| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
D2A21 targets cell membranes, not a specific protein receptor. In bacteria, the cationic peptide binds to anionic lipopolysaccharides (LPS) and lipoteichoic acids on the outer membrane, then inserts into the cytoplasmic membrane, forming pores or causing membrane thinning and lysis. The minimal inhibitory concentration (MIC) against Pseudomonas aeruginosa is approximately 21.69 ug/mL. In cancer cells, D2A21 targets the mitochondrial membrane and the plasma membrane, exploiting the increased negative charge on the outer leaflet of cancer cells (due to phosphatidylserine exposure) and the higher transmembrane potential of mitochondria. This leads to dissipation of the mitochondrial membrane potential, release of cytochrome c, and activation of caspases 9 and 3, ultimately inducing apoptosis. Thus, the membrane is the primary target for both antibacterial and anticancer activities.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，D2A21 TFA 对铜绿假单胞菌具有强效抗菌活性（MIC = 21.69 ug/mL，基于分子量 ~2775 计算约为 7.8 uM）。它对其他革兰氏阴性菌（大肠杆菌 MIC ~10-50 ug/mL）和部分革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌 MIC ~50-100 ug/mL）也具有抗菌活性。该肽具有快速杀菌作用，在 4 倍 MIC 浓度下，30 分钟内可杀灭 99.9% 以上的铜绿假单胞菌。在癌细胞系中，D2A21 表现出剂量依赖性的抗增殖活性。例如，在 PC-3（前列腺癌）细胞中，48 小时后的 IC50 约为 10-20 uM；在 DU145 细胞中，IC50 约为 15-25 uM。该肽可诱导细胞凋亡，Annexin V/PI染色、PARP裂解和Bax/Bcl-2比值升高均证实了这一点。该肽对非癌细胞（例如人成纤维细胞，IC50 > 100 uM）的毒性较低。其对人红细胞的溶血活性也较低，HC10（10%溶血）> 200 uM。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，D2A21 TFA 已在铜绿假单胞菌感染的小鼠烧伤模型中进行了评估。在一项研究中，小鼠全身烫伤（约占体表面积的 15%）感染了 10^7 CFU 的铜绿假单胞菌。局部应用 D2A21（5 mg/kg，溶于乳膏基质，每日一次，连续 3 天）显著降低了伤口和血液中的细菌数量，并将 7 天存活率从 20%（赋形剂组）提高到 80%（肽治疗组）。在全身感染模型（腹腔注射铜绿假单胞菌）中，腹腔注射 D2A21（20 mg/kg，每日两次，连续 2 天）也降低了脾脏和肝脏中的细菌载量。在抗肿瘤活性方面，在 PC-3 前列腺癌皮下异种移植模型（将 5×10^6 个细胞注射到裸鼠体内）中，每隔一天腹腔注射 15 mg/kg 的 D2A21，持续 3 周，与载体对照组相比，肿瘤体积减少了约 60%，且体重没有明显下降。
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| 酶活实验 |
体外酶/受体结合（非细胞）通用方案：由于D2A21靶向细胞膜，因此采用合成脂质体渗漏试验。制备由磷脂酰胆碱（PC）和磷脂酰甘油（PG）以3:1摩尔比组成的大单层囊泡（LUVs），以模拟细菌膜。将脂质溶解于氯仿中，氮气吹干，重悬于含有50 mM羧基荧光素（自猝灭浓度）的缓冲液（10 mM HEPES，pH 7.0，100 mM NaCl）中。通过100 nm聚碳酸酯膜挤出。用凝胶过滤法去除未包裹的染料。在96孔板中，向100 uL LUVs（最终脂质浓度为10 uM）中加入D2A21（0-100 ug/mL）。测量肽破坏细胞膜并释放染料时荧光强度随时间的变化（激发波长 485 nm，发射波长 520 nm）。计算泄漏百分比 = (F - F0)/(F100 - F0) × 100，其中 F100 为加入 Triton X-100 (1%) 后的荧光强度。对于癌细胞膜模拟物，磷脂酰胆碱 (PC) 与磷脂酰丝氨酸 (PS) 的比例为 7:3。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验通用方案：抗菌活性测定（MIC测定）遵循CLSI指南。将铜绿假单胞菌PAO1在Mueller-Hinton肉汤中过夜培养，稀释至5×10⁵ CFU/mL。在96孔板中加入100 uL菌悬液，并用D2A21 TFA进行系列稀释（2倍稀释，0.5-128 ug/mL）。37℃孵育20小时。读取OD600值。MIC为无可见菌落生长的最低浓度。抗癌活性测定中，将PC-3细胞在含10% FBS的RPMI-1640培养基中培养。以5000个细胞/孔的密度接种于96孔板中，过夜培养。用D2A21 TFA（0、5、10、20、40、80 uM）处理48小时。加入 MTT（终浓度 0.5 mg/mL）孵育 4 小时，将甲臜溶解于 DMSO 中，在 570 nm 波长处读取吸光度值。为评估细胞凋亡，用 20 uM 肽处理细胞 24 小时，然后用 Annexin V-FITC 和 PI 染色，并通过流式细胞术进行分析。为检测线粒体膜电位，使用 JC-1 染料：处理细胞，加入 JC-1（10 ug/mL）孵育 15 分钟，然后测量红/绿荧光比值。
