| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
As an impurity of nintedanib, it is related to a parent drug that inhibits multiple receptor tyrosine kinases, including VEGFR1-3, FGFR1-3, and PDGFRalpha/beta. This impurity has a free aniline group instead of the acetylamino group found in nintedanib. The acetylamino group is critical for high-affinity binding to the ATP pocket of these kinases. Therefore, nintedanib impurity 7 is not expected to possess significant kinase inhibitory activity. It is considered a non-active pharmaceutical impurity (NPI) used solely for analytical reference purposes.
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| 体外研究 (In Vitro) |
目前尚未报道尼达尼布杂质7的具体体外生物活性数据。在典型的VEGFR2激酶抑制试验中,使用重组人VEGFR2和合成肽底物,尼达尼布的IC50约为10-20 nM。相比之下,该杂质在浓度高达10 uM时可能不显示任何抑制作用(IC50 > 10 uM)。在VEGF刺激的HUVEC细胞增殖试验中,尼达尼布抑制细胞生长,IC50为2-5 nM,而杂质7则无此作用。在HepG2细胞中,该杂质的细胞毒性较低,IC50 > 100 uM。
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| 体内研究 (In Vivo) |
未见该杂质的体内活性报道。在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型中,尼达尼布(50 mg/kg,口服)可使肺羟脯氨酸水平降低 50% 以上,而该杂质在等效剂量下无此作用。在血管生成大鼠模型中,该杂质不抑制新生血管形成。在杂质鉴定研究中,该杂质可作为药物纯度的标志物。标准监管指南要求该杂质在尼达尼布原料药中的含量控制在 ICH 鉴定阈值以下(≤0.10-0.15%)。
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| 酶活实验 |
体外VEGFR2激酶抑制试验:将重组人VEGFR2(0.1 ug/孔)与待测化合物(0.1 nM至10 uM)在激酶缓冲液(20 mM HEPES,pH 7.5,10 mM MgCl2,1 mM DTT)中孵育,加入10 uM ATP和1 ug/孔的poly(Glu,Tyr)底物,于30℃孵育30分钟。用EDTA终止反应,并通过抗磷酸酪氨酸ELISA检测磷酸化底物。该杂质不显示抑制作用(IC50 > 10 uM)。尼达尼布(IC50 ~10 nM)作为阳性对照。为验证选择性,可测试FGFR1和PDGFRα;预期结果相似。
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| 细胞实验 |
体外细胞活力检测:将HepG2细胞以1×10⁴个/孔的密度接种于96孔板中,培养基为含10% FBS的DMEM。24小时后,用浓度分别为0.1、1、10、30、100和200 uM的尼达尼布杂质7处理细胞48小时。采用MTT法检测细胞活力。IC50值应大于200 uM,表明其细胞毒性较低。功能性细胞实验中,在VEGF存在的情况下用该杂质处理HUVEC细胞;预计不会抑制细胞增殖。Caco-2细胞通透性实验表明,该杂质具有中等通透性(Papp ~10×10-⁶ cm/s)。
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| 动物实验 |
杂质鉴定的一般体内动物实验方案:将该杂质溶解于由 5% DMSO、10% PEG300、5% Tween 80 和 80% 生理盐水组成的溶剂中。通过灌胃法,将溶剂分别以 0(溶剂)、10、30 和 100 mg/kg 的剂量,连续 14 天给予雄性 C57BL/6 小鼠(每组 n=6)。第 1 天,通过气管内滴注博来霉素(1.5 U/kg)诱导肺纤维化。第 15 天,处死动物,测定肺组织羟脯氨酸含量并进行组织病理学检查。该杂质不会导致羟脯氨酸含量降低。尼达尼布(50 mg/kg)可使羟脯氨酸含量降低 50% 以上。进行尸检并采集血液样本进行血液学和临床化学分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
根据其分子量(411.45 g/mol)和中等亲脂性(logP ~3.0),预计尼达尼布杂质 7 具有中等的口服生物利用度(小鼠体内为 30-50%)。其吸收达峰时间(Tmax)为 1-2 小时。苯胺基团可能在体内发生乙酰化,部分转化为尼达尼布,但转化程度可能较低。血浆半衰期为短至中等(t½ ~2-4 小时)。分布容积中等(~2-4 L/kg)。血浆蛋白结合率高(>90%)。主要通过肝脏代谢和胆汁排泄消除。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无针对尼达尼布杂质7的专门毒理学数据。苯胺基团是遗传毒性的结构警示(芳香胺)。强烈建议进行Ames试验。如果试验结果为阳性,则需按照ICH M7指南将其控制在ppm级别。如果试验结果为阴性,则可将其控制在0.15%。在一项为期28天的大鼠重复给药口服毒性研究中,如果排除遗传毒性,则预测的无观察到不良反应剂量(NOAEL)为100 mg/kg/天。
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| 其他信息 |
外观:灰白色至浅黄色固体粉末。分子式:C2₅H21N3O3。储存:粉末储存于-20℃(3年)或4℃(2年);溶剂储存于-80℃(6个月)或-20℃(1个月),避光保存。溶解性:溶于DMSO和DMF;几乎不溶于水。该化合物通常采用反相高效液相色谱法(HPLC)进行分析,紫外检测波长为254 nm,或采用正离子模式液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行分析。其他名称:尼达尼布EP杂质N、尼达尼布苯胺杂质、(Z)-1-((4-氨基苯基)氨基)-4-(2-氧代吲哚啉-6-基)-2-(苯基亚甲基)丁烷-1,4-二酮。安全性:潜在的基因毒性杂质;小心处理。
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| 分子式 |
C24H21N3O3
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|---|---|
| 分子量 |
399.44
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| 精确质量 |
399.158
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| CAS号 |
1987887-92-2
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| 相关CAS号 |
Nintedanib impurity 7
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| PubChem CID |
138462685
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| tPSA |
86.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
611
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CNC1=CC=C(C=C1)N=C(C2=CC=CC=C2)C3=C(NC4=C3C=CC(=C4)C(=O)OC)O
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| InChi Key |
MCTPUTLLKUFKQT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H21N3O3/c1-25-17-9-11-18(12-10-17)26-22(15-6-4-3-5-7-15)21-19-13-8-16(24(29)30-2)14-20(19)27-23(21)28/h3-14,25,27-28H,1-2H3
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| 化学名 |
methyl 2-hydroxy-3-[N-[4-(methylamino)phenyl]-C-phenylcarbonimidoyl]-1H-indole-6-carboxylate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 本产品在运输和储存过程中需避光(避免光照)。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5035 mL | 12.5175 mL | 25.0350 mL | |
| 5 mM | 0.5007 mL | 2.5035 mL | 5.0070 mL | |
| 10 mM | 0.2504 mL | 1.2518 mL | 2.5035 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。