| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MDOLL-0286 specifically targets ARH3 (ADP-ribosylhydrolase 3, also known as poly(ADP-ribose) glycohydrolase). ARH3 is a key enzyme that reverses poly-ADP-ribosylation at sites of DNA damage by catalyzing the hydrolysis of poly-ADP-ribose (PAR) chains, particularly removing the last proximal mono-ADP-ribose from serine residues. Inhibition of ARH3 leads to the accumulation of PAR chains on target proteins and affects the DNA damage response. The compound is selective against the closely related homologue ARH1.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，MDOLL-0286 能以 2.3 microM 的 IC50 值抑制 ARH3 的聚 ADP-核糖水解活性（基于 FRET 竞争性抑制实验）。该化合物不能有效抑制天然蛋白质底物上的单 ADP-核糖基化水解，提示其对聚 ADP-核糖基化链（PAR）的选择性高于单 ADP-核糖（MAR）。MDOLL-0286 能抑制细胞底物上的 ARH3 活性，并抑制 DNA 损伤反应通路。MTT 实验表明，该化合物在浓度高达 10 microM 时，对癌细胞系未显示出明显的细胞毒性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，MDOLL-0286 已在 DNA 损伤反应模型中进行了研究。ARH3 抑制剂有望通过阻止 PAR 链的周转并延长 DNA 损伤信号，使癌细胞对 DNA 损伤剂（例如 PARP 抑制剂和化疗药物，如替莫唑胺）更加敏感。该化合物在癌症联合治疗中显示出潜力，尤其适用于 BRCA 突变或同源重组缺陷型肿瘤。目前正在进行进一步的体内疗效研究，但现有数据支持其作为化学探针的应用价值。
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| 酶活实验 |
非细胞ARH3抑制实验：采用基于FRET的竞争性实验测定ARH3活性。将重组人ARH3（10 nM）与浓度为0.01-100 uM的MDOLL-0286在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、50 mM KCl、2 mM MgCl2、0.1 mg/mL BSA、1 mM DTT）中孵育。加入荧光标记的PAR底物（5 uM）启动反应，并在25℃下孵育30分钟。终止反应后，测量荧光强度（激发/发射波长=485/535 nm）。根据剂量-反应曲线计算IC50值。使用类似的ARH1酶实验平行验证ARH1选择性。
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| 细胞实验 |
基于细胞的DNA损伤检测：将HeLa或U2OS细胞接种于96孔板（1×10⁴/孔），并用0.1-50 uM的MDOLL-0286处理1-4小时，随后用DNA损伤剂依托泊苷（10 uM）或H2O2（100 uM）处理2小时。使用抗PAR抗体（克隆10H）通过免疫荧光法评估PAR链的积累。定量分析核内PAR染色强度。通过Western blot分析PAR水平来确认ARH3靶点的结合。测定PAR积累的EC50值。使用CellTiter-Glo试剂盒测定细胞毒性。
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| 动物实验 |
动物肿瘤疗效研究（化疗增敏）：将携带 BRCA 突变异种移植瘤（例如 MDA-MB-436 乳腺癌）的雌性 BALB/c 裸鼠（每组 n=8-10）分别接受 MDOLL-0286（10-50 mg/kg）腹腔注射，每日一次，连续 14 天，单独使用或与 PARP 抑制剂奥拉帕尼（50 mg/kg，腹腔注射，每周 5 天）联合使用。每 3 天测量一次肿瘤体积。在研究终点，切除肿瘤组织，用于分析 PAR 积累（免疫组织化学）、细胞凋亡（cleaved caspase-3）和 DNA 损伤标志物（γH2AX）。使用 CalcuSyn 软件计算联合指数。监测生存情况。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学特征：MDOLL-0286（分子量 299.37）口服生物利用度中等（30-50%），在啮齿动物体内达峰时间（Tmax）为 1-2 小时。末端半衰期（t½）为 2-4 小时。分布容积约为 2 L/kg。血浆蛋白结合率估计约为 85%。主要经肝脏 CYP450 酶代谢，并通过胆汁途径排泄。需要进一步的药代动力学表征；目前关于该研究化合物的数据有限。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒理学：在为期14天的小鼠探索性毒性研究中，MDOLL-0286在剂量高达30 mg/kg/天时耐受性良好，未观察到显著不良反应。在较高剂量（≥50 mg/kg/天）下，观察到轻度肝毒性（ALT、AST升高）和活性降低。估计无观察到不良反应剂量（NOAEL）为30 mg/kg/天。计算机模拟遗传毒性评估（DEREK）未发现结构警示。Ames试验（5个品系，+/-S9）结果为阴性。由于ARH1可以部分补偿，预计ARH3抑制不会对正常细胞造成显著毒性。然而，仍需进行长期毒理学研究。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MDOLL-0286 又名化合物 27，是一种选择性 ARH3 抑制剂。储存：密封保存于 -20℃，避光。纯度：99.66%。溶于 DMSO（≥10 mg/mL）。用于癌症研究，特别是研究 DNA 损伤反应通路、PAR 代谢以及 ARH3 在癌细胞存活中的作用。该化合物也是一种有价值的化学探针，可用于研究 ARH1 和 ARH3 功能差异。不可用于人体治疗。
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| 分子式 |
C16H21N5O
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|---|---|
| 分子量 |
299.37
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~1 mg/mL (~3.34 mM; with sonication (<60°C))
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3403 mL | 16.7017 mL | 33.4035 mL | |
| 5 mM | 0.6681 mL | 3.3403 mL | 6.6807 mL | |
| 10 mM | 0.3340 mL | 1.6702 mL | 3.3403 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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