LysoPC(20:4)

别名: 1-Arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
目录号: V118554
LysoPC(20:4)是一种溶血磷脂酰胆碱。
LysoPC(20:4) CAS号: 60701-99-7
产品类别: Endogenous Metabolite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
LysoPC(20:4)是一种溶血磷脂酰胆碱。LysoPC(20:4)水平与癌症风险呈负相关。LysoPC(20:4)可能通过溶血磷脂酰胆碱(LPA)信号通路促进肿瘤进展。
溶血磷脂酰胆碱(20:4)(1-花生四烯酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱,CAS 60701-99-7)是一种溶血磷脂酰胆碱,其sn-1位含有花生四烯酰(20:4, n-6)酰基链。它是一种内源性生物活性脂质,可作为血清代谢产物。溶血磷脂酰胆碱(20:4)水平与癌症风险呈负相关,并且可能通过溶血磷脂酸(LPA)信号通路促进肿瘤进展。溶血磷脂酰胆碱(20:4)可用作代谢组学和癌症研究中的分析标准品或脂质生物标志物。仅供研究使用;不可用于人体治疗。
生物活性&实验参考方法
靶点
LysoPC(20:4) does not have a classical pharmacological target like an enzyme or receptor; it is an endogenous lipid molecule involved in lipid metabolism and cell signaling. Its primary role is as a precursor for the synthesis of lysophosphatidic acid (LPA) via the action of autotaxin (ENPP2), a lysophospholipase D. LPA is a potent bioactive lipid that signals through six G protein-coupled receptors (LPAR1-6) to regulate cell proliferation, migration, and survival. LysoPC(20:4) can also directly modulate immune cell function and inflammation. Decreased levels of LysoPC(20:4) in serum are associated with increased cancer risk, suggesting that it may have a protective role. The compound operates within the lysophospholipid and LPA signaling pathways.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,溶血磷脂酰胆碱(20:4) (LysoPC(20:4)) 可影响癌细胞的行为。用浓度为 1-50 uM 的 LysoPC(20:4) 处理癌细胞系(例如卵巢癌、结肠癌、乳腺癌)24-72 小时,可影响细胞增殖、迁移和侵袭,且不同细胞类型的影响程度有所不同。LysoPC(20:4) 可被自泌素转化为溶血磷脂酸 (LPA),LPA 随后激活溶血磷脂受体 (LPAR),从而促进多种癌细胞的迁移和存活。然而,在较高浓度 (50-100 uM) 下,LysoPC(20:4) 本身也可诱导某些细胞系发生凋亡。该化合物并非典型的抑制剂或激活剂,其活性取决于具体情况。在脂质组学研究中,LysoPC(20:4) 的水平通常作为生物标志物进行检测,而非用作外源性治疗。仅供研究使用。
体内研究 (In Vivo)
在体内,溶血磷脂酰胆碱(20:4)已被研究作为荷瘤小鼠的生物标志物。在异种移植模型(例如结肠癌)中,与对照组相比,荷瘤小鼠血清中的溶血磷脂酰胆碱(20:4)水平降低,但这种降低并非总是具有统计学意义。溶血磷脂酰胆碱(20:4)水平与癌症风险呈负相关,提示较低的溶血磷脂酰胆碱(20:4)水平可能与更具侵袭性的肿瘤相关。该化合物不用作体内治疗药物;通常将其作为内源性代谢物在血清或血浆中进行检测,用于诊断或预后目的。在某些研究中,可能会给动物注射溶血磷脂酰胆碱(20:4)以研究其代谢途径或其在溶血磷脂酸(LPA)信号通路中的作用,但此类研究较为有限。仅供研究使用。
酶活实验
不适用于酶/受体结合试验。溶血磷脂酰胆碱(20:4)是一种内源性脂质代谢物,通常测定的是其浓度而非活性。对于非细胞表征,采用标准的LC-MS/MS方案:将溶血磷脂酰胆碱(20:4)溶解于甲醇或氯仿:甲醇(1:1)混合溶液中,配制成1 mg/mL的储备液。用流动相(例如甲醇:水:甲酸,80:20:0.1)稀释至工作浓度(0.1-100 ng/mL)。将样品注入配备C18色谱柱(2.1×100 mm,1.7 um)的LC-MS/MS系统。流动相A:水+0.1%甲酸,流动相B:甲醇+0.1%甲酸。梯度洗脱:5分钟内从50% B线性增加至98% B。流速为0.3 mL/min。 MRM 离子对:m/z 544.3 → 184.1(磷酸胆碱头部基团)和 m/z 544.3 → 361.4(花生四烯酸片段)。采用外标曲线进行定量。保留时间约为 4-5 分钟。未进行酶抑制实验。
细胞实验
由于 LysoPC(20:4) 是一种内源性代谢物,因此通常不将其用作体外细胞实验的处理剂。然而,在机制研究中,可将细胞(例如卵巢癌细胞、巨噬细胞)培养于无脂培养基中,并用 1-50 uM 的 LysoPC(20:4) 处理 6-48 小时。配制 10 mM 的 LysoPC(20:4) 乙醇或 DMSO 储备液(-20℃ 保存);用培养基稀释(最终 DMSO/乙醇浓度 ≤0.1%)。进行增殖实验时,将细胞接种于 96 孔板(5×103 个细胞/孔),用 LysoPC(20:4) 处理 48 小时,然后用 MTT 法检测细胞活力。迁移实验中,使用Transwell小室(孔径8 um),在下室加入LysoPC(20:4)作为趋化因子(1-20 uM),在上室接种细胞,12-24小时后计数迁移细胞。LPA生成测定中,在自泌素(0.1-1 ug/mL)存在下用LysoPC(20:4)处理细胞,收集上清液,并通过LC-MS/MS测定LPA含量。溶剂对照(0.1%乙醇或DMSO)。阳性对照:迁移实验中LPA(1 uM)。所有实验均重复三次。
动物实验
在体内研究中,溶血磷脂酰胆碱(20:4)并非作为药物给药;而是通过疾病动物模型检测其内源性水平。一项典型的研究是:将癌细胞(例如HCT116结肠癌细胞,5×10⁶个/只,溶于Matrigel基质胶)皮下注射到雌性BALB/c裸鼠(6-8周龄,每组n=10)体内。在实验终点(肿瘤体积达到约1000 mm³时)通过心脏穿刺采集血液。分离血清,用冰甲醇沉淀蛋白质,并按照非细胞部分所述,采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析上清液。比较荷瘤小鼠和假手术对照小鼠的溶血磷脂酰胆碱(20:4)水平。该化合物也可通过静脉注射给药以追踪其代谢:将1-10 mg/kg LysoPC(20:4)(配制于10% DMSO/40% PEG300/5% Tween 80/45%生理盐水中)注射到大鼠或小鼠的尾静脉,分别在0、5、15、30、60和120分钟采集血液样本,并通过LC-MS/MS测定LysoPC(20:4)和LPA的含量。这可以提供LysoPC被自泌素转化为LPA的转化率信息。目前尚未进行治疗效果研究。
药代性质 (ADME/PK)
由于溶血磷脂酰胆碱(20:4)是一种内源性代谢物,因此其作为外源性化合物的药代动力学特性尚未得到充分表征。在啮齿动物中,静脉注射1-10 mg/kg剂量后,该化合物会被组织迅速吸收并代谢。由于溶血磷脂酶的快速水解以及自泌素将其转化为溶血磷脂酸(LPA),其血浆半衰期(t½)非常短,可能小于5分钟。分布容积(Vd)中等(约0.5-1 L/kg)。清除率(CL)较高,主要通过肝脏代谢。由于首过代谢,口服生物利用度可忽略不计。小鼠体内内源性血浆浓度范围为1-10 μM,具体数值取决于饮食和疾病状态。该化合物以粉末或氯仿溶液形式供应。冻干粉末应在-20℃下避光保存于惰性气体环境中。为避免降解,有机溶剂溶液应储存在玻璃小瓶中,温度为-80℃。切勿储存在塑料容器中,因为磷脂会吸附在塑料表面。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
由于溶血磷脂酰胆碱(20:4)是一种内源性代谢产物,因此目前尚无其作为外源化合物的具体毒性数据。在生理浓度(1-10 μM)下,它无毒。在较高浓度(>50 μM)下,由于溶血磷脂诱导的细胞膜破坏和氧化应激,它可导致某些细胞类型死亡。用于研究时,应遵循处理脂质标准品的标准实验室安全预防措施:避免吸入、摄入、皮肤/眼睛接触;使用个人防护装备(手套、实验服、护目镜);在通风橱内操作。本品不可用于人体。请根据当地法规处置废弃物。该化合物可能对水生生物有害,并具有长期持续影响。
参考文献

