| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Difelikefalin-d5 hydrochloride targets the kappa opioid receptor (KOR), a G protein-coupled receptor (GPCR) primarily expressed in the central and peripheral nervous systems. However, Difelikefalin is specifically designed to be peripherally restricted, meaning it does not readily cross the blood-brain barrier. As a result, it activates KORs located on peripheral sensory nerves and immune cells without causing central nervous system side effects (such as dysphoria, sedation, or hallucinations) typically associated with central KOR activation. By binding to and activating KORs on peripheral nerve endings, Difelikefalin reduces the transmission of itch signals to the spinal cord. KOR activation also produces anti-inflammatory effects by modulating cytokine release from immune cells. The mechanism is G protein-dependent, involving inhibition of adenylate cyclase, decreased cAMP production, and reduced neuronal excitability. Thus, the molecular target is the peripheral kappa opioid receptor.
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| 体外研究 (In Vitro) |
氢、碳和其他元素的稳定重同位素已被引入药物分子中，主要用作药物研发过程中定量分析的示踪剂。涉及氘标记药物人体应用的研究表明，与未氘代的同类药物相比，这些化合物可能具有一些优势。氘代作用因其可能影响药物的药代动力学和代谢特征而备受关注。氘代丁苯那嗪是首个获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准的氘代药物。这种氘代丁苯那嗪用于治疗亨廷顿舞蹈症以及迟发性运动障碍。正在进行的临床试验表明，许多其他氘代化合物正在被评估用于治疗人类疾病，而不仅仅是作为研究工具。
体外实验表明，Difelikefalin（母体化合物及其氘代衍生物）对人κ阿片受体（KOR）具有强效且选择性的激动作用。在表达人KOR的HEK293细胞的转录激活实验中，Difelikefalin激活该受体的EC50值为0.16 nM。它还能抑制表达KOR的R1.G1小鼠胸腺瘤细胞中福斯克林刺激的cAMP生成，EC50值为0.048 nM，表明其具有强效的功能活性。该化合物对KOR的选择性远高于其他阿片受体：其对micro（u）和δ（δ）阿片受体的选择性高出1000倍以上。体外实验表明，浓度高达10 uM的Difelikefalin不会显著激活其他G蛋白偶联受体（GPCR）、离子通道或酶。氘代版本（Difelikefalin-d5）不用于活性测定，因为它用作内标；然而，由于氘取代对受体结合和信号传导的影响极小，预计它在摩尔基础上与未标记的 Difelikefalin 具有相同的生物活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在某些情况下，氘代化合物可能比非氘代化合物更具优势，这通常是由于其清除率的改变。氘代作用也可能改变代谢途径，从而降低毒性。预计不久之后将有更多氘代化合物获得批准。临床医生需要熟悉这些新药的剂量、疗效、潜在副作用以及独特的代谢特征。
