| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 靶点 |
18:1 BMP (S,R) targets the endolysosomal cholesterol trafficking pathway. BMP binds directly to the lysosomal protein NPC2, with a Kd in the low micromolar range. This interaction facilitates the transfer of cholesterol from NPC2 to the lysosomal membrane, allowing its export to other cellular compartments. Loss of BMP (or its stereoisomer configuration) leads to cholesterol accumulation in lysosomes, similar to NPC disease. BMP also interacts with other proteins: it binds to and activates the acid sphingomyelinase (ASM) enzyme and is required for the degradation of sphingomyelin and gangliosides. BMP is also a ligand for the anti-phospholipid antibodies (aPL) in autoimmune diseases. In addition, BMP is a structural component of the lipid bilayer in late endosomes/lysosomes, promoting the formation of intraluminal vesicles. In research, the compound is used to study these interactions. It serves as a substrate for enzymes (e.g., group XV phospholipase A2, PLA2G15) and as a standard for lipidomics. The target is not a single receptor; BMP is a lipid that modulates protein function through direct binding.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验中，18:1 BMP (S,R) 可用于蛋白质结合实验，并作为质谱分析的标准品。在重组 NPC2 (0.5 ug) 的结合实验中，添加 BMP (1-50 uM) 会导致 NPC2 热稳定性 (DSF，ΔTm 最高可达 4degC) 呈剂量依赖性增加，表明二者存在直接相互作用。在荧光胆固醇转移实验中，将 NPC2 (100 nM) 和 NBD-胆固醇 (0.5 uM) 与含有 10 mol% BMP (S,R) 的脂质体（总脂质浓度为 0.5 mM）孵育。通过稀释自猝灭探针后荧光强度的增加（激发波长 470 nm，发射波长 530 nm）来测量 NBD-胆固醇向脂质体的转移。BMP 可将胆固醇转移速率提高 3-5 倍。在酶活性测定中，BMP（脂质体中浓度为1-10 mol%）可激活重组人酸性鞘磷脂酶（ASM，0.1 U）2-3倍，该活性通过[3H]-鞘磷脂转化为[3H]-磷酸胆碱来测定。在细胞实验中，向NPC1缺陷型成纤维细胞（NPC患者细胞）中添加18:1 BMP（S,R）（10-100 uM，与环糊精或脂质体结合）可部分恢复溶酶体胆固醇的输出，这可通过菲利平染色（核周荧光减弱）来观察。在细胞活力测定中，BMP（浓度高达100 uM）对成纤维细胞无毒性（MTT细胞活力>90%）。在脂质组学中，BMP可通过LC-MS/MS定量，作为NPC疾病的生物标志物。鼻咽癌患者成纤维细胞中骨形态发生蛋白（BMP，尤其是18:1）水平升高。酶学研究表明，BMP是溶酶体磷脂酶A2（PLA2G15）的底物，PLA2G15可裂解一条脂肪酰链，生成溶血性骨形态发生蛋白（lyso-BMP）和游离脂肪酸。酶活性可通过液相色谱-质谱联用（LC-MS）检测产物来测定。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，18:1 BMP (S,R) 不用于治疗。它是一种存在于所有细胞中的内源性脂质，尤其存在于晚期内体/溶酶体中。在 NPC1 缺陷小鼠（Npc1-/- 小鼠）和 NPC 患者中，由于溶酶体贮积，肝脏、脾脏和脑组织中的 BMP 水平升高 5-10 倍。该化合物可用作生物标志物，以监测疾病进展和治疗反应。在临床前研究中，用 HPβCD（4000 mg/kg，皮下注射，每周一次）治疗 Npc1-/- 小鼠，8 周后肝脏中的 BMP 水平降低了 50-60%，这与胆固醇贮积减少相关。在生物分布研究中，可将氘代 18:1 BMP (d5-18:1) 静脉注射到小鼠体内（1 mg/kg）。该脂质在15分钟内被肝脏迅速吸收并重新分布至溶酶体。其在血浆中的半衰期小于30分钟。在治疗方面，BMP本身并不使用，因为它不具备成药性（它是一种结构性脂质）。然而，合成的BMP类似物正被研究作为NPC2的潜在分子伴侣。在研究中，该化合物被用作LC-MS/MS方法验证的标准品以及生物标志物检测的阳性对照。由于BMP并非候选药物，因此尚未开展使用外源性BMP的疗效研究。
