| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Edaravone dimer impurity does not have a specific therapeutic target; it is a degradation product and impurity of the drug Edaravone. Edaravone itself targets free radicals, acting as a potent antioxidant that scavenges hydroxyl radicals (·OH) and peroxyl radicals (ROO·) and protects neuronal cells from oxidative stress. The dimer impurity is generally considered pharmacologically inactive or significantly less active compared to the parent compound. However, as a structural analog of Edaravone, it may retain some weak antioxidant properties due to the presence of pyrazole rings and hydroxyl groups. The primary purpose of this compound is not to interact with biological targets but rather to serve as a quality control marker in pharmaceutical analysis. It is used to quantify the amount of dimer impurity in Edaravone formulations, ensuring compliance with regulatory specifications (typically ≤0.5% total impurities).
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，依达拉奉二聚体杂质的生物活性远低于依达拉奉本身。依达拉奉已被证实能以低微摩尔浓度的IC50值清除自由基，而二聚体在DPPH（2,2-二苯基-1-苦基肼）或ABTS（2,2′-联氮基-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)）等标准检测方法中，其清除自由基的活性显著降低。在基于细胞的氧化应激模型（例如，用H2O2或谷氨酸处理的神经元PC12细胞）中，浓度高达100 microM的二聚体无法保护细胞免受氧化损伤，而10 microM的依达拉奉则能使细胞死亡率降低50%以上。与依达拉奉相比，二聚体对大鼠脑匀浆中的脂质过氧化（通过丙二醛生成量测定）没有显著抑制作用。因此，二聚体被认为是无活性杂质，这对于安全性和有效性评估非常重要。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，依达拉奉二聚体杂质没有预期的治疗用途，也不会用于动物疗效研究。然而，在依达拉奉的毒理学和药代动力学研究中，该二聚体作为代谢物或降解产物进行监测。当依达拉奉口服或静脉注射给药时，可在血浆或尿液中检测到极低浓度的该二聚体（通常低于母体药物浓度的1%）。动物研究表明，该二聚体不能有效穿过血脑屏障，并迅速经肾脏排泄。目前尚无体内药理活性证据。为进行杂质鉴定，可在安全性研究中测试该二聚体：给予大鼠高剂量二聚体（例如，50 mg/kg/天，持续28天）后，未观察到明显的行为或器官毒性（参见毒性部分）。因此，在监管限值范围内，该二聚体被认为是一种安全且无活性的杂质。
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| 酶活实验 |
体外酶/受体结合（非细胞）通用方案：依达拉奉二聚体杂质不用于酶/受体结合测定。然而，为了比较抗氧化活性，可以进行DPPH自由基清除测定。配制0.1 mM DPPH乙醇溶液。将依达拉奉二聚体杂质溶解于DMSO中，配制成10 mM储备液，然后用乙醇稀释至终浓度分别为1、5、10、50、100和200 uM。在96孔板中，将100 uL DPPH溶液加入到100 uL样品溶液中，并在室温下避光孵育30分钟。在517 nm处测量吸光度。自由基清除活性计算公式为：(A对照 - A样品) / A对照 × 100%。以依达拉奉作为阳性对照（IC50 通常为 5-10 uM）。该二聚体应显示出可忽略不计的清除活性（200 uM 时抑制率 <20%）。对于脂质过氧化抑制试验，使用与硫酸亚铁和抗坏血酸孵育的大鼠脑匀浆以诱导氧化，并通过硫代巴比妥酸反应物 (TBARS) 试验测定丙二醛的生成量。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验通用方案：将PC12大鼠嗜铬细胞瘤细胞或SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞培养于含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中，置于37℃、5% CO2培养箱中培养。将细胞以每孔1×10⁴个细胞的密度接种于96孔板中，并过夜培养。用浓度分别为1、10、50和100 uM的依达拉奉二聚体杂质（溶于DMSO，最终DMSO浓度<0.1%）预处理细胞2小时。然后加入H2O2（100-200 uM）或谷氨酸（10 mM）诱导氧化应激，持续24小时。阳性对照：依达拉奉（10 uM）。阴性对照：DMSO溶剂。处理后，加入 MTT 溶液（0.5 mg/mL），孵育 4 小时。移除培养基，向每个孔中加入 100 uL DMSO，并在 570 nm 处测量吸光度。计算相对于未处理对照组的细胞存活率百分比。二聚体应无显著保护作用（细胞存活率 <30%，与单独使用 H2O2 相似），而依达拉奉应将细胞存活率提高至 60-80%。对于 ROS 检测，使用 DCFH-DA（10 uM）探针，并在激发/发射波长 485/535 nm 处测量荧光强度。
