CMP-sialic acid synthetase (NmCSS)

目录号: V57499 纯度: Specific activity≥100 U/mg protein
CMP-唾液酸合成酶(NmCSS)是一种参与含唾液酸碳水化合物和糖复合物生物合成的必需酶。
CMP-sialic acid synthetase (NmCSS) CAS号: 9067-82-7
产品类别: Glycobiology Enzymes
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
CMP-唾液酸合成酶 (NmCSS) 是一种参与含唾液酸碳水化合物和糖缀合物生物合成的重要酶。CMP-唾液酸合成酶 (NmCSS) 可激活游离唾液酸 (Sia),将其转化为 CMP-唾液酸,后者是所有唾液酸转移酶的唯一供体底物。
CMP-唾液酸合成酶 (NmCSS,EC 2.7.7.43) 是一种参与含唾液酸碳水化合物和糖缀合物生物合成的重要酶。其 CAS 编号为 9067-82-7。它是一种转移酶,催化唾液酸和 CTP 生成 CMP-唾液酸。该酶来源于大肠杆菌和脑膜炎奈瑟菌。
生物活性&实验参考方法
靶点
CMP-sialic acid synthetase targets sialic acid (N-acylneuraminate) and CTP as substrates. It catalyzes the reversible reaction: CTP + N-acylneuraminate ⇌ diphosphate + CMP-N-acylneuraminate. It activates free sialic acid by converting it to CMP-sialic acid, the donor substrate for all sialyltransferases. It does not have a pharmacological target but is an enzymatic tool.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,CMP-唾液酸合成酶能够催化CMP-唾液酸及其衍生物的生成。其活性>1000 U/mL或>10单位/mg蛋白。一个单位定义为在37°C、pH 8.0条件下,每分钟催化生成1 μmol CMP-唾液酸所需的酶量。
体内研究 (In Vivo)
在体内,CMP-唾液酸合成酶是含唾液酸的碳水化合物和糖缀合物生物合成所必需的酶。它参与氨基糖代谢。该酶不用作治疗药物,而是一种研究用酶。它在糖生物学研究中用于合成唾液酸化聚糖。
酶活实验
无细胞酶活性测定法用于检测CMP-唾液酸合成酶:将酶与唾液酸、CTP以及不同浓度的抑制剂或调节剂在测定缓冲液(pH 8.0)中于37°C孵育。终止反应后,采用高效液相色谱法(HPLC)、质谱法或偶联酶法测定CMP-唾液酸的生成量。计算酶活性(U/mg)。
细胞实验
CMP-唾液酸合成酶的体外细胞检测:由于该酶是一种细胞内酶,因此通常不使用细胞进行处理。该酶用于无细胞体系中的聚糖合成。在细胞研究中,通过敲低或过表达该酶,并利用凝集素染色或质谱法检测细胞表面唾液酸化水平,来研究该酶在唾液酸化中的作用。
动物实验
CMP-唾液酸合成酶的体内动物研究:该酶不作为治疗药物用于动物,而是一种研究试剂。目前尚无具体的药理学研究报道。唾液酸代谢紊乱的动物模型可用于研究该酶的作用。
药代性质 (ADME/PK)
CMP-唾液酸合成酶的药代动力学特性:作为一种酶,它不适用于全身给药。因此,不适用全身药代动力学研究。该酶以冻干粉末形式供应,其中含有Tris-HCl和NaCl。储存于-20°C。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
CMP-唾液酸合成酶的毒性:作为一种酶,它通常耐受性良好。在研究环境中,该酶被认为可安全用于实验室。应遵循标准的实验室安全预防措施。本产品不适用于人类治疗用途。
参考文献

[1]. A point-mutation in the C-domain of CMP-sialic acid synthetase leads to lethality of medaka due to protein insolubility. Sci Rep. 2021 Dec 1;11(1):23211.

其他信息
CMP-唾液酸合成酶是一种用于糖生物学研究的酶,用于合成含唾液酸的碳水化合物和糖缀合物。它以大肠杆菌重组酶的形式提供。其主要用途是合成CMP-唾液酸及其衍生物,用于生化和结构研究。目前尚未见临床应用报道。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
CAS号
9067-82-7
外观&性状
Colorless to light yellow liquid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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