| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
NMac1 targets multiple cellular pathways and proteins. Its primary molecular target is Nm23-H1 (also known as NME1 or NDPK-A), a nucleoside diphosphate kinase that plays a crucial role in suppressing tumor metastasis. NMac1 directly binds to the C-terminal domain of Nm23-H1 and activates its NDPK enzymatic activity. Additionally, NMac1 targets mitochondrial complex I (NADH:ubiquinone oxidoreductase), inhibiting its activity and leading to mitochondrial dysfunction. Downstream, NMac1 modulates several signaling pathways: it activates AMPK (AMP-activated protein kinase), inhibits mTOR (mechanistic target of rapamycin) and ERK (extracellular signal-regulated kinase). It also affects reactive oxygen species (ROS) production, Ras signaling, and the NF-kappaB pathway. Through these mechanisms, NMac1 suppresses changes in morphology and actin cytoskeleton organization following Rac1 activation in cancer cells, ultimately inhibiting tumor cell invasion and metastasis.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在葡萄糖饥饿条件下，NMac1抑制MDA-MB-231和MCF7细胞的增殖（IC50值分别为7.197和2.849 μM）[1]。NMac1（0-20 μM，0-20 h）诱导葡萄糖缺乏的MDA-MB-231细胞中AMPK的激活，并抑制mTOR和ERK[1]。NMac1（0-20 μM，0-20 h）通过抑制ATP生成和降低线粒体膜电位，诱导MDA-MB-231细胞线粒体功能障碍[1]。在葡萄糖缺乏条件下，NMac1（0-10 μM，0-100 min）诱导MDA-MB-231细胞中ATP耗竭，抑制线粒体ROS，并诱导线粒体ATP生成系统中的氧化磷酸化（OXPHOS）失调[1]。 NMac1（250-500 μM，0-100 分钟）抑制 MDA-MB-231 细胞中复合物 I 的活性[1]。NMac1（0-30 μM，2-14 天）以剂量依赖的方式抑制 MDA-MB-231 细胞球体的增殖[1]。NMac1（0-25 μM，16-24 小时）通过 NDPK 激活 Nm23-H1 来抑制 Rac1 的激活，从而降低 MDA-MB-231 细胞的侵袭和迁移能力[2]。
体外实验表明，NMac1在特定条件下具有显著的抗癌活性。在葡萄糖饥饿条件下，NMac1抑制MDA-MB-231和MCF7乳腺癌细胞的增殖，IC50值分别为7.197 microM和2.849 microM。它以剂量依赖的方式激活重组Nm23-H1的NDPK活性，EC50值为10.7 microM。在葡萄糖饥饿条件下，浓度为12.5-25 microM的NMac1可在2小时内诱导MDA-MB-231细胞中AMPK的激活，并抑制mTOR和ERK的活性。在250-500 microM浓度下，NMac1可降低ATP生成和线粒体膜电位，抑制复合物I的活性，并在0-25 microM浓度下通过激活Nm23-H1的NDPK活性来抑制Rac1的激活。 NMac1还能以剂量依赖的方式降低MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力，而不影响细胞增殖。它还能诱导细胞形态发生改变，从转移性间质细胞型转变为转移能力较弱的表型。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
NMac1（10 mg/kg，小鼠，每天一次，持续 21 天）在乳腺癌转移模型中可放大乳腺癌，而不影响原发肿瘤的大小[2]。
