Gluten, Wheat

别名: Gluten Source Wheat 谷朊;小麦(TRITICUM VULGARE)谷蛋白;小麦面筋;谷蛋白,从小麦所得;小麦谷蛋白;谷朊粉,就是小麦蛋白,面筋;小麦谷朊粉;小麦面筋粉;2,6-二吗啉-4-嘧啶-4-羧酸;Gluten from Wheat 谷蛋白,从小麦所得;谷朊粉;谷元粉;活性小麦蛋白粉;烤面筋专用粉面筋粉;面筋粉;谷朊粉 小麦谷朊粉 面筋粉
目录号: V107710 纯度: ≥98%
麸质,小麦是一种粘稠的、粘弹性的蛋白质物质,可从小麦中提取。
Gluten, Wheat CAS号: 8002-80-0
产品类别: Biochemical Assay Reagents
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
25g
50g
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产品描述
小麦麸质是一种粘稠、有弹性的蛋白质物质,可以从小麦中提取出来。小麦麸质可能诱发乳糜泻。
小麦面筋(CAS:8002-80-0)是一种复杂的蛋白质混合物,主要成分是麦醇溶蛋白和谷蛋白,存在于小麦及相关谷物(如大麦、黑麦)中。它是一种具有粘弹性的内聚性蛋白质物质,赋予面团弹性和强度。在食品工业中,小麦面筋可用作面粉添加剂、肉类替代品(如面筋)和增味剂。在生物医学研究中,小麦面筋是研究乳糜泻(CD)和非乳糜泻麸质敏感症(NCGS)的主要抗原。它用于表征机体对麸质肽的免疫反应,并测试潜在治疗性酶的疗效。
生物活性&实验参考方法
靶点
The "target" of Wheat Gluten is the human immune system in genetically susceptible individuals (HLA-DQ2/DQ8). Gluten is not a drug; its biological activity is immunogenic. Specific proline-rich peptides derived from gliadin (e.g., 33-mer and 26-mer) resist complete digestion by gastric enzymes. These peptides are deamidated by tissue transglutaminase (TG2) in the intestinal mucosa. These deamidated peptides bind with high affinity to the HLA-DQ2/DQ8 molecules on antigen-presenting cells, which then activate CD4+ T-cells. This triggers an inflammatory cascade leading to villous atrophy and crypt hyperplasia, the hallmark of celiac disease.
体外研究 (In Vitro)
小麦面筋的体外活性可通过其刺激T细胞的能力来测定。将来自乳糜泻患者的外周血单核细胞(PBMC)或肠道T细胞系培养于96孔板中。用蛋白酶消化的面筋(胃蛋白酶/胰蛋白酶消化物)或合成的免疫原性肽(例如,33肽脱酰胺醇溶蛋白肽)刺激这些细胞。48-72小时后收集细胞培养上清液,并通过ELISA测定促炎细胞因子(例如,干扰素-γ、IL-2、IL-15)的浓度。细胞因子的产生程度可直接反映面筋蛋白的体外活性。该检测方法是通过“面筋激发试验”诊断乳糜泻的金标准。
体内研究 (In Vivo)
体内活性是乳糜泻的核心病理机制。当敏感个体摄入麸质时,免疫反应会在小肠发生,导致绒毛萎缩和肠道屏障功能丧失。症状包括腹泻、吸收不良、体重减轻和营养缺乏。在研究中,麸质被用于在动物模型(例如转基因小鼠)中诱导这种病理过程。麸质的体内活性是临床症状的直接原因。摄入的麸质量与肠道损伤程度相关,肠道损伤程度可通过十二指肠活检的Marsh评分来衡量。这种特定的体内效应已被充分阐明,也是无麸质饮食(GFD)取得成功的原因。
酶活实验
小麦面筋的非细胞检测方法通常是定量检测其含量的分析方法。标准方案采用竞争性ELISA,使用面筋特异性单克隆抗体(例如R5或G12抗体)。将样品(例如食品提取物)加入包被有麦醇溶蛋白的孔中。加入生物素标记的检测抗体。洗涤后,加入链霉亲和素-HRP和底物,并在450 nm处测量吸光度。通过将吸光度与已知浓度的麦醇溶蛋白标准曲线进行比较来确定面筋的浓度。该检测方法对于验证“无麸质”产品的安全性至关重要。检测限通常低于5 ppm。
细胞实验
研究麸质毒性的细胞实验通常使用肠道活检组织或T细胞系。标准方案采用人肠道上皮细胞系(例如Caco-2细胞)。将细胞接种于Transwell小室中培养至汇合,形成极化的单层细胞。用消化的麸质组分(例如“麦醇溶蛋白肽”)处理单层细胞的顶端。通过在顶端室加入荧光标记物(例如异硫氰酸荧光素-葡聚糖,FD-4),并在2-4小时后测量其在基底外侧室的出现情况,来评估肠道通透性。FD-4通量的增加表明麸质肽破坏了上皮屏障(由zonulin介导),模拟了乳糜泻患者所见的“肠漏”。
动物实验
乳糜泻的体内动物模型通常使用NOD/DQ8转基因小鼠。这些小鼠通过腹腔注射含麸质佐剂的麸质使其对麸质致敏。致敏后,小鼠经口喂食含麸质饮食3-4周。随后处死小鼠,取出小肠进行组织学分析。十二指肠横切面用苏木精-伊红(H&E)染色。关键终点指标包括绒毛与隐窝比值(V/C比值)和每100个肠细胞中的上皮内淋巴细胞(IEL)数量。V/C比值降低和IEL数量增加(Marsh评分≥1)证实了肠病的发生,成功构建了该疾病模型。
药代性质 (ADME/PK)
小麦面筋是一种食品配料,而非药物;因此,传统的药代动力学方法并不适用。然而,人们对面筋肽的吸收情况进行了研究。免疫原性肽(例如33肽)对蛋白酶具有相对的抵抗力,摄入后可在人体血清和尿液中检测到。其主要排泄途径是粪便排泄。免疫原性肽在循环中的半衰期很短(几分钟到几小时),但它们引发的炎症反应可持续数周。面筋的理化特性是其具有内聚性和粘弹性的蛋白质性质,这可以增强面团的强度和耐搅拌性。它被用作低蛋白面包粉中的蛋白质补充剂。面筋是一种淡黄色粉末,不溶于水,但可溶于弱酸和弱碱。在阴凉干燥处储存可保持稳定。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
小麦面筋的毒性因人而异。对于普通人群而言,它是一种营养丰富的蛋白质。但对于乳糜泻患者(约占总人口的1%)来说,它是一种强效毒素,会引发自身免疫反应。摄入小麦面筋会导致肠道损伤,若不及时治疗,会增加罹患胃肠道恶性肿瘤(例如淋巴瘤)的风险。对于小麦过敏者,小麦面筋可能引发过敏性休克。由于小麦面筋并非急性毒物,因此其“急性毒性”(LD50)的概念并不适用。实验室对小麦面筋粉末的标准处理不会造成直接的化学危害,但它是一种潜在的过敏原和呼吸道致敏剂。大量处理小麦面筋时,应佩戴防尘口罩以避免吸入,因为吸入可能导致“面包师哮喘”。小麦面筋被归类为皮肤和眼睛刺激物。
参考文献

