| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
This negative control targets the asialoglycoprotein receptor (ASGPR) on hepatocytes through its GalNAc (N-acetylgalactosamine) ligand. ASGPR is a C-type lectin highly expressed on the sinusoidal surface of hepatocytes. The GalNAc ligand binds specifically and with high affinity to ASGPR, leading to rapid internalization of the siRNA conjugate via endocytosis. However, because the siRNA sequence is scrambled, it does not bind to the target mRNA (e.g., TTR) within the cell. Thus, it serves as an ideal control to ensure that any effects seen with the active GalNac-siRNA are due to specific mRNA sequence recognition and not due to ASGPR delivery or the siRNA backbone. It functions within the PROTAC/LYTAC pathway.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外，该阴性对照用于基于细胞的检测中，以验证靶基因敲低的特异性。它不应敲低目标mRNA（例如TTR）。典型的实验方案如下：将原代人肝细胞或HepG2细胞（表达ASGPR）接种于12孔板中。用1-100 nM的GalNac-siRNA阴性对照（21nt）处理细胞24-96小时。通过qRT-PCR和Western blot检测靶基因（例如TTR）的敲低情况。与未处理的细胞相比，对照组的靶基因表达不应显著降低，而活性GalNac-siRNA应表现出有效的敲低作用。这证实了活性siRNA的活性具有序列特异性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内实验中，将GalNac-siRNA阴性对照（21nt）注射到动物模型中，以排除非特异性药理作用。一项典型的研究是：将雄性C57BL/6小鼠（每组n=8）皮下注射单剂量（例如1-10 mg/kg）的阴性对照制剂。定期（例如第7、14、21和28天）采集血液样本。采用ELISA法检测血浆中靶蛋白（例如TTR）的水平。阴性对照制剂不应改变血浆中靶蛋白的浓度，与溶剂对照组相比。这证实了活性GalNac-siRNA的治疗效果（例如降低TTR水平）是由其特异性RNAi序列引起的。
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| 酶活实验 |
对于非细胞检测，GalNac-siRNA阴性对照（21nt）用作结合研究中的对照，以评估ASGPR的特异性。可采用表面等离子共振（SPR）检测。将重组人ASGPR固定在传感器芯片上。将不同浓度（例如1-1000 nM）的GalNac-siRNA阴性对照（21nt）溶于运行缓冲液中，并使其流过芯片。结合亲和力（KD）可根据结合和解离速率常数计算。阴性对照应与活性GalNac-siRNA具有相似的ASGPR结合亲和力，因为ASGPR的结合是由GalNAc配体而非siRNA序列介导的。这验证了靶向配体的功能。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，典型的实验方案如下：将人肝癌细胞（Huh-7）以每孔10,000个细胞的密度接种于96孔板中。24小时后，用浓度范围为1 nM至1 uM的GalNAc-siRNA阴性对照（21nt）处理细胞。该化合物溶解于无菌无核酸酶水中配制成储备液（例如20 uM），然后直接加入培养基中。由于GalNAc能够有效介导ASGPR的摄取，因此通常不需要转染试剂。72小时后，裂解细胞。提取RNA，并通过qRT-PCR检测一系列非靶基因（例如炎症细胞因子）的表达。与未处理的对照组相比，阴性对照应诱导极少的非靶基因表达。
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| 动物实验 |
对于体内动物研究，GalNac-siRNA阴性对照（21nt）是一项关键工具。一项典型的研究在携带人TTR转基因的小鼠（例如C57BL/6）中进行：小鼠皮下注射（SC）对照，剂量分别为1 mg/kg、3 mg/kg和10 mg/kg（每组n=5）。给药可以是单次或多次（例如，每周一次，持续4周）。在给药前和给药后不同时间点（例如，第7、14、21、28天）从尾静脉采集血样。分离血浆，并通过特异性ELISA检测靶蛋白（例如，人TTR）的浓度。阴性对照组应保持稳定的血浆TTR水平，与载体（PBS）对照组无显著差异，从而验证活性GalNac-siRNA的特异性。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学：作为一种 GalNAc 偶联的 siRNA，阴性对照预计与活性治疗性 siRNA 具有相同的药代动力学/ADME 特性，因为 GalNAc 配体驱动其生物分布。它在血浆中高度稳定，主要通过 ASGPR 介导的内吞作用被肝脏摄取。皮下或静脉给药后，它迅速分布到肝脏。血浆半衰期 (t½) 相对较短（数小时），但组织停留时间较长（数周）。它在肝脏中长期蓄积，从而产生持久的药效学效应。阴性对照用于控制这些非特异性分布和蓄积效应。代谢主要发生在内体/溶酶体中。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性：GalNac-siRNA阴性对照（21nt）用于控制活性药物的非特异性毒性。其毒性特征应与活性药物相似，但不具有靶向介导的副作用。动物研究表明，在治疗剂量下，该对照通常耐受性良好。毒性反应可能包括注射部位反应、轻度血小板减少症和补体激活。高剂量下可能出现脱靶RNAi效应或免疫刺激（细胞因子释放）；阴性对照用于识别此类效应。标准安全预防措施：避免吸入和摄入。使用个人防护装备。本品仅供研究使用，不得用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
其他信息：GalNac-siRNA 阴性对照（21nt）。外观：固体，白色至类白色。储存：-20℃，密封，防潮；溶剂保存：-80℃ 可保存 6 个月，-20℃ 可保存 1 个月。运输：室温。仅供研究使用，不可用于人体。靶点：ASGPR（通过配体）。序列长度：21 个核苷酸。用作肝细胞 RNAi 实验的阴性对照。
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Mal-C2-amide-C10-tri-GalNAc
Ctx-L3
Atz-L5
ASGPR ligand-2
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