在体内，地非利法林（母体化合物）已在多种瘙痒和炎症动物模型中显示出疗效。在急性和慢性瘙痒小鼠模型中，皮下注射地非利法林（0.03-3 mg/kg）可剂量依赖性地减少由多种致痒剂（包括化合物 48/80、氯喹和组胺）诱导的抓挠行为。选择性 κ 阿片受体拮抗剂 nor-BNI 可阻断其止痒作用，证实了其靶点结合。在炎症性疼痛模型中，地非利法林可减轻痛觉过敏和异常性疼痛，且不影响运动协调性。在慢性肾脏病相关瘙痒（CKD-aP）血液透析患者的 III 期临床试验中，地非利法林（每次透析后静脉注射 0.5 ug/kg）显著降低了瘙痒强度评分（WI-NRS），并改善了患者的生活质量。氘代版本未用于体内给药。它被用作药代动力学研究的内部标准，通过 LC-MS/MS 定量血浆和组织中未标记的 Difelikefalin 浓度。 |
| 酶活实验 |
体外酶/受体结合（非细胞）通用方案：为测定Difelikefalin与KOR的结合亲和力，使用表达人KOR的HEK293细胞膜制备物进行放射性配体竞争结合实验。配制实验缓冲液：50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、5 mM MgCl2、1 mM EDTA、0.1% BSA。将20 ug膜蛋白与1 nM [3H]-U-69593（选择性KOR放射性配体）和递增浓度的Difelikefalin-d5盐酸盐（用作竞争剂，0.001-1000 nM，或使用未标记的Difelikefalin）在250 uL总体积中于25℃孵育60分钟。使用10 uM nor-BNI确定非特异性结合。反应通过预先浸泡在 0.5% 聚乙烯亚胺溶液中的 GF/B 滤膜快速过滤终止。用冰冷的缓冲液洗涤滤膜 3 次。在闪烁计数器中计数滤膜。使用非线性回归计算 IC₅0 值，并使用 Cheng-Prusoff 方程将其转换为 Kᵢ 值。对于功能活性（cAMP 积累），使用表达人 KOR 的 CHO-K1 细胞。将细胞与 1 uM 福斯克林（forskolin）孵育以刺激 cAMP 生成，并加入不同浓度的 Difelikefalin-d5 盐酸盐（0.001-1000 nM），于 37℃ 孵育 30 分钟。使用均相时间分辨 FRET (HTRF) cAMP 试剂盒测量细胞内 cAMP 浓度。计算抑制 cAMP 生成的 EC₅0 值。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验通用方案：对于κ阿片受体（KOR）激活研究，使用稳定表达人κ阿片受体（KOR）和CRE-荧光素酶报告基因的CHO-K1细胞。将细胞培养于含10%胎牛血清（FBS）的F-12K培养基中。以2×10⁴个细胞/孔的密度接种于96孔白色不透明板中，并过夜培养。次日，更换为无血清培养基，并用Difelikefalin-d5盐酸盐（作为未标记Difelikefalin的替代物，浓度分别为0、0.001、0.01、0.1、1、10、100和1000 nM）处理细胞，于37℃孵育5-6小时。加入荧光素酶检测试剂，并使用酶标仪测量发光值。以DMSO对照组进行标准化。氘代化合物应产生与未标记的Difelikefalin相同的浓度-效应曲线。为进行选择性测试，使用表达u(u)或δ(δ)阿片受体的CHO细胞重复该实验；Difelikefalin应显示出极低的激活作用（EC₅0值高出1000倍以上）。为进行抗炎活性测试，培养原代小鼠巨噬细胞或RAW264.7细胞，用0.1-1000 nM的Difelikefalin-d5处理1小时，然后用LPS（1 ug/mL）刺激24小时。通过ELISA检测上清液中的TNF-α和IL-6。Difelikefalin应能降低细胞因子的产生，EC₅0值约为1-10 nM。
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| 动物实验 |
体内动物实验通用方案：盐酸地非利福林-d5不用于疗效研究；它是药代动力学分析的稳定同位素标记内标。对于未标记地非利福林的药代动力学研究，将地非利福林（0.1-3 mg/kg）皮下或静脉注射给大鼠或小鼠。在多个时间点（0、0.25、0.5、1、2、4、8、12、24、48 小时）采集血样至含有蛋白酶抑制剂（例如抑肽酶）的EDTA抗凝管中。离心获得血浆。向50 μL血浆中加入10 μL含有盐酸地非利福林-d5的内标溶液（例如，10-50 ng/mL的水/乙腈溶液）。加入 200 μL 冷乙腈进行蛋白质沉淀，涡旋混匀，12,000 rpm 离心 10 分钟。将上清液注入配备 C18 色谱柱的 LC-MS/MS 系统（流动相：0.1% 甲酸水溶液/乙腈梯度）。监测离子对：未标记的 Difelikefalin（母离子到碎片离子）和 Difelikefalin-d5（质量数 +5）。使用已知浓度的未标记 Difelikefalin 和固定浓度的内标构建校准曲线。使用非房室模型分析计算药代动力学参数。在瘙痒动物模型中进行疗效研究时，在致痒剂激发（例如，化合物 48/80，50 μg 溶于 50 μL 溶液中，皮下注射到颈背部）前 30 分钟，向小鼠皮下注射未标记的 Difelikefalin（0.1-3 mg/kg）。记录刮擦行为 30-60 分钟。与车辆相比，Difelikefalin 应减少 50-80% 的刮擦次数。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
