Mal-Deferoxamine

别名: Mal-Deferoxamine; 1638156-31-6; N-(3,11,14,22,25,33-hexaoxo-4,10,15,21,26,32-hexaaza-10,21,32- trihydroxytetratriacontane)maleimide; N4-[5-[[4-[[5-(Acetylhydroxyamino)pentyl]amino]-1,4-dioxobutyl]hydroxyamino]pentyl]-N1-[5-[[3-(2,5-dihydro-2,5-dioxo-1H-pyrrol-1-yl)-1-oxopropyl]amino]pentyl]-N1-hydroxybutanediamide; SCHEMBL20682596; 去铁胺-马来酰亚胺;N4-[5-[[4-[[5-(ACETYLHYDROXYAMINO)PENTYL]AMINO]-1,4-DIOXOBUTYL]HYDROXYAMINO]PENTYL]-N1-[5-[[3-(2,5-DIHYDRO-2,5-DIOXO-1H-PYRROL-1-YL)-1-OXOPROPYL]AMINO]PENTYL]-N1-HYDROXYBUTANEDIAMIDE;DEFEROXAMINE-马来酰亚胺
目录号: V58212 纯度: ≥95%
Mal-Deferoxamine 是构建 RDC/放射性核素药物偶联物的连接体。
Mal-Deferoxamine CAS号: 1638156-31-6
产品类别: Others 12
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
Mal-Deferoxamine 是构建 RDC/放射性核素药物偶联物的连接体。
生物活性&实验参考方法
靶点
Bifunctional chelator; In vivo imaging
体外研究 (In Vitro)
锆-89是一种新兴的放射性核素,用于正电子发射断层扫描(PET),特别是用于药代动力学缓慢的生物分子,因为与氟-18和镓-68相比,其半衰期更长,在晚期时间点成像是可行的。去铁胺B(DFO)是一种线性双功能螯合剂(BFC),迄今为止主要用于这种放射性核素,但在稳定性方面存在局限性。我们小组最近报道了具有类似锆-89络合性质的镰刀菌素C(FSC),但其环状结构可能具有更高的稳定性。本研究旨在比较FSC和DFO作为双功能螯合剂对89Zr放射性标记的靶向EGFR的ZEGFR:2377个抗体生物偶联物的影响[1]。
体内研究 (In Vivo)
对Fsc-zegfr:2377和DFO-zegfr:2377进行了放射性标记、体外稳定性、特异性、细胞摄取、受体亲和力、生物分布和microPET CT成像的评估。在室温下,这两种偶联物都被锆-89有效标记,但在85°C的高温下,放射化学产量大幅增加。89Zr FSC ZEGFR:2377和89Zr DFO ZEGFR=2377均显示出显著的特异性、亲和力和缓慢的细胞系依赖性内化。85°C下的放射标记在A431肿瘤异种移植物小鼠中显示了类似的结果,在血液清除率、肿瘤和肝脏摄取方面存在微小差异。相比之下,室温下放射性标记的89Zr-DFO ZEGFR:2377在肿瘤与器官比率方面显示出显著差异。89Zr FSC ZEGFR:2377和89Zr DFO ZEGFR:3377的MicroPET CT成像研究证实了这些发现。总之,我们能够证明FSC是DFO的合适替代品,用于用锆-89放射性标记生物分子。此外,我们的研究结果表明,在较高温度下对DFO偶联物进行89Zr放射性标记可以减少螯合物的结合,从而显著提高肿瘤与器官的比率,从而增强图像对比度[1]。
细胞实验
体外研究[1]
高水平表达EGFR的A431人表皮样癌和MDA468人癌症以及低水平表达EGFR-DU-145人癌症细胞系购自American Type Culture Collection。使用补充有10%v/v胎牛血清(FBS)和1%v/v青霉素-链霉素-谷氨酰胺(PSG)溶液(=完全培养基)的RPMI-1640培养基,在95%空气/5%二氧化碳的加湿气氛中培养细胞。
为了进行结合特异性研究,在实验前3天将细胞接种在6孔板中(A431和MDA-468为4×105个细胞/皿;DU-145为1×106个细胞/碟)。在实验当天,吸出培养基,用2mL不含添加剂的RPMI-1640培养基(=不完全培养基)洗涤所有盘子。通过加入1 mL含有0.5μM阻断剂的完整培养基(西妥昔单抗、His6-ZEGFR:2377抗体分子或贝伐单抗,比放射性配体过量100倍摩尔)来阻断三组培养皿,同时三组培养碟保持畅通,含有1 mL完整培养基,并在室温下放置15分钟。此后,向所有培养皿中加入1 mL放射性配体溶液(5 nM;≈4×105 cpm),并在37°C下孵育细胞。1小时后取出培养基,然后用2毫升不完全培养基进行洗涤。在每个孔中加入500μL胰蛋白酶溶液后,将平板在37°C下保持30分钟以分离细胞。通过加入500μL不完全培养基将细胞悬浮液稀释至1 mL,在广泛再悬浮后,取10μL的等分试样,通过自动细胞计数器 测定细胞数/mL,同时将每皿的其余部分收集在塑料瓶中。用1mL不完全培养基洗涤所有培养皿,将上清液加入塑料瓶中,使用自动伽马计数器测量样品。
对于细胞加工,将A431和MDA468细胞以每皿8×105的密度接种在培养皿中,并放置过夜。此后,用1mL不完全培养基洗涤细胞,并加入1mL完全培养基。最后,将细胞与1 mL放射性配体溶液(在完全培养基中为5 nM)在37°C下孵育1、2、4、8和24小时,一式三份。在指定时间,从培养皿中吸出培养基,用2mL冰冷的不完全培养基洗涤细胞,丢弃上清液。为了确定放射性标记的结合细胞的膜结合量,在RT下处理如下。首先用1mL酸洗缓冲液(0.1M甘氨酸缓冲液,pH 2.5,含4M尿素溶液)孵育细胞15分钟,收集上清液后,重复该步骤1分钟孵育,合并酸洗部分。随后,用1.5mL PBS缓冲液将细胞冲洗两次,并将各组分合并。随后,在PBS缓冲液收集后,向每个培养皿中加入1.5mL磷酸盐缓冲液(pH 8.0),并孵育细胞15分钟。收集磷酸盐缓冲液,然后进行第二次基本洗涤步骤,并合并磷酸盐缓冲液级分。为了确定放射性配体的内化量,通过加入1 mL氢氧化钠溶液(1 M NaOH)裂解细胞,并将培养皿在37°C下孵育至少45分钟。收集NaOH馏分,在不孵育的情况下使用细胞刮刀重复该步骤。将碱性组分合并,取所有组分进行伽马计数器测量。
动物实验
体内研究[1]
在荷瘤异种移植的雌性BALB/c裸鼠(nu/nu)中,采用赛拉嗪/氯胺酮麻醉进行生物分布和成像研究,以最大程度地减少动物痛苦并尽可能减少动物数量。肿瘤异种移植的制备方法为:将1 × 10⁷个A431细胞皮下注射到小鼠右后肢,肿瘤生长2周。生物分布实验中,将小鼠随机分为5组,每组4只。仅有一组小鼠在实验前 24 小时皮下注射 10 mg 西妥昔单抗进行预处理,以确定 89Zr-FSC-ZEGFR:2377 的体内特异性,因为 89Zr-DFO-ZEGFR:2377 的特异性之前已经得到证实。将锆-89 标记的生物偶联物通过尾静脉注射到小鼠体内(每只小鼠 100 μL PBS 中含 40 kBq),并将示踪剂剂量调整为每只小鼠 38 μg,使用未标记的生物偶联物。注射后3小时和24小时测量血液和器官中的放射性分布。
注射后3小时和24小时,使用Triumph三模态系统进行全身正电子发射断层扫描(PET)/计算机断层扫描(CT)成像。每组动物(每个时间点n=2)注射4 MBq锆-89标记的生物偶联物(用非标记示踪剂调整剂量至每只小鼠38 μg),并在放入扫描仪前立即用二氧化碳窒息法处死。CT扫描参数如下:视野(FOV)80 mm;放大倍数1.48;单帧512次投影,扫描时间为2.13分钟,随后进行PET扫描1小时。CT原始文件采用滤波反投影(FBP)重建。PET数据采用OSEM-3D(20次迭代)重建。 CT数据用于散射和衰减校正。PET和CT文件使用PMOD v3.510进行融合和分析。冠状位和矢状位PET-CT图像以RGB颜色标度下的最大强度投影(MIP)形式呈现。
参考文献

