| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Bifunctional chelator; In vivo imaging
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
锆-89是一种新兴的放射性核素,用于正电子发射断层扫描(PET),特别是用于药代动力学缓慢的生物分子,因为与氟-18和镓-68相比,其半衰期更长,在晚期时间点成像是可行的。去铁胺B(DFO)是一种线性双功能螯合剂(BFC),迄今为止主要用于这种放射性核素,但在稳定性方面存在局限性。我们小组最近报道了具有类似锆-89络合性质的镰刀菌素C(FSC),但其环状结构可能具有更高的稳定性。本研究旨在比较FSC和DFO作为双功能螯合剂对89Zr放射性标记的靶向EGFR的ZEGFR:2377个抗体生物偶联物的影响[1]。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
对Fsc-zegfr:2377和DFO-zegfr:2377进行了放射性标记、体外稳定性、特异性、细胞摄取、受体亲和力、生物分布和microPET CT成像的评估。在室温下,这两种偶联物都被锆-89有效标记,但在85°C的高温下,放射化学产量大幅增加。89Zr FSC ZEGFR:2377和89Zr DFO ZEGFR=2377均显示出显著的特异性、亲和力和缓慢的细胞系依赖性内化。85°C下的放射标记在A431肿瘤异种移植物小鼠中显示了类似的结果,在血液清除率、肿瘤和肝脏摄取方面存在微小差异。相比之下,室温下放射性标记的89Zr-DFO ZEGFR:2377在肿瘤与器官比率方面显示出显著差异。89Zr FSC ZEGFR:2377和89Zr DFO ZEGFR:3377的MicroPET CT成像研究证实了这些发现。总之,我们能够证明FSC是DFO的合适替代品,用于用锆-89放射性标记生物分子。此外,我们的研究结果表明,在较高温度下对DFO偶联物进行89Zr放射性标记可以减少螯合物的结合,从而显著提高肿瘤与器官的比率,从而增强图像对比度[1]。
|
| 细胞实验 |
体外研究[1]
高水平表达EGFR的A431人表皮样癌和MDA468人癌症以及低水平表达EGFR-DU-145人癌症细胞系购自American Type Culture Collection。使用补充有10%v/v胎牛血清(FBS)和1%v/v青霉素-链霉素-谷氨酰胺(PSG)溶液(=完全培养基)的RPMI-1640培养基,在95%空气/5%二氧化碳的加湿气氛中培养细胞。 为了进行结合特异性研究,在实验前3天将细胞接种在6孔板中(A431和MDA-468为4×105个细胞/皿;DU-145为1×106个细胞/碟)。在实验当天,吸出培养基,用2mL不含添加剂的RPMI-1640培养基(=不完全培养基)洗涤所有盘子。通过加入1 mL含有0.5μM阻断剂的完整培养基(西妥昔单抗、His6-ZEGFR:2377抗体分子或贝伐单抗,比放射性配体过量100倍摩尔)来阻断三组培养皿,同时三组培养碟保持畅通,含有1 mL完整培养基,并在室温下放置15分钟。此后,向所有培养皿中加入1 mL放射性配体溶液(5 nM;≈4×105 cpm),并在37°C下孵育细胞。1小时后取出培养基,然后用2毫升不完全培养基进行洗涤。在每个孔中加入500μL胰蛋白酶溶液后,将平板在37°C下保持30分钟以分离细胞。通过加入500μL不完全培养基将细胞悬浮液稀释至1 mL,在广泛再悬浮后,取10μL的等分试样,通过自动细胞计数器 测定细胞数/mL,同时将每皿的其余部分收集在塑料瓶中。用1mL不完全培养基洗涤所有培养皿,将上清液加入塑料瓶中,使用自动伽马计数器测量样品。 对于细胞加工,将A431和MDA468细胞以每皿8×105的密度接种在培养皿中,并放置过夜。此后,用1mL不完全培养基洗涤细胞,并加入1mL完全培养基。最后,将细胞与1 mL放射性配体溶液(在完全培养基中为5 nM)在37°C下孵育1、2、4、8和24小时,一式三份。在指定时间,从培养皿中吸出培养基,用2mL冰冷的不完全培养基洗涤细胞,丢弃上清液。为了确定放射性标记的结合细胞的膜结合量,在RT下处理如下。首先用1mL酸洗缓冲液(0.1M甘氨酸缓冲液,pH 2.5,含4M尿素溶液)孵育细胞15分钟,收集上清液后,重复该步骤1分钟孵育,合并酸洗部分。随后,用1.5mL PBS缓冲液将细胞冲洗两次,并将各组分合并。随后,在PBS缓冲液收集后,向每个培养皿中加入1.5mL磷酸盐缓冲液(pH 8.0),并孵育细胞15分钟。收集磷酸盐缓冲液,然后进行第二次基本洗涤步骤,并合并磷酸盐缓冲液级分。为了确定放射性配体的内化量,通过加入1 mL氢氧化钠溶液(1 M NaOH)裂解细胞,并将培养皿在37°C下孵育至少45分钟。收集NaOH馏分,在不孵育的情况下使用细胞刮刀重复该步骤。将碱性组分合并,取所有组分进行伽马计数器测量。 |
| 动物实验 |
体内研究[1]
