| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Chicken ovomucoid is a competitive and highly specific inhibitor of the pancreatic serine protease, trypsin. It accomplishes this by binding to the active site of trypsin with high affinity. The third domain of the ovomucoid protein is primarily responsible for this strong inhibitory activity, which involves the formation of a stable, stoichiometric 1:1 complex between the inhibitor and the enzyme, effectively blocking its catalytic activity. Because its mechanism is competitive, it directly binds to the same site as the trypsin's natural substrate. Its role as a potent allergen is mediated by its recognition and cross-linking by specific Immunoglobulin E (IgE) antibodies on the surface of mast cells and basophils, triggering an allergic cascade.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明,鸡卵黏蛋白的主要活性是抑制胰蛋白酶的酶活性。在胰蛋白酶活性测定中,卵黏蛋白可阻断显色底物(例如Nα-苯甲酰基-DL-精氨酸4-硝基苯胺 (BAPNA))的裂解。其对胰蛋白酶的抑制IC₅0值在纳摩尔范围内(约1-10 nM)。在细胞实验中,卵黏蛋白用于刺激过敏供体的免疫细胞(例如肥大细胞或嗜碱性粒细胞)。它可诱导这些细胞释放组胺和其他介质(例如β-己糖胺酶),其EC₅0值通常在10-100 ng/mL范围内。在此浓度下,卵黏蛋白不具有细胞毒性,且对其他蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶或凝血酶)无活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
作为一种纯化的食品过敏原和研究试剂,鸡卵黏蛋白不具有体内治疗活性。当引入致敏机体(例如,在鸡蛋过敏小鼠模型中)时,它能强烈诱发过敏反应。在主动性全身性过敏反应模型中,向致敏小鼠注射卵黏蛋白会导致体温下降、血清组胺和肥大细胞蛋白酶-1 (mMCP-1) 水平升高,以及其他严重全身性过敏反应的症状。在被动性皮肤过敏反应 (PCA) 模型中,皮内注射卵黏蛋白后静脉注射抗卵黏蛋白 IgE 抗体会导致局部血管渗漏(可通过伊文思蓝染料外渗进行测量)。这些作用纯粹是病理性的,不具有治疗作用。
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| 酶活实验 |
体外胰蛋白酶抑制试验:使用96孔板。将重组胰蛋白酶(10 ng/孔)与浓度递增的鸡卵黏蛋白(0.1-100 nM)在37℃下预孵育10分钟。然后加入显色底物Nα-苯甲酰基-DL-精氨酸4-硝基苯胺(BAPNA,100 uM)。通过测量405 nm处的吸光度监测反应,持续30分钟。根据抑制曲线计算半数抑制浓度(IC₅0)。卵黏蛋白以剂量依赖的方式抑制胰蛋白酶活性,IC₅0值在低纳摩尔范围内(例如,1-5 nM)。
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| 细胞实验 |
体外人嗜碱性粒细胞活化试验(IgE介导的反应):从鸡蛋过敏供体中分离外周血单核细胞(PBMC),并重悬。将细胞与浓度递增的鸡卵黏蛋白(0.1-1000 ng/mL)在37℃下孵育1小时。使用CD63和CD203c表面标志物,通过流式细胞术评估嗜碱性粒细胞的活化情况。嗜碱性粒细胞活化的EC₅0值通常在10-100 ng/mL范围内,具体数值取决于供体的致敏水平。阳性对照为抗人IgE抗体。该试验是体外诊断IgE介导的食物过敏的标准方法。
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| 动物实验 |
被动皮肤过敏反应 (PCA) 模型的一般体内动物实验方案:将 20 μL 抗卵黏蛋白 IgE 抗体(10 μg/mL)皮内注射到雌性 BALB/c 小鼠背部的不同部位。24 小时后,静脉注射 500 μg 鸡卵黏蛋白和 1% 伊文思蓝染料的生理盐水混合物。30 分钟后,处死小鼠。取出皮肤,用甲酰胺从注射部位提取渗出的伊文思蓝染料。在 620 nm 波长处测量提取物的吸光度,以量化染料渗漏量。该模型证明了卵黏蛋白能够在体内触发肥大细胞依赖性过敏反应。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
鸡卵黏蛋白是一种高度稳定的糖蛋白,通常不作为药物进行全身给药,因此其体内药代动力学并非研究重点。在研究模型中,静脉注射鸡卵黏蛋白可诱导过敏反应,其迅速分布于整个血管系统。由于单核吞噬细胞系统(MPS)的快速清除和蛋白水解作用,其血浆半衰期仅为几分钟至几小时。作为一种蛋白质,鸡卵黏蛋白不能被胃肠道完整吸收,这是它作为食物过敏原而非全身毒素发挥作用的关键原因。在研究中,鸡卵黏蛋白的清除主要通过代谢途径。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
鸡卵黏蛋白本身并非药物,也不具有传统意义上的毒性;其主要致病作用是诱导已致敏个体发生IgE介导的过敏反应。作为一种过敏原,它能强效诱发从轻微的口腔过敏综合征到危及生命的全身性过敏反应等多种疾病。对于未致敏个体或实验室用途,其急性毒性较低,且未发现遗传毒性或致癌性。作为实验室蛋白酶抑制剂,其使用方法与标准实验室化学品相同。纯化后的鸡卵黏蛋白对非过敏个体而言既不刺激皮肤,也不致敏。在杂质鉴定方面,它不被认为是具有遗传毒性的杂质。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
鸡卵黏蛋白是一种耐热的186个氨基酸的糖蛋白,具有三个串联的Kazal型结构域,每个结构域均由三个结构域内二硫键稳定。第三个结构域是主要的、也是最有效的胰蛋白酶抑制剂,其解离常数(Kd)在皮摩尔到低纳摩尔范围内。该分子高度糖基化,这有助于其稳定性和致敏性。作为一种主要的鸡蛋过敏原,鸡蛋过敏患者体内的大多数IgE抗体针对的是卵黏蛋白,而不是其他蛋清蛋白,如卵清蛋白和卵转铁蛋白。因此,它被广泛用于过敏研究,例如表位定位和诊断测试的开发。在实验室中,它被用作培养基的添加剂,以抑制贴壁细胞传代过程中胰蛋白酶的活性,防止细胞脱落和损伤。它以冻干粉末的形式储存在-20℃或更低的温度下。其高热稳定性意味着即使在 90°C 加热 30 分钟后,它仍能保持其胰蛋白酶抑制活性。
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow liquid
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| 别名 |
ovale mucins
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。