[1]. Cyclic versus Noncyclic Chelating Scaffold for 89Zr-Labeled ZEGFR:2377 Affibody Bioconjugates Targeting Epidermal Growth Factor Receptor Overexpression. Mol Pharm. 2018;15(1):175-185.

其他信息
本研究结果表明,FSC 可作为 DFO 的合适替代品,作为 EGFR 靶向亲和体分子(用锆-89 放射性标记)的螯合支架。此外,我们的研究结果表明,高温放射性标记可提高复合物的稳定性,并提高肿瘤/器官比率,从而显著改善 89Zr-DFO 生物偶联物的成像性能。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C32H53N7O11
精确质量
711.38
CAS号
1638156-31-6
PubChem CID
137444673
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
-2.7
tPSA
246
氢键供体(HBD)数目
6
氢键受体(HBA)数目
11
可旋转键数目(RBC)
27
重原子数目
50
分子复杂度/Complexity
1160
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C(N(CCCCCNC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O)O)(=O)CCC(NCCCCCN(C(=O)CCC(NCCCCCN(C(C)=O)O)=O)O)=O
InChi Key
WVJJZZJONDZKRF-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C32H53N7O11/c1-25(40)37(48)21-8-2-5-18-33-26(41)11-13-31(46)38(49)22-9-3-6-19-34-27(42)12-14-32(47)39(50)23-10-4-7-20-35-28(43)17-24-36-29(44)15-16-30(36)45/h15-16,48-50H,2-14,17-24H2,1H3,(H,33,41)(H,34,42)(H,35,43)
化学名
N-[5-[acetyl(hydroxy)amino]pentyl]-N'-[5-[[4-[5-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoylamino]pentyl-hydroxyamino]-4-oxobutanoyl]amino]pentyl]-N'-hydroxybutanediamide
别名
Mal-Deferoxamine; 1638156-31-6; N-(3,11,14,22,25,33-hexaoxo-4,10,15,21,26,32-hexaaza-10,21,32- trihydroxytetratriacontane)maleimide; N4-[5-[[4-[[5-(Acetylhydroxyamino)pentyl]amino]-1,4-dioxobutyl]hydroxyamino]pentyl]-N1-[5-[[3-(2,5-dihydro-2,5-dioxo-1H-pyrrol-1-yl)-1-oxopropyl]amino]pentyl]-N1-hydroxybutanediamide; SCHEMBL20682596;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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