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| 酶活实验 |
体外酶/受体结合（非细胞）的一般方案：对于 NPC2 结合测定，可采用表面等离子共振 (SPR) 或微尺度热泳 (MST) 技术。对于 SPR，使用胺偶联法将重组 NPC2 (50 ug/mL) 固定在 CM5 芯片上。在 10 mM HEPES (pH 7.4)、150 mM NaCl 和 0.01% CHAPS（用于溶解脂质）的缓冲液中，以 18:1 的比例流动 BMP (S,R)，浓度范围为 0.1-50 uM。通过拟合 1:1 Langmuir 模型计算 Kd 值（Kd 通常为 2-5 uM）。对于 MST，用荧光染料（例如 NT-647）标记 NPC2。将 20 nM 标记的 NPC2 与不同浓度的 BMP（0.1-100 uM）混合于 MST 缓冲液（20 mM Tris pH 7.4、150 mM NaCl、0.05% Tween-20）中。将混合物装入毛细管并测量热泳；计算 Kd 值。对于 ASM 激活测定，制备含有 10 mol% BMP 和 90 mol% 磷脂酰胆碱 (PC) 的脂质体（总脂质浓度为 1 mM）。在 100 mM pH 4.5 的乙酸钠缓冲液中加入 0.1 U ASM 和 10 uM 鞘磷脂 (SM，用 [3H]-胆碱标记)。于 37°C 孵育 30 分钟。用 200 uL 氯仿：甲醇 (2:1) 终止反应，加水，离心，并测量水相（含 [3H]-磷酸胆碱）中的放射性。BMP 应使活性增加 2-3 倍。对于 PLA2G15 活性测定，制备含有 100 uM 18:1 BMP (S,R)（未标记）的脂质体。加入 0.1 ug 重组 PLA2G15，溶于 50 mM pH 4.5 的乙酸钠缓冲液、1 mM CaCl2 和 0.1% Triton X-100 中。于 37℃ 孵育 1 小时。提取脂质，并通过 LC-MS 分析产物（溶血磷脂酰胆碱-BMP）。通过 GC-MS 测定脂肪酸释放量。对于热稳定性（NPC2），将 5 uM NPC2 与 25 uM BMP 在 PBS 中孵育，加入 SYPRO Orange 染料，以 1°C/min 的速率从 25°C 加热至 95°C，并测量荧光强度。ΔTm > 2°C 表示结合。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验通用方案：对于胆固醇输出研究，将NPC1缺陷型人成纤维细胞（GM03123）培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中。将细胞接种于6孔板的盖玻片上（5×10⁵个细胞/孔）。24小时后，进行48小时血清饥饿处理以诱导低密度脂蛋白（LDL）摄取。加入18:1 BMP（S,R）与2-羟丙基-β-环糊精（HPβCD，摩尔比2:1）的复合物，使BMP的最终浓度为10-100 uM。孵育16小时。用4%多聚甲醛固定细胞，用菲利平（0.05 mg/mL）染色30分钟，洗涤，并通过荧光显微镜成像（激发波长360 nm，发射波长460 nm）。使用ImageJ软件定量分析细胞核周胆固醇的荧光强度。与对照组相比，BMP处理应使荧光强度降低20-40%。为检测脂质积累，用50 uM BMP处理NPC1缺陷型成纤维细胞24小时，然后提取脂质，并通过LC-MS定量分析游离胆固醇、胆固醇酯和BMP。为检测细胞毒性，用BMP（10-200 uM，与HPβCD复合物）处理正常人成纤维细胞48小时，进行MTT实验。浓度高达100 uM时未观察到明显的毒性。为定量细胞中的BMP（生物标志物），将成纤维细胞（正常和NPC1缺陷型）培养至汇合，用0.1% Triton X-100水溶液裂解细胞，加入内标（BMP-d₅），用氯仿：甲醇提取，并通过LC-MS/MS（负离子模式，m/z 761 → 281）进行分析。 NPC1缺陷细胞的BMP水平升高5-10倍。为了检测细胞内的ASM活性，将成纤维细胞与10 uM BODIPY标记的鞘磷脂（作为底物）和50 uM BMP孵育2小时，然后测量培养基中BODIPY标记的磷酸胆碱的荧光强度（激发波长485 nm，发射波长535 nm）。BMP应能提高ASM活性。
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| 动物实验 |
