Phorbol-12,13