会失去特异性。它被用作研究 PKG 在血管调节、血小板功能和心脏生理学中作用的工具。仅供研究使用，不可用于诊断或治疗。储存：粉末 -20℃ 可保存 3 年，4℃ 可保存 2 年；溶剂 -80℃ 可保存 1 年，-20℃ 可保存 6 个月。
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| 分子式 |
C154H287N53O55
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| 分子量 |
3761.25
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| 相关CAS号 |
DT-2;1220985-78-3
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.2659 mL | 1.3293 mL | 2.6587 mL | |
| 5 mM | 0.0532 mL | 0.2659 mL | 0.5317 mL | |
| 10 mM | 0.0266 mL | 0.1329 mL | 0.2659 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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