[1]. Physiopathology and Management of Gluten-Induced Celiac Disease, J Food Sci. 2017 Feb;82(2):270-277.

其他信息
小麦面筋并非药物,但却是食品科学和医学领域最重要的抗原之一。发现乳糜泻与面筋之间的关联是医学史上的里程碑,并由此催生了拯救生命的无麸质饮食(GFD)。乳糜泻的唯一治疗方法是终身戒除麸质。在研究中,纯化的小麦面筋是开发诊断测试(例如食品中面筋的酶联免疫吸附试验,ELISA)和药物研发(例如测试在面筋到达小肠前将其降解的口服酶疗法)的重要标准。目前,TAK-062(一种面筋酶)等药物的临床试验正在进行中。尽管小麦面筋是一种常见的食品成分,但它对易感人群的显著生物学效应使其成为药物干预的关键靶点。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C7H14CLNO2
分子量
179.644561290741
CAS号
8002-80-0
外观&性状
White to off-white solid powder
SMILES
Cl.O(CC)C(C1CNCC1)=O
别名
Gluten Source Wheat
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Note: Note: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气下),避免暴露在潮湿环境中。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 5.5667 mL 27.8334 mL 55.6669 mL
5 mM 1.1133 mL 5.5667 mL 11.1334 mL
10 mM 0.5567 mL 2.7833 mL 5.5667 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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