| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CHIPOpt targets the cell surface. It is not a drug with a specific protein receptor. As a cationic polymer, it binds electrostatically to the negatively charged phosphate backbone of nucleic acids (DNA, RNA) to form nanoparticles (polyplexes). These polyplexes interact with the anionic cell surface proteoglycans (e.g., heparan sulfate) and are taken up by the cell via endocytosis (macropinocytosis and clathrin-mediated). Once inside the cell, the "proton sponge" effect of the polymer induces osmotic swelling and rupture of the endosome, releasing the nucleic acids into the cytoplasm. DNA then enters the nucleus for transcription, or RNA stays in the cytoplasm for RNAi.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外,CHIPOpt 可促进核酸递送至多种细胞。例如,在 HEK293T 细胞中,将 1 ug 编码 GFP 的质粒 DNA 与 3 uL CHIPOpt 试剂混合,48 小时后,流式细胞术检测显示 GFP 阳性细胞比例超过 90%。该方法细胞毒性极低;与 Lipofectamine 2000 相比,细胞存活率保持在 90% 以上(在类似条件下,Lipofectamine 2000 的细胞存活率通常会降至 80%)。CHIPOpt 可有效用于反向转染(将细胞直接接种到转染混合物上)以及难以转染的细胞,例如原代神经元、干细胞和巨噬细胞(通常需要优化)。对于 siRNA 介导的基因敲低,CHIPOpt 可高效递送 siRNA(10-50 nM),从而实现超过 80% 的靶基因敲低(qRT-PCR)。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内,CHIPOpt 通常不用于全身注射,因为阳离子聚合物会与血清蛋白聚集并导致毒性。然而,它可用于局部体内转染(例如,瘤内、腹腔或鼻内给药),在这些情况下,血清相互作用最小。例如,在小鼠模型中,瘤内注射与编码 p53 的质粒 DNA 复合的 CHIPOpt(25 uL 中含 25 ug DNA)可显著抑制肿瘤生长,与对照组相比。它也可用于肌内注射 DNA 疫苗。然而,对于大多数全身应用,脂质体制剂是更优的选择。它主要是一种体外和离体应用工具。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验(HEK293T)通用流程:第一天:将2×10⁵个细胞接种于24孔板中,每孔加入500 uL含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基(不含抗生素)。过夜培养(细胞汇合度约为70-80%)。第二天:制备DNA/PEI混合液:将1 uG质粒DNA(例如pEGFP-C1)稀释于50 uL无血清Opti-MEM培养基中。将3 uL CHIPOpt稀释于50 uL Opti-MEM培养基中。将两种溶液混合,立即涡旋振荡10秒,室温孵育15-20分钟。将100 uL混合液逐滴加入细胞中。轻轻摇晃培养板。置于37℃、5% CO2培养箱中培养。 4-6小时后更换新鲜完全培养基以降低毒性。24-48小时后,通过流式细胞术或荧光显微镜分析转染效率。siRNA转染时,使用50 pmol siRNA(10 uM原液)和2 uL CHIPOpt,操作步骤类似。48-72小时后,通过Western blot或qPCR检测基因敲低效果。
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| 动物实验 |
体内动物实验(瘤内注射)通用方案:对于异种移植模型,将肿瘤细胞(例如,PC3前列腺癌细胞)注射到裸鼠体内。待肿瘤体积达到100-150 mm³后,制备转染复合物:将20 μg质粒DNA(例如,pGL3对照)与60 μg CHIPOpt(比例1:3)混合于50 μL 5%葡萄糖溶液中(瘤内注射)。孵育20分钟。使用29号针头,将50 μL复合物直接注射到肿瘤内。对照组注射生理盐水或空载体。48小时后,收集肿瘤组织,匀浆,并检测荧光素酶活性(如果使用报告基因)或提取RNA进行基因表达分析。对于DNA疫苗接种,将50 μg DNA/150 μg CHIPOpt复合物肌内注射到股四头肌。两周后监测免疫反应(抗体滴度)。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
一般药代动力学特性:CHIPOpt 是一种高分子量聚合物(PEI 衍生物)。它并非药物。本品以 1 mg/mL 水溶液(经无菌过滤)形式供应。请于 4℃ 保存(切勿冷冻)。至少可稳定保存 1 年。请勿高压灭菌。本品为非病毒载体。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性概况:与标准聚乙烯亚胺(PEI,25 kDa)相比,CHIPOpt 的配方毒性较低。在推荐的转染浓度(DNA:PEI 比例为 1:3)下,它对大多数细胞系无毒性。在极高浓度下(例如,浓度是推荐浓度的 5 倍),它可能导致细胞变圆和脱落。体内实验中,瘤内或肌内注射高达 100 μg 的 CHIPOpt 通常耐受性良好,炎症反应轻微。然而,由于可能发生与红细胞聚集和补体激活,不建议进行全身静脉注射。操作核酸和聚合物时应采取标准安全防护措施(戴手套、穿实验服)。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CHIPOpt 是一种新一代转染试剂,适用于 CRISPR-Cas9 和大规模病毒载体生产(例如,在 HEK293T 细胞中生产 rAAV 和慢病毒)。它通常以“CHIPOpt”或“PEIpro”的名称销售,并以即用型溶液的形式提供。仅供研究使用。
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| 分子式 |
C39H47N7O9
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| 分子量 |
757.83
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| 序列 |
Ac-Leu-Trp-Trp-Pro-AspAc-LWWPD
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中,避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3196 mL | 6.5978 mL | 13.1956 mL | |
| 5 mM | 0.2639 mL | 1.3196 mL | 2.6391 mL | |
| 10 mM | 0.1320 mL | 0.6598 mL | 1.3196 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。