Rat Serum Albumin

目录号: V117258
大鼠血清白蛋白是一种来源于大鼠的血浆蛋白。
Rat Serum Albumin 产品类别: Biochemical Assay Reagents
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
大鼠血清白蛋白是一种来源于大鼠的血浆蛋白。血清白蛋白是一种多功能蛋白,具有卓越的配体结合能力,使其成为多种代谢物、药物、营养物质、金属和其他分子的运输分子。
大鼠血清白蛋白 (RSA) 是一种纯化的血浆蛋白,提取自健康大鼠(*Rattus norvegicus*)的血清。其分子量约为 69 kDa,是大鼠血浆中最丰富的蛋白质,占血清总蛋白含量的 50% 以上。RSA 是一种多功能蛋白,是血液胶体渗透压的主要调节因子,也是多种内源性和外源性配体的主要转运蛋白。RSA 可用作非反应性参考标准品、免疫测定(例如 ELISA)中的封闭剂、包被蛋白以及各种生物化学和药物研究应用中的校准品,尤其适用于药物-蛋白质相互作用的研究。
生物活性&实验参考方法
靶点
As a biological macromolecule, Rat Serum Albumin does not bind to a specific receptor to exert a pharmacological effect. Its primary role is physiological, maintaining oncotic pressure within the vascular compartment. However, it functions as a non-specific, high-capacity binding protein. By reversibly binding to a vast array of endogenous and exogenous compounds, it effectively acts as a transport vehicle for fatty acids, hormones, bilirubin, metal ions (Ca2+, Na+, K+), and a wide range of drugs. As a research tool, it is used as a "target" to study these passive, non-specific binding interactions, the results of which are vital for understanding drug distribution and pharmacokinetics. Its single tryptophan residue also makes it useful in fluorescence spectroscopy studies.
体外研究 (In Vitro)
大鼠血清白蛋白的体外活性并非由其催化或细胞信号传导效应决定,而是由其配体结合能力决定。这可以通过血浆蛋白结合试验进行测定。利用平衡透析或超滤等方法,可以定量测定受试药物与大鼠血清白蛋白的结合程度。在细胞培养中,大鼠血清白蛋白用作惰性蛋白补充剂,浓度为0.1-5.0% (w/v)。它不会引起细胞活化或死亡。当用作酶联免疫吸附试验(ELISA)中的阻断剂时,它可以减少非特异性结合,从而提高检测的信噪比,并且对细胞活力或功能没有影响。
体内研究 (In Vivo)
大鼠血清白蛋白本身在体内不具有治疗作用。作为参考标准和离体分析工具,它并非用于诱导生物反应。在研究环境中,如果静脉注射给大鼠,大鼠血清白蛋白可作为同源血浆扩容剂,短暂升高血浆胶体渗透压,但标准研究中并不用于此目的。它通常用于制备大鼠血清样本中总蛋白定量所需的校准曲线,例如在毒理学研究中,它可作为Bradford或BCA蛋白测定的标准品。
酶活实验
体外蛋白结合试验(平衡透析法):使用带有两个腔室的聚四氟乙烯透析池,两个腔室之间由半透膜(截留分子量 10 kDa)隔开。一个腔室填充大鼠血清白蛋白溶液(5 uM,溶于 PBS),另一个腔室填充已知浓度的待测药物溶液。在 37℃ 下平衡 4-6 小时后,分析两个腔室中的样品(例如,通过 HPLC-UV 检测),以确定游离药物浓度。结合药物分数由两个腔室的差值计算得出。结合常数 (Ka) 通过非线性回归确定。
细胞实验
体外细胞培养和封闭实验:进行ELISA实验时,将抗原包被于96孔板,4℃过夜。然后加入200 uL 1-5%大鼠血清白蛋白(RSA)PBS溶液,37℃封闭1小时。洗涤后加入一抗。再次洗涤后,加入HRP标记的二抗和底物。在450 nm波长处读取吸光度值。RSA能有效封闭塑料上的非特异性结合位点,降低背景信号,从而提高灵敏度,优于BSA封闭的对照组。
动物实验
体内蛋白质定量标准品的一般方案:用于大鼠血浆蛋白测定的标准品为大鼠血清白蛋白(RSA),用PBS缓冲液溶解,配制标准曲线(0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL)。取少量(例如10 μL)标准品和待测血浆样品加入96孔板中。加入BCA(二喹啉甲酸)试剂,于37℃孵育30分钟,并在562 nm处测定吸光度。根据RSA配制的标准曲线,绘制吸光度值,即可确定待测样品的蛋白浓度。该方案用于定量总蛋白,以便后续实验(例如Western blotting、ELISA)进行标准化。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种纯化的内源性蛋白质,大鼠血清白蛋白的药代动力学特征已得到充分阐明。静脉注射给大鼠后,由于其分子量较大(69 kDa)且受FcRn介导的再循环保护,其血浆半衰期非常长(约5-7天)。由于其主要分布于血管内,因此分布容积较小(约0.1 L/kg)。在研究中,通常不采用口服或其他给药途径;若使用,一般作为体外标准品。该蛋白在血清中可稳定存在数天,且不经肝脏代谢;而是通过全身蛋白酶缓慢降解或通过少量蛋白水解代谢排出体外。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
大鼠血清白蛋白是一种生物相容性极佳的蛋白质,作为标准实验室试剂使用时被认为无毒。由于它是大鼠血浆的天然成分,因此在体外实验中不会引起过敏反应或其他不良反应。即使在极少数情况下需要体内给药,预计也不会引起除潜在过敏反应以外的任何毒性。作为参考标准,它不属于危险物质。遵循标准的生物材料处理实验室安全规程,包括佩戴手套和实验服,即可安全使用。目前尚未发现其具有遗传毒性,因此作为分析标准品使用时不存在任何特定的毒理学问题。
参考文献

[1]. Structural and immunologic characterization of bovine, horse, and rabbit serum albumins. Mol Immunol. 2012 Oct;52(3-4):174-82.

其他信息
大鼠血清白蛋白(RSA)是由约585个氨基酸组成的一条单链多肽,含有一个色氨酸残基,具有高荧光量子产率,常用于生物物理研究中探测构象变化和配体结合。该蛋白在较宽的pH范围内稳定,可溶于水和PBS缓冲液。作为参考标准品,RSA以白色冻干粉末的形式提供,可溶于水或缓冲液。在生理条件下,RSA带净负电荷。由于它是血浆中的主要蛋白,其测定是兽医学中评估肝肾健康的常用临床化学检测方法。在研究中,RSA的结构与人血清白蛋白(HSA)高度同源[1L6],使其成为大鼠模型临床前研究的相关模型蛋白。然而,由于它是纯化的血液制品,因此被认为具有潜在的生物危害性,应谨慎处理。它是通过采集健康大鼠的血液,分离血清,然后通过盐沉淀(例如硫酸铵)、离子交换和亲和色谱等多步骤生化纯化过程分离白蛋白组分而制成的。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
相关CAS号
BSA Standard Solution (5mg/mL)
外观&性状
Colorless to light yellow liquid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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