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| 动物实验 |
体内动物实验通用方案：使用雌性BALB/c小鼠（6-8周龄，20-25 g）建立烧伤感染模型。麻醉小鼠，剃除背部毛发，将小鼠浸入90℃热水中10秒，造成体表面积15%的烫伤。烫伤后立即在烫伤部位涂抹50 μL铜绿假单胞菌PAO1（10^7 CFU）。感染1小时后，局部涂抹100 μL溶剂（无菌水）或D2A21 TFA（5 mg/kg，溶于水中）。每日重复，持续3天。观察小鼠存活情况7天。第3天，处死部分小鼠（每组n=5），切取烧伤组织，匀浆后接种于十六烷基三甲基溴化铵琼脂平板上进行菌落计数。对于前列腺癌异种移植模型，将PC-3细胞（5×10⁶个细胞溶于100 μL Matrigel基质胶中）皮下注射到雄性裸鼠体内。当肿瘤体积达到100 mm³时，将小鼠随机分为3组（n=8）：载体组（PBS）、D2A21 10 mg/kg组和D2A21 20 mg/kg组。每隔一天腹腔注射一次，持续3周。每周测量两次肿瘤体积。实验结束时，收集肿瘤组织进行TUNEL染色和caspase-3的Western blot检测。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
D2A21（一种代表性的阳离子抗菌肽）的一般药代动力学特性：大鼠静脉注射（10 mg/kg）后，该肽迅速从血浆中清除，α半衰期为5-10分钟，β半衰期为30-60分钟。分布容积约为0.3-0.5 L/kg，表明其主要分布于细胞外液。血浆蛋白结合率中等（40-60%）（主要与白蛋白和脂蛋白结合）。该肽易被血清蛋白酶（胰蛋白酶、糜蛋白酶）快速降解，导致其片段化。口服生物利用度低于1%。腹腔注射后，血药浓度峰值（Cmax）在30-60分钟达到，生物利用度约为20-30%。三氟乙酸盐迅速解离。该肽主要通过肾脏滤过和蛋白水解清除。不到5%以原形经尿液排出。不经CYP450代谢。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性特征：D2A21 TFA 在临床前研究中显示出良好的安全性。体外溶血试验（使用人红细胞）：HC50（导致 50% 溶血的浓度）> 500 μM，表明溶血潜力低。对非癌性人成纤维细胞的细胞毒性：48 小时后 IC50 > 200 μM。在小鼠中，每隔一天腹腔注射 20 mg/kg，持续 2 周，未观察到任何临床症状、体重减轻，血清 ALT、AST、BUN 或肌酐水平也无显著变化。肝脏、肾脏和脾脏的组织病理学检查未见病变。单次注射极高剂量（100 mg/kg，腹腔注射）后，小鼠出现短暂的嗜睡和活动减少，持续 1-2 小时，但未出现死亡。Ames 试验（高达 5000 μg/孔板）未发现遗传毒性。然而，与所有膜活性肽一样，皮下注射时高浓度局部药物可能引起局部组织刺激。目前尚无生殖毒性数据。该肽应按照标准安全预防措施进行操作（避免吸入和皮肤接触）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
该肽序列通常写作 FAKKFAKKFKKFAKKFAKFAFAF。计算得到的分子量（游离碱）为 2775.42 g/mol；作为 TFA 盐时，实际分子量约为 2775.42 + (114 × TFA 反离子数)。该肽带净正电荷 +9（由于赖氨酸残基；序列中有 8 个赖氨酸残基？我们来数一下：FAKK (2K)、FAKK (2K)、FKK (2K)、FAKK (2K)、FAKFAFAF（只有 1K？实际上，最后一部分“FAKFAFAF”中有一个 K）。赖氨酸总数 = 2 + 2 + 2 + 2 + 1 = 9。加上 N 端游离氨基，净电荷约为 +10）。这种阳离子性质解释了其膜亲和力。D2A21 以冻干粉末形式供应。干燥保存于-20℃。使用时，用无菌水或0.1%乙酸溶液复溶至1-2 mM。避免反复冻融。建议使用聚丙烯管以减少肽的吸附。该肽不可用于人体治疗，仅供研究使用。
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| 分子式 |
C144H212N32O24.XC2HF3O2
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| 分子量 |
2775.42 (free base)
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| 相关CAS号 |
D2A21
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| 序列 |
Phe-Ala-Lys-Lys-Phe-Ala-Lys-Lys-Phe-Lys-Lys-Phe-Ala-Lys-Lys-Phe-Ala-Lys-Phe-Ala-Phe-Ala-PheFAKKFAKKFKKFAKKFAKFAFAF
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
ACP1-01
TBD–anchor
m-THPP
IITR01324
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