| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ETI60 selectively inhibits endosomal Toll-like receptors TLR7 and TLR9 by binding to their nucleoside-binding Site I. TLR7 and TLR9 recognize ssRNA and CpG DNA, respectively, and play key roles in the pathogenesis of autoimmune diseases such as SLE and psoriasis. By blocking TLR7/9 activation, ETI60 suppresses the production of pro-inflammatory cytokines (e.g., type I IFNs, TNFalpha, IL-6) and reduces immune complex-mediated inflammation. It does not affect cell surface TLRs, providing selectivity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
ETI60（0-200 μM，4-24 h）能以剂量依赖的方式有效抑制小鼠巨噬细胞（RAW 264.7）和人B淋巴母细胞（Daudi）细胞系中由TLR激动剂（例如，TLR7激动剂咪喹莫特（IMQ）和TLR9激动剂ODN2395）诱导的TNF-α的产生，且不产生细胞毒性作用[1]。ETI60（24 h）对TLR3、TLR7和TLR9的抑制IC50值介于20至300 nM之间，对TLR8的抑制IC50值约为2 μM，并且在31.2 nM至10 μM的浓度范围内，以浓度依赖的方式抑制TLR3、TLR7和TLR8的活性[1]。 ETI60（5-10 μM，20 分钟至 8 小时）抑制了 IMQ 或 ODN2395 诱导的 RAW 264.7 细胞中 MAPK（p-ERK、p-JNK 和 p-p38）的磷酸化、NF-κB p65 亚基的核转位、Iκ-Bα 的降解以及 IRF7 的表达 [1]。ETI60（10 μM，2-4 小时）减弱了 IMQ 诱导的多种炎症相关基因的上调，包括 IL1-β、CXCL2、IL18RAP、TNF、PDCD1、NLRP3、NFKBIZ、CCL3、CCL4、KDM6B、ZC3H12A 和 PTGS2 [1]。
体外实验表明，ETI60在细胞和生物物理实验中均表现出纳摩尔级的活性，能有效抑制内体TLR介导的促炎信号通路。其对TLR7和TLR9的IC50值分别为0.68 microM和0.12 microM。该化合物能够调节炎症相关基因的表达，降低TLR7/9刺激的免疫细胞（例如外周血单核细胞、浆细胞样树突状细胞、巨噬细胞）中IFNα、TNFα、IL-6和其他促炎介质的水平。MTT和LDH释放实验表明，在浓度高达10 microM时，该化合物未显示出明显的细胞毒性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
ETI60（60 mg/kg，口服，从第2天到第5天，每日一次）改善了咪喹莫特（IMQ）诱导的电极银屑病[1]。ETI60（60 mg/kg，口服，从第2天到第9天，每日一次）改善了白细胞介素-23（IL-23）诱导的电极银屑病[1]。ETI60（30 mg/kg，口服，每日一次，持续39天）有效改善了系统性红斑狼疮（SLE）模型中的症状[1]。
体内实验表明，ETI60 具有口服活性，能有效改善银屑病和系统性红斑狼疮 (SLE) 小鼠模型的症状。在 SLE 小鼠模型（例如 MRL/lpr 小鼠）中，每日一次口服 30 mg/kg 的 ETI60，持续 39 天，可降低蛋白尿、血清抗双链 DNA 自身抗体水平和肾脏免疫复合物沉积。在咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型中，ETI60 可减轻皮肤炎症、鳞屑和表皮增厚。该化合物还能降低受累组织中 Th1/Th17 细胞因子的水平。 |
| 酶活实验 |
体外TLR抑制实验：将稳定共转染人TLR7或TLR9和NF-κB-荧光素酶报告基因的HEK293细胞接种于96孔板（5×10⁴/孔）。用0.01-10 uM的ETI60处理细胞1小时，然后用TLR7激动剂（R848，1 ug/mL）或TLR9激动剂（CpG ODN 2006，2 uM）刺激。刺激6小时后，使用荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。IC50值由剂量-反应曲线计算得出。通过平行检测针对表面TLR（TLR1/2、TLR2/6、TLR4、TLR5）的抑制作用来验证特异性。
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| 细胞实验 |
细胞活力检测[1]