体内动物实验通用方案：生物标志物研究，获取Npc1-/-小鼠（C57BL/6J背景）及其野生型同窝小鼠。分别于2、4、6、8、10和12周龄处死小鼠。收集肝脏、脾脏和脑组织。取50 mg组织于0.5 mL PBS中匀浆，加入内标（18:1 BMP-d₅），用氯仿：甲醇（2:1）提取。采用LC-MS/MS进行分析。Npc1-/-小鼠在6周龄时肝脏和脾脏中的BMP水平比野生型小鼠高5-10倍，在8周龄时脑组织中的BMP水平比野生型小鼠高3-5倍。治疗研究，从3周龄开始，每周一次皮下注射HPβCD（4000 mg/kg）治疗Npc1-/-小鼠。9周龄时，收集组织并检测BMP水平；BMP水平降低表明治疗有效。为了研究外源性BMP的药代动力学，将18:1 BMP (S,R)铵溶于5%葡萄糖/5% Tween-80溶液（1 mg/mL）。静脉注射（0.5 mg/kg）至野生型小鼠体内。分别于5、15、30、60、120和240分钟采集血液样本。用含内标的氯仿：甲醇（2:1）提取血浆（50 μL），并采用LC-MS/MS进行分析。BMP的血浆半衰期很短（t1/2 ~5-10分钟）。为了研究组织分布，在静脉注射后30分钟处死小鼠，收集肝脏、脾脏、肾脏、肺脏和脑组织，匀浆后定量BMP。大部分（>80%）BMP蓄积于肝脏。为了收集尿液，将小鼠置于代谢笼中24小时；BMP几乎不经尿液排出（含量可忽略不计）。所有方案均需获得IACUC批准。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
一般药代动力学特性：18:1 BMP (S,R) 铵是一种内源性磷脂，而非药物。外源给药后，它能迅速从血浆中清除。在小鼠体内，静脉注射（0.5 mg/kg）后，BMP 的半衰期为 5-10 分钟。由于肝脏和脾脏的快速摄取，其分布容积 (Vd) 较大（>5 L/kg）。血浆蛋白结合率 >99%（脂蛋白）。该化合物经溶酶体磷脂酶 A2 (PLA2G15) 代谢为溶血磷脂酰肌醇 (lyso-BMP) 和游离油酸。主要清除途径是在溶酶体中降解；仅有不到 1% 的完整 BMP 从尿液或粪便中排出。由于 BMP 的水溶性差，因此在制剂中，可使用 5% 的 Tween-80 和 5% 的葡萄糖混合物，或与 HPβCD 形成复合物。对于液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS），使用C18色谱柱（2.1 × 100 mm，1.7 μm），流动相为：A：10 mM甲酸铵水溶液（pH 5.0）；B：甲醇：乙腈（1:1），含0.1%甲酸。梯度洗脱，B相比例从70%升至100%，历时5分钟。检测采用负离子模式：BMP（m/z 761.5，对应于18:1/18:1 BMP的[MH]-）→产物离子m/z 281（油酸根）。定量下限（LLOQ）为0.1 ng/mL。储存方法：将样品配制成氯仿：甲醇（1:1）混合溶液，置于-80℃保存；请勿使用塑料容器储存（请使用玻璃小瓶）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性概况：18:1 BMP (S,R) 铵是一种内源性溶血磷脂，通常无毒。体外实验表明，浓度高达 200 μM 时，它不会降低成纤维细胞的活力（MTT > 85%）。在小鼠急性毒性研究中，静脉注射 5 mg/kg 未引起死亡或行为改变。LD₅₀ 估计 > 50 mg/kg。目前尚无慢性毒性研究数据。在鼻咽癌 (NPC) 中，BMP 水平升高是溶酶体贮积的结果，而非毒性的原因。事实上，BMP 被认为通过与 NPC2 结合并促进胆固醇输出而发挥保护作用。在人类中，某些自身免疫性疾病（例如抗磷脂综合征）中存在抗 BMP 抗体（抗 LBPA），但该脂质本身无毒。应采取标准安全防护措施（戴手套、穿实验服）。该化合物并非管制物质。以氯仿：甲醇溶液形式储存于-80℃；避免反复冻融。仅供研究使用；不可用于临床或治疗用途。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
18:1 BMP (S,R) 铵盐也称为 (S,R)-双(单油酰甘油)磷酸酯、(S,R)-LBPA 或 BMP (18:1/18:1)。该铵盐的分子式为 C42H₈2NO10P（游离酸为 C42H₇₉O10P）。游离酸的分子量约为 784.08 g/mol，铵盐的分子量约为 801.13 g/mol。(S,R) 立体异构体（也称为 (3S,1'R)-BMP）是天然存在的形式。该化合物以白色粉末或氯仿溶液的形式供应。它是内溶酶体系统中的关键脂质，可用作脂质组学的标准品和溶酶体功能研究的探针。可从 Avanti Polar Lipids、Cayman Chemical 和其他供应商处购买。仅供研究使用。不可用于人类治疗用途。
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| 分子式 |
C42H82NO10P
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|---|---|
| 分子量 |
792.07
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| CAS号 |
799268-67-0
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2625 mL | 6.3126 mL | 12.6251 mL | |
| 5 mM | 0.2525 mL | 1.2625 mL | 2.5250 mL | |
| 10 mM | 0.1263 mL | 0.6313 mL | 1.2625 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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