[1]. Saturated and mono-unsaturated lysophosphatidylcholine metabolism in tumour cells: a potential therapeutic target for preventing metastases. Lipids Health Dis. 2015;14:69. Published 2015 Jul 11.

[2]. Effects of Hawthorn Flavonoids on Intestinal Microbial Community and Metabolic Phenotype in Obese Rats. Adv Biol (Weinh). 2024;8(10):e2300514.

其他信息
CAS号:60701-99-7。分子式:C28H50NO7P,分子量:543.67。IUPAC名称:[(2R)-2-羟基-3-[(5Z,8Z,11Z,14Z)-二十碳-5,8,11,14-四烯酰基]氧丙基]2-(三甲基氮鎓基)乙基磷酸酯。同义词:1-花生四烯酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱。外观:固体粉末或油状物。纯度通常>98%(HPLC法)。溶解性:溶于氯仿、甲醇、乙醇;在水中可能形成胶束。储存:-20℃,惰性气体保护,避光保存。研究领域:代谢组学、癌症生物标志物研究、LPA信号通路。仅供研究使用,不得用于人体。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C28H50NO7P
分子量
543.67
精确质量
543.332
CAS号
60701-99-7
PubChem CID
24779476
外观&性状
White to yellow Oil‌
tPSA
105
氢键供体(HBD)数目
1
可旋转键数目(RBC)
24
重原子数目
37
分子复杂度/Complexity
733
定义原子立体中心数目
1
SMILES
CCCCC/C=C\\C/C=C\\C/C=C\\C/C=C\\CCCC(=O)OC[C@H](COP(=O)([O-])OCC[N+](C)(C)C)O
InChi Key
LAXQYRRMGGEGOH-JXRLJXCWSA-N
InChi Code
InChI=1S/C28H50NO7P/c1-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-16-17-18-19-20-21-22-28(31)34-25-27(30)26-36-37(32,33)35-24-23-29(2,3)4/h9-10,12-13,15-16,18-19,27,30H,5-8,11,14,17,20-26H2,1-4H3/b10-9-,13-12-,16-15-,19-18-/t27-/m1/s1
化学名
[(2R)-2-hydroxy-3-[(5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14-tetraenoyl]oxypropyl] 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate
别名
1-Arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.8394 mL 9.1968 mL 18.3935 mL
5 mM 0.3679 mL 1.8394 mL 3.6787 mL
10 mM 0.1839 mL 0.9197 mL 1.8394 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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