体内实验表明，NMac1 具有显著的抗转移活性，且不影响原发肿瘤的生长。在一项异种移植研究中，将 MDA-MB-231-LUS-D3H2LN 细胞（一种高转移性乳腺癌模型）原位注射到 NOD/SCID 小鼠体内，连续 3 周口服 10 mg/kg 的 NMac1，可显著抑制乳腺癌转移。重要的是，该治疗并未影响原发肿瘤的大小，表明 NMac1 特异性地靶向转移过程而非肿瘤生长。该化合物在此剂量下具有良好的口服活性和耐受性，未见对动物体重或整体健康状况的不良反应报道。这些体内实验结果支持 NMac1 作为一种抗转移药物，用于治疗转移性乳腺癌以及其他潜在的转移性癌症。未来需要开展更多研究，以评估其在其他肿瘤模型中的疗效。 |
| 酶活实验 |
体外酶/受体结合（非细胞）通用方案：测定Nm23-H1的NDPK活性，配制反应混合物，其中包含50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、5 mM MgCl2、1 mM ATP、0.5 mM TDP（或其他NDP底物）和重组Nm23-H1蛋白（0.1-1 ug）。加入不同浓度的NMac1（0.1-100 uM，溶于DMSO，最终DMSO浓度<0.5%）。30℃孵育30分钟。95℃加热2分钟终止反应。通过高效液相色谱法（HPLC）在260 nm处进行紫外检测，或通过丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶偶联酶法（监测340 nm处NADH的氧化）定量生成的NTP。通过绘制活性倍数增加与化合物浓度对数的关系图，计算 NDPK 激活的 EC50 值。对于直接结合，进行表面等离子共振 (SPR) 实验：将 Nm23-H1 固定在 CM5 芯片上，在运行缓冲液（10 mM HEPES pH 7.4、150 mM NaCl、0.005% Tween-20）中加入 NMac1（0.1-100 uM），并通过拟合 1:1 Langmuir 结合模型计算 Kd 值。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： MDA-MB-231 细胞 测试浓度： 0、5、10、12.5、20 μM 孵育时间： 0、2、4、8、12、16、20 小时 实验结果： 诱导 AMPK 激活并抑制 mTOR、ERK 和 pS6K，在葡萄糖耗竭条件下 2 小时内快速诱导 AMPK 激活。 免疫荧光分析[1] 细胞类型： MDA-MB-231 细胞 测试浓度： 12.5 μM 孵育时间： 6 小时 实验结果：结果：在缺乏葡萄糖的情况下，细胞线粒体完整性受损，TOM20 水平降低。 蛋白质印迹分析[2] 细胞类型：MDA-MB-231 细胞 测试浓度：0、5、10、25 μM 孵育时间：16 小时 实验结果：Rac1 活化降低。 细胞迁移实验[2] 细胞类型：MDA-MB-231 细胞 测试浓度：0、5、10、25 μM 孵育时间：24 小时 实验结果：侵袭和迁移能力呈剂量依赖性降低。以不影响其繁殖的方式。 体外细胞实验通用方案：将MDA-MB-231细胞（人乳腺癌细胞）培养于含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中，置于37℃、5% CO2培养箱中培养。在葡萄糖饥饿条件下进行增殖实验时，将常规培养基替换为含10%透析FBS的无葡萄糖DMEM培养基。将细胞以8×103个/孔的密度接种于96孔板中，并过夜培养。用不同浓度的NMac1（0、1、5、10、25、50 uM）处理细胞48-72小时。加入MTT（0.5 mg/mL）孵育4小时，将甲臜溶解于DMSO中，测定OD570值。侵袭实验使用涂有Matrigel的Transwell小室。将 2×10⁵ 个细胞悬浮于无血清培养基中，加入含有不同浓度 NMac1（0、12.5、25 uM）的上室。下室加入 10% FBS 作为趋化因子。孵育 24 小时后，用甲醇固定下室膜上的侵袭细胞，用 0.1% 结晶紫染色，并在显微镜下计数。对于蛋白质印迹实验，用 NMac1（12.5 uM）处理细胞 2-24 小时，用 RIPA 裂解缓冲液裂解细胞，并检测 p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-ERK 和 ERK 的表达。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：乳腺癌（MDA-MB-231-Luc-D3H2LN细胞，1 × 106）转移NOD/SCID小鼠模型[2]
