Biotinyl-Amylin (mouse, rat) TFA

目录号: V106351 纯度: ≥98%
生物素-胰淀素(小鼠、大鼠)TFA 是一种生物素化的胰淀素(小鼠、大鼠)。
Biotinyl-Amylin (mouse, rat) TFA 产品类别: Others 16
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产品描述
生物素化胰淀素(小鼠、大鼠)TFA 是一种生物素化的胰淀素(小鼠、大鼠)。胰淀素(小鼠、大鼠)是一种由 37 个氨基酸组成的胰腺蛋白,控制多种代谢过程,包括血糖和乳酸性酸中毒。
生物素标记的胰淀素(小鼠、大鼠)TFA 是小鼠/大鼠胰淀素肽(序列:KCNTATCATQRLANFLVRSSNNLGPVLPPTNVGSNTY-NH2,二硫键:Cys2-Cys7)的生物素化形式。它由 37 个氨基酸组成,其分子量(游离碱基)为 4146.69 Da。生物素化通常位于 N 端。这种生物素标记的类似物保留了天然胰淀素的生物活性,可作为高亲和力探针,用于研究胰淀素受体以及在各种检测中检测胰淀素。
生物活性&实验参考方法
靶点
Biotinyl-Amylin (mouse, rat) TFA targets the amylin receptor, a complex of the calcitonin receptor (CTR) with receptor activity-modifying proteins (RAMPs). Amylin is a pancreatic hormone co-secreted with insulin. It plays a crucial role in glucose metabolism by regulating gastric emptying, suppressing glucagon secretion, and promoting satiety. The biotinyl group does not interfere with the receptor binding properties of the peptide. In fact, biotinyl analogues of amylin retain a similar affinity for binding to rat liver plasma membranes compared to rat amylin.
体外研究 (In Vitro)
在体外,生物素标记的胰淀素(小鼠、大鼠)TFA 可用作探针,研究胰淀素受体的结合和表达。与大鼠胰淀素相比,生物素标记的胰淀素类似物对大鼠肝脏质膜的结合亲和力相似。在功能性实验中,这种生物素标记的肽能够完全抑制体外培养的大鼠比目鱼肌中胰岛素刺激的糖原合成,表明生物素标记不会损害其生物活性。这种生物素标记形式非常适合用于下拉实验、ELISA 和流式细胞术。
体内研究 (In Vivo)
在体内,母体肽胰淀素是一种由37个氨基酸组成的胰腺蛋白,它调控着多种代谢过程,例如血糖和乳酸水平。生物素标记的胰淀素(小鼠、大鼠)TFA主要用于离体或体外应用。它可用于动物模型中追踪胰淀素的分布或研究其与组织的结合,但这通常需要注射标记的肽。生物素标签使得在组织化学或生化分析中,可以使用链霉亲和素偶联探针(例如辣根过氧化物酶、荧光染料)进行检测。
酶活实验
生物素标记的胰淀素与其受体的结合亲和力可通过竞争性结合实验进行评估。制备大鼠肝脏质膜(RLPM),并将其与不同浓度(0.01-1000 nM)的生物素标记的胰淀素TFA在有或无过量未标记胰淀素的情况下进行孵育。孵育和洗涤后,使用链霉亲和素-辣根过氧化物酶(HRP)偶联物和比色底物(例如TMB)检测结合的生物素标记的胰淀素。测量450 nm处的吸光度,并计算特异性结合。解离常数(Kd)可通过饱和结合实验测定。
细胞实验
生物素标记的胰淀素(小鼠、大鼠)TFA 不用于标准细胞活力检测,而是用于受体结合研究。将表达胰淀素受体的细胞(例如,转染了 CTR 和 RAMP3 的 NIH-3T3 细胞)接种于 24 孔板中。在结合缓冲液中,用不同浓度的生物素标记的胰淀素 TFA(0.1-1000 nM)孵育细胞。加入 100 倍过量的未标记胰淀素,测定非特异性结合。孵育和洗涤后,裂解细胞,并通过链霉亲和素-HRP ELISA 检测结合的生物素化肽。结合亲和力 (Kd) 由饱和结合曲线计算得出。
动物实验
研究表明,胰淀素可诱导小鼠低血糖。在体内研究中,生物素标记的胰淀素可用于组织化学检测。雄性C57BL/6小鼠(每组n=6)腹腔注射(IP)或静脉注射(IV)生物素标记的胰淀素(小鼠、大鼠)TFA(10-50 μg)。对照组注射载体或未标记的胰淀素。在设定的时间间隔,处死小鼠并采集组织(例如,脑、胰腺、胃、肾脏)。制备组织切片,并用链霉亲和素标记的荧光染料或辣根过氧化物酶(HRP)染色,以显示注射的生物素标记肽的分布。这使得可以直接定位胰淀素的结合位点。
药代性质 (ADME/PK)
生物素化胰淀素(小鼠、大鼠)TFA(分子量 4146.69)是一种肽。作为一种生物素化肽,它在体外代谢稳定性有限,但在体内会迅速发生蛋白水解降解。生物素标记不会因代谢过程而发生化学改变。通常以冻干粉末的形式储存在 -20℃ 或 -80℃。用于研究时,需用水、PBS 或含有载体蛋白(例如 0.1% BSA)的缓冲液进行复溶,以防止吸附到表面。目前尚无详细的药代动力学数据。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
处理肽类物质时,应遵循标准安全预防措施。生物素酰胰淀素(小鼠、大鼠)TFA 仅供研究使用,不可用于人体食用。它可能引起皮肤和眼睛刺激。操作时,请使用个人防护装备(手套、实验服、护目镜),在通风橱内操作,避免吸入和皮肤接触。
参考文献

[1]. Amylin induces hypoglycemia in mice. An Acad Bras Cienc. 2013 Mar;85(1):349-54.

其他信息
生物素化胰淀素(小鼠、大鼠)TFA 是一种研究级生物素化肽,用作胰淀素受体的高亲和力探针。它并非美国食品药品监督管理局 (FDA) 批准的药物。它是研究胰淀素结合、受体表达及其在糖尿病和肥胖等代谢性疾病中作用的重要工具。仅供研究使用,不可用于诊断或治疗。储存方法:粉末 -20℃ 可保存 3 年,4℃ 可保存 2 年;溶剂 -80℃ 可保存 1 年。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C177H286N54O55S3.XC2HF3O2
分子量
4146.69 (free base)
外观&性状
Solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Note: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气下),避免暴露在潮湿和光照下。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~50 mg/mL (with ultrasonication)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们