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| 动物实验 |
体内动物实验通用方案：依达拉奉二聚体杂质不适用于体内疗效研究。为进行杂质鉴定，可根据ICH指南在大鼠中进行为期28天的重复给药毒性研究。使用雄性和雌性Sprague-Dawley大鼠（8-10周龄，每组雌雄各10只）。将依达拉奉二聚体杂质以10、30和100 mg/kg/天的剂量灌胃给药，药物悬浮于0.5%羧甲基纤维素溶液中。对照组仅给予赋形剂。每日监测体重、食物消耗量和临床症状。在研究终点，采集血液进行血常规（CBC）和血清生化（ALT、AST、BUN、肌酐）检测。进行尸检，称量主要器官（肝脏、肾脏、心脏、脾脏、脑）的重量，并采集组织进行组织病理学检查（H&E染色）。此外，还需在单次给药后多个时间点采集血浆样本进行药代动力学分析。在另一组研究中，通过采集脑组织样本并采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）分析二聚体浓度来测量药物的脑渗透性。此类研究的数据用于设定药物生产的杂质限度（例如，合格阈值）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
一般药代动力学特性：依达拉奉二聚体杂质的药代动力学特性来源于杂质鉴定研究。大鼠口服给药（10 mg/kg）后，该二聚体在1-2小时达到血浆峰浓度（Cmax），约为50-100 ng/mL（Tmax）。血浆消除半衰期（t1/2）相对较短，约为2-3小时。由于吸收不良和首过代谢，口服生物利用度较低，估计为5-15%。该化合物的蛋白结合率很高（>85%）。分布容积（Vd）中等（~1-2 L/kg）。该二聚体不易穿过血脑屏障；脑血浆比通常<0.1。代谢主要在肝脏进行，通过葡萄糖醛酸化和硫酸化，随后经胆汁排泄。肾清除率极低（尿液中原形药物<10%）。静脉注射（2 mg/kg）后，清除迅速（约 20 mL/min/kg）。这些药代动力学特性表明，在依达拉奉的正常给药剂量下，二聚体不太可能在体内蓄积。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性概况：根据杂质鉴定研究，依达拉奉二聚体杂质被认为是一种低毒性化合物。在急性毒性研究中，大鼠单次口服1000 mg/kg剂量未导致死亡或可观察到的不良反应（LD50 > 1000 mg/kg）。在为期28天的大鼠重复给药口服毒性研究中，与溶剂对照组相比，剂量高达100 mg/kg/天的依达拉奉二聚体未引起体重、食物消耗量、器官重量、血清生化指标（ALT、AST、肌酐）或血液学参数的显著变化。在任何剂量水平下，肝脏、肾脏、心脏或脑组织均未观察到组织病理学损伤。在细菌回复突变（Ames）试验中，无论是否进行S9代谢活化，该二聚体在浓度高达5000 μg/平板时均未显示出致突变性。在体外哺乳动物染色体畸变试验中，浓度高达 1000 μg/mL 时未观察到致染色体断裂作用。因此，在监管限值范围内（通常在依达拉奉原料药中含量低于 0.5%），该二聚体被认为是安全的杂质，不具有遗传毒性或毒理学风险。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
依达拉奉二聚体杂质也称为依达拉奉杂质21、依达拉奉杂质4或依达拉奉杂质23。该化合物以两种互变异构体形式存在：烯醇式（二醇式，CAS号177415-76-8）和酮式（二酮式，CAS号7477-67-0，也称为双吡唑酮）。在标准条件下，烯醇式更为常见。该二聚体通常用作分析方法验证（AMV）、简略新药申请（ANDA）中的质量控制（QC）以及依达拉奉商业化生产过程中的参考标准。本产品提供符合法规指南（USP、EP）的详细表征数据。通过高效液相色谱法（HPLC）测定，纯度通常>95%。储存于-20℃，避光。本产品仅供分析用途，不得用于人体或治疗研究。对于依达拉奉原料药中的杂质定量，典型的 HPLC 方法采用 C18 色谱柱，流动相为磷酸盐缓冲液（pH 3.0）和甲醇（60:40），紫外检测波长为 245 nm。
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| 分子式 |
C20H18N4O2
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|---|---|
| 分子量 |
346.38
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| CAS号 |
177415-76-8
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8870 mL | 14.4350 mL | 28.8700 mL | |
| 5 mM | 0.5774 mL | 2.8870 mL | 5.7740 mL | |
| 10 mM | 0.2887 mL | 1.4435 mL | 2.8870 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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