| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Chem-0199 specifically targets AEBP1 (Adipocyte Enhancer-Binding Protein 1), a carboxypeptidase that is overexpressed in cancer-associated fibroblasts (CAFs). AEBP1 binds to CKAP4 (Cytoskeleton-associated protein 4) on CAFs, activating the AKT/PD-L1 signaling pathway and driving T cell dysfunction and immune evasion. Chem-0199 disrupts the AEBP1-CKAP4 interaction, thereby inhibiting downstream AKT phosphorylation and PD-L1 expression, restoring T cell-mediated antitumor immunity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
Chem-0199 可抑制人/小鼠癌相关成纤维细胞 (hCAFs/mCAFs) 中 AEBP1 和 CKAP4 的结合[1]。Chem-0199 (10-100 μM) 可抑制 mCAFs 中 Akt 的磷酸化 (p-Akt) 并下调 PD-L1 的表达[1]。Chem-0199 (10-100 μM，48 h) 可显著增加小鼠脾脏 T 细胞中 IFN-γ+ 和 TNF-α+CD8+ T 细胞的比例，并恢复 T 细胞的细胞毒性[1]。Chem-0199 (1-20 μM，72 h) 对多种肿瘤细胞 (MC38、CT26、B16-F10) 的增殖无显著抑制作用[1]。
体外实验表明，Chem-0199 在 10-100 microM 的浓度范围内可抑制人源和鼠源癌相关成纤维细胞 (hCAFs/mCAFs) 中 AEBP1 与 CKAP4 的结合。它还能抑制 Akt 磷酸化 (p-Akt) 并下调 CAFs 中 PD-L1 的表达。该化合物可增强共培养 T 细胞的细胞毒活性，从而提高肿瘤细胞的杀伤率。其下调 PD-L1 表达的 EC50 值在低微摩尔范围内。MTT 实验表明，在这些浓度下，该化合物对 CAFs 未表现出明显的细胞毒性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Chem-0199（3-30 mg/kg，腹腔注射）可抑制野生型 C57BL/6 小鼠 MC38 肿瘤的生长[1]。
在体内，Chem-0199 在同源小鼠肿瘤模型中显示出疗效。在携带 MC38 结肠癌的小鼠中，Chem-0199 治疗可显著抑制肿瘤生长，并通过增加 CD8+ T 细胞浸润和活化，同时降低肿瘤微环境中 PD-L1 的表达，增强抗肿瘤免疫力。该化合物与免疫检查点阻断疗法（抗 PD-1/PD-L1 疗法）具有协同作用，可改善肿瘤消退并延长生存期。基因和药理学上的 AEBP1 抑制均显示，与检查点抑制剂联合使用时疗效增强。 |
| 酶活实验 |
体外AEBP1-CKAP4结合抑制实验：将重组AEBP1蛋白（50 nM）和CKAP4蛋白（50 nM）与浓度为0.1-100 uM的Chem-0199在结合缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 7.5，150 mM NaCl，0.1% Tween-20）中于25℃共孵育1小时。用抗AEBP1抗体对蛋白复合物进行免疫沉淀，并通过Western blot检测结合的CKAP4。计算抑制该相互作用的IC50值。或者，也可以使用生物发光共振能量转移（BRET）或AlphaScreen检测进行高通量筛选。
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| 细胞实验 |
基于细胞的免疫调节分析：将人或小鼠的癌相关成纤维细胞 (CAF) 与 CD8+ T 细胞以 1:5 的比例在 96 孔板中共培养。共培养物用浓度为 1-100 uM 的 Chem-0199 处理 24-48 小时。通过 ELISA 检测上清液中 IFNγ 和颗粒酶 B 的水平来评估 T 细胞活化。通过流式细胞术或蛋白质印迹法检测 CAF 的 PD-L1 表达。通过向共培养物中加入标记的癌细胞（例如 MC38-luc）并检测荧光素酶活性来评估肿瘤细胞杀伤。计算 T 细胞活化的 EC50 值。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 野生型 C57BL/6 小鼠，MC38 肿瘤 [1]
剂量： 3、10 和 30 mg/kg 给药途径： 腹腔注射 实验结果： 肿瘤体积缩小。与抗 CTLA-4 抗体联用可进一步增强肿瘤抑制作用并延长小鼠生存期。IFN-γ+ 和 TNF-α+CD8+ T 细胞比例增加。血常规（白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板）及心脏、肝脏、肺、肾脏和肠道组织的 H&E 染色均未见异常。 动物肿瘤疗效研究：雌性C57BL/6小鼠（每组n=8-10）皮下接种MC38结肠癌细胞（5×10⁵个细胞）。当肿瘤体积达到约100 mm³时，小鼠每日灌胃给予Chem-0199，剂量分别为10、30或60 mg/kg，连续14天。联合用药组小鼠接受Chem-0199联合抗PD-1抗体（10 mg/kg，腹腔注射，每3天一次）。每2-3天测量一次肿瘤体积。研究结束时，收集肿瘤组织进行流式细胞术（CD4、CD8、FoxP3、PD-1、PD-L1）、免疫组织化学（CD8、颗粒酶B）和细胞因子分析（IFNγ、TNFα、IL-10）。在另一组小鼠中监测生存情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学特征：Chem-0199 在啮齿动物中具有中等至良好的口服生物利用度（>40%）。达峰时间（Tmax）约为 1-2 小时，在 10-60 mg/kg 剂量范围内，血药浓度峰值（Cmax）与剂量呈正比。末端半衰期（t½）为 4-6 小时。血浆蛋白结合率估计约为 90%。分布容积中等（约 2 L/kg）。该化合物经 CYP450 酶代谢，主要通过胆汁途径排泄。药代动力学参数支持每日一次给药方案用于疗效研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒理学：在小鼠进行的为期14天的重复给药毒性研究中，Chem-0199在剂量高达60 mg/kg/天时耐受性良好。在更高剂量（≥100 mg/kg）下，观察到轻微的胃肠道不适和体重减轻。无观察到不良反应剂量（NOAEL）约为60 mg/kg/天。计算机模拟遗传毒性评估（DEREK）未发现结构警示。Ames试验结果为阴性。在10 μM浓度下未观察到hERG抑制。尚未发现明显的靶器官毒性，但临床开发仍需进行全面的毒理学研究。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Chem-0199 又称 AEBP1 抑制剂，是一种研究级小分子化合物。储存：密封保存于 -20℃，避光。溶于 DMSO（浓度≥10 mg/mL）。用于癌症研究、肿瘤免疫学以及癌症相关成纤维细胞 (CAF) 生物学研究。该化合物尤其适用于研究 AEBP1 在 T 细胞功能障碍和免疫检查点疗法耐药性中的作用。不可用于人体治疗。
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| 分子式 |
C13H18N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
234.29
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.2682 mL | 21.3411 mL | 42.6821 mL | |
| 5 mM | 0.8536 mL | 4.2682 mL | 8.5364 mL | |
| 10 mM | 0.4268 mL | 2.1341 mL | 4.2682 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
(2R,3R,4R,5R)-2-((Bis(4-methoxyphenyl)(phenyl)methoxy)methyl)-5-(2,4-dioxo-3,4-dihydropyrimidin-1(2H)-yl)-4-fluorotetrahydrofuran-3-yl isopropyl diisopropylphosphoramidite
DMT-2'-O-propynyl-G(Ac)-CE-phosphoramidite
Ulicyclamide
Methacrylate C6 phosphoramidite
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