在荷瘤异种移植的雌性BALB/c裸鼠(nu/nu)中,采用赛拉嗪/氯胺酮麻醉进行生物分布和成像研究,以最大程度地减少动物痛苦并尽可能减少动物数量。肿瘤异种移植的制备方法为:将1 × 10⁷个A431细胞皮下注射到小鼠右后肢,肿瘤生长2周。生物分布实验中,将小鼠随机分为5组,每组4只。仅有一组小鼠在实验前 24 小时皮下注射 10 mg 西妥昔单抗进行预处理,以确定 89Zr-FSC-ZEGFR:2377 的体内特异性,因为 89Zr-DFO-ZEGFR:2377 的特异性之前已经得到证实。将锆-89 标记的生物偶联物通过尾静脉注射到小鼠体内(每只小鼠 100 μL PBS 中含 40 kBq),并将示踪剂剂量调整为每只小鼠 38 μg,使用未标记的生物偶联物。注射后3小时和24小时测量血液和器官中的放射性分布。 注射后3小时和24小时,使用Triumph三模态系统进行全身正电子发射断层扫描(PET)/计算机断层扫描(CT)成像。每组动物(每个时间点n=2)注射4 MBq锆-89标记的生物偶联物(用非标记示踪剂调整剂量至每只小鼠38 μg),并在放入扫描仪前立即用二氧化碳窒息法处死。CT扫描参数如下:视野(FOV)80 mm;放大倍数1.48;单帧512次投影,扫描时间为2.13分钟,随后进行PET扫描1小时。CT原始文件采用滤波反投影(FBP)重建。PET数据采用OSEM-3D(20次迭代)重建。 CT数据用于散射和衰减校正。PET和CT文件使用PMOD v3.510进行融合和分析。冠状位和矢状位PET-CT图像以RGB颜色标度下的最大强度投影(MIP)形式呈现。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
本研究结果表明,FSC 可作为 DFO 的合适替代品,作为 EGFR 靶向亲和体分子(用锆-89 放射性标记)的螯合支架。此外,我们的研究结果表明,高温放射性标记可提高复合物的稳定性,并提高肿瘤/器官比率,从而显著改善 89Zr-DFO 生物偶联物的成像性能。[1]
|
| 分子式 |
C32H53N7O11
|
|---|---|
| 精确质量 |
711.38
|
| CAS号 |
1638156-31-6
|
| PubChem CID |
137444673
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
-2.7
|
| tPSA |
246
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
| 可旋转键数目(RBC) |
27
|
| 重原子数目 |
50
|
| 分子复杂度/Complexity |
1160
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C(N(CCCCCNC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O)O)(=O)CCC(NCCCCCN(C(=O)CCC(NCCCCCN(C(C)=O)O)=O)O)=O
|
| InChi Key |
WVJJZZJONDZKRF-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C32H53N7O11/c1-25(40)37(48)21-8-2-5-18-33-26(41)11-13-31(46)38(49)22-9-3-6-19-34-27(42)12-14-32(47)39(50)23-10-4-7-20-35-28(43)17-24-36-29(44)15-16-30(36)45/h15-16,48-50H,2-14,17-24H2,1H3,(H,33,41)(H,34,42)(H,35,43)
|
| 化学名 |
N-[5-[acetyl(hydroxy)amino]pentyl]-N'-[5-[[4-[5-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoylamino]pentyl-hydroxyamino]-4-oxobutanoyl]amino]pentyl]-N'-hydroxybutanediamide
|
| 别名 |
Mal-Deferoxamine; 1638156-31-6; N-(3,11,14,22,25,33-hexaoxo-4,10,15,21,26,32-hexaaza-10,21,32- trihydroxytetratriacontane)maleimide; N4-[5-[[4-[[5-(Acetylhydroxyamino)pentyl]amino]-1,4-dioxobutyl]hydroxyamino]pentyl]-N1-[5-[[3-(2,5-dihydro-2,5-dioxo-1H-pyrrol-1-yl)-1-oxopropyl]amino]pentyl]-N1-hydroxybutanediamide; SCHEMBL20682596;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。