细胞类型： 小鼠 RAW 264.7 细胞和人 Daudi 细胞 测试浓度： 1.6-200 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 在浓度高达 10 μM 时，对小鼠 RAW 264.7 细胞和人 Daudi 细胞均未表现出细胞毒性。 Western blot 分析[1] 细胞类型： RAW 264.7 细胞 测试浓度： 5 和 10 μM 孵育时间： 20、30、40 和 50 分钟，6 和 8 小时 实验结果：p-ERK、p-JNK 和 p-p38 水平降低。抑制 NF-κB p65 亚基的核转位。下调 IRF7 表达并阻止 Iκ-Bα 的降解。 基于细胞的细胞因子检测：从健康供体中分离人外周血单核细胞 (PBMC) 或浆细胞样树突状细胞 (pDC)。将细胞接种于 96 孔板（2×10⁵/孔），并用浓度为 0.01-10 uM 的 ETI60 预孵育 2 小时。然后用 TLR7 激动剂（R848，1 ug/mL）或 TLR9 激动剂（CpG ODN 2006，2 uM）刺激细胞 24 小时。收集培养上清液，并通过 ELISA 检测 IFNα 水平。计算 IFNα 抑制的 IC50 值，通常在低微摩尔范围内。通过 MTT 法评估细胞活力，以确保观察到的效应并非由细胞毒性引起。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性MRL/MpJ-Faslpr/J狼疮易感小鼠（14周龄）[1]
剂量：30 mg/kg 给药途径：口服，每日一次，持续39天 实验结果：可预防体重增加或减轻，并降低淋巴结重量。与溶媒组和羟氯喹组（60 mg/kg，口服，每日一次，持续39天）相比，脱发和皮疹均有所减轻。补体C3水平升高，表明疾病活动性降低，免疫功能恢复。与羟氯喹组相比，系统性红斑狼疮（SLE）相关血清学标志物，如抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体和肾脏IgG水平降低。在HCQ剂量的一半下，SLE症状显著减轻，表明其具有高效性。 动物/疾病模型： 雌性C57BL/6J小鼠（6周龄），剃毛后4天，每日局部涂抹Aldara乳膏（IMQ，62.5 mg/cm²）诱导银屑病[1] 剂量： 60 mg/kg 给药途径： 口服，每日一次，从第2天到第5天 实验结果： 显著降低了银屑病面积和严重程度指数（PASI）评分、表皮棘层增厚、真皮厚度和角质形成细胞增殖。抑制IL-17A和IL-23的表达以及真皮炎症细胞浸润。 动物/疾病模型：雌性C57BL/6J小鼠（6周龄）通过耳周皮内注射重组鼠IL-23（500 ng）诱导银屑病，每日一次，持续8天[1] 剂量：60 mg/kg 给药途径：口服，每日一次，从第2天至第9天 实验结果：疾病症状的改善与阳性对照组（抗IL-17A抗体，30 mg/kg，腹腔注射，分别于第2、5和8天给药）相当或更优，且体重无显著差异。耳部和表皮厚度、CD68表达以及Ki-67角质形成细胞增殖均显著降低。 SLE模型动物实验方案：雌性MRL/lpr小鼠（每组10-12只）从12周龄开始，每天灌胃一次，连续39天，分别给予10、30或60 mg/kg的ETI60。对照组分别给予赋形剂（0.5%甲基纤维素）或泼尼松龙（10 mg/kg，口服）。实验终点包括：蛋白尿（每周使用尿液试纸检测）、血清抗dsDNA抗体水平（ELISA法）、肾脏组织病理学（HE染色、过碘酸-雪夫染色检测肾小球肾炎）、肾脏免疫复合物沉积（IgG/C3免疫荧光法）以及血清细胞因子水平（IFNα、TNFα、IL-6、IFNγ）。同时评估生存曲线。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学特征：ETI60 在啮齿动物中具有良好的口服生物利用度（>50%）。达峰时间（Tmax）约为 1-2 小时，在 10-60 mg/kg 剂量范围内，血药浓度峰值（Cmax）与剂量呈正比。末端半衰期（t½）为 4-6 小时。分布容积中等（约 2-3 L/kg）。血浆蛋白结合率估计约为 90%。主要通过肝脏 CYP450 酶代谢，并通过胆汁和肾脏途径排泄。药代动力学特征支持每日一次口服给药方案用于疗效研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒理学：在一项为期28天的小鼠重复给药毒性研究中，ETI60在剂量高达60 mg/kg/天时耐受性良好，未观察到不良反应。在较高剂量（≥100 mg/kg/天）下，观察到轻度肝毒性（ALT、AST升高）和胃肠道紊乱。未观察到不良反应剂量（NOAEL）估计为60 mg/kg/天。计算机模拟遗传毒性评估（DEREK）未发现结构警示。Ames试验（5个品系，+/-S9）结果为阴性。在10 μM浓度下未观察到hERG抑制。未见免疫毒性或骨髓抑制的报道。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ETI60 又称 Toll 样受体抑制剂，是一种研究级化合物。储存条件：-20℃（粉末，可保存长达 3 年；溶液，可保存 6 个月）。可溶于 DMSO（≥10 mg/mL）。用于自身免疫性疾病研究，特别是系统性红斑狼疮 (SLE)、银屑病和其他 TLR7/9 驱动的炎症性疾病。也用于内体 TLR 信号传导机制的研究。不可用于人体治疗。
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| 分子式 |
C21H28N4O
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|---|---|
| 分子量 |
352.47
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| CAS号 |
2773475-11-7
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8371 mL | 14.1856 mL | 28.3712 mL | |
| 5 mM | 0.5674 mL | 2.8371 mL | 5.6742 mL | |
| 10 mM | 0.2837 mL | 1.4186 mL | 2.8371 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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