总体药代动力学特性：地非利法林（及其氘代形式作为内标）具有良好的药代动力学特性。皮下注射（0.5 μg/kg，血液透析后人体临床剂量）后，该化合物在1-2小时达到血浆峰浓度（Cmax），约为1-2 ng/mL（Tmax）。在人体内的末端消除半衰期（t1/2）约为24-30小时，因此可以每周给药三次。皮下注射后的生物利用度接近100%。该化合物代谢不广泛；代谢率低于10%，主要通过水解和氧化过程进行。蛋白结合率约为80-90%。地非利法林主要以原形药物经肾脏排泄清除（约80%的剂量从尿液中回收）。由于其外周分布受限（极性表面积大，脑渗透性差），脑血浆比小于0.1。在血液透析患者中，该化合物可通过透析有效清除（提取率约为0.6），因此给药安排在透析后。氘代版本代谢稳定，在生理条件下不会发生显著的氘交换。使用Difelikefalin-d5作为内标，采用LC-MS/MS分析，定量下限（LLOQ）为0.05 ng/mL。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性特征：基于对血液透析患者的大量临床试验，Difelikefalin 具有良好的安全性。在 III 期临床试验（KALM-1 和 KALM-2）中，最常见的不良事件为腹泻（约 10%）、恶心（8%）、头晕（5%）和头痛（4%）。这些不良事件通常为轻度至中度。严重不良事件罕见，且与安慰剂组相当。Difelikefalin 不会引起呼吸抑制、镇静或欣快感，这使其区别于 μ 阿片受体激动剂。未观察到明显的 QT 间期延长或心脏毒性。在临床前毒理学研究中，Difelikefalin 在大鼠和犬中耐受性良好，剂量高达 10 mg/kg/天，持续 28 天，未观察到靶器官毒性。该化合物在 Ames 试验中未显示遗传毒性，在动物研究中未显示生殖毒性，且无致癌性。氘代形式化学性质稳定，在用作内标的低浓度（通常为ng/mL级别）下无毒。处理Difelikefalin-d5盐酸盐时，只需采取标准的实验室安全防护措施（戴手套、穿实验服）即可。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
盐酸二非利卡法林-d5的分子式为C3₆H₅1D₅Cl3N₇O₆，分子量约为794.26 g/mol。氘原子以特定位置（通常为五个氘原子）掺入，在生理条件下稳定，不会发生氘交换。该化合物为白色至类白色粉末，可溶于水和二甲基亚砜（DMSO）。为提高水溶性，本品以盐酸盐形式供应。储存：冻干粉末在-20℃避光保存，可保存长达3年；水溶液（1 mM）可在-80℃保存长达6个月，避免反复冻融。母体药物地非利福林（CR-845）于2021年获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准（商品名：Korsuva®），并于2022年获得欧洲药品管理局（EMA）批准，用于治疗血液透析患者慢性肾脏病相关的中重度瘙痒。氘代版本仅供研究使用，作为药代动力学和生物等效性研究的分析内标。它不可用于人体治疗。在制备用于液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析的储备液时，通常需要在生物安全柜中操作该化合物。
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| 分子式 |
C36H51D5CL3N7O6
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| 分子量 |
794.26
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| 相关CAS号 |
Difelikefalin-d5
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 别名 |
CR-845-d5 hydrochloride; FE-202845-d5 hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2590 mL | 6.2952 mL | 12.5903 mL | |
| 5 mM | 0.2518 mL | 1.2590 mL | 2.5181 mL | |
| 10 mM | 0.1259 mL | 0.6295 mL | 1.2590 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
DOR agonist 3
KOR agonist 6
SRI-22136
Methocinnamox
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