剂量：10 mg/kg 给药途径：口服，每日一次，持续21天 实验结果：显著抑制乳腺癌转移，且不影响原发肿瘤大小。 体内动物实验通用方案：使用雌性NOD/SCID小鼠（6-8周龄，18-22 g）。将MDA-MB-231-LUS-D3H2LN细胞（1×10⁶个细胞溶于50 μL PBS，PBS与Matrigel按1:1比例混合）原位注射到乳腺脂肪垫中。每周使用游标卡尺测量肿瘤生长情况。当肿瘤体积达到约50-100 mm³（通常3-4周）时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）：载体对照组（0.5%甲基纤维素或玉米油）和NMac1组（10 mg/kg/天）。每日灌胃给予NMac1，持续21天。每周测量两次原发肿瘤体积。为评估转移情况，21天后处死小鼠，解剖肺脏和其他器官，用Bouin氏液固定，并在解剖显微镜下计数表面转移结节。对肺组织进行组织学处理（H&E染色）以确认微转移灶。使用ImageJ软件测量转移灶面积，量化转移负荷。NMac1治疗应能显著减少肺转移灶的数量和面积，且不影响原发肿瘤的生长或体重。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
一般药代动力学特性：NMac1 作为一种口服活性化合物，具有良好的口服生物利用度。基于其在 10 mg/kg 口服剂量下的体内疗效，该化合物可能易于从胃肠道吸收。其化学结构（C24H2₈O4，分子量 380.48）表明其具有中等亲脂性，使其能够透过细胞膜。根据典型的苯基丁烯二聚体，血浆半衰期 (t1/2) 估计为 2-4 小时，但 NMac1 的具体药代动力学数据有限。该化合物主要在肝脏代谢，可能通过 I 期（氧化、还原）和 II 期（葡萄糖醛酸化）代谢途径进行。蛋白结合率为中等至高。排泄主要通过胆汁和肾脏途径。对于体内研究，NMac1 可配制成 0.5% 甲基纤维素或玉米油制剂用于口服给药。研究人员应进行有针对性的药代动力学研究，包括在啮齿动物中以 5、10 和 20 mg/kg 的剂量进行血浆浓度-时间曲线分析，并采用 LC-MS/MS 定量分析，以确定其特定实验条件下的 Cmax、Tmax、AUC、t1/2 和口服生物利用度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性特征：在临床前研究中，NMac1 在治疗相关剂量下通常耐受性良好。在已发表的异种移植研究中，小鼠口服 NMac1 10 mg/kg，持续 3 周，未引起小鼠体重显著变化或产生可观察到的不良反应（嗜睡、毛发蓬乱、行为异常）。未报告死亡病例。体外细胞毒性试验：在葡萄糖存在的情况下，NMac1 对 MDA-MB-231 细胞的增殖无显著影响，表明其总体细胞毒性较低；其抗增殖作用仅在葡萄糖饥饿条件下观察到，这可能赋予其一定的癌症选择性。在常规培养基中，浓度高达 50 μM 时，NMac1 不会降低细胞活力。目前尚未发表有关其遗传毒性、心血管毒性或器官毒性的具体研究。该化合物来源于天然物质（生姜），并具有作为抗炎剂的传统应用历史，表明其安全性良好。不过，在处理该化合物时，应遵循标准的实验室安全预防措施（手套、实验服、护目镜）。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
NMac1 又名 Nm23 激活剂 1、cassumunene 和化合物 1。其分子式为 C24H2₈O4，分子量为 380.48 g/mol。该化合物为固体（粉末），可溶于 DMSO 和乙醇，但难溶于水。储备液（10-50 mM）应使用 DMSO 配制，并于 -20℃ 避光保存，最长可保存 1 年；水性工作液应立即使用，因为可能出现沉淀。NMac1 于 2018 年首次被报道为一种具有抗转移活性的 Nm23/NDPK 小分子激活剂（Lee JJ 等，Sci Rep. 2018;8(1):10909）。该化合物尚未获批用于临床，目前仅作为研究转移生物学和开发抗转移疗法的科研工具。 NMac1粉末在-20℃下至少可稳定保存3年。使用时应小心谨慎，避免吸入和皮肤接触。
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| 分子式 |
C24H28O4
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| 分子量 |
380.48
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| CAS号 |
1332290-68-2
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| 相关CAS号 |
(Z)-NMac1
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6283 mL | 13.1413 mL | 26.2826 mL | |
| 5 mM | 0.5257 mL | 2.6283 mL | 5.2565 mL | |
| 10 mM | 0.2628 mL | 1.3141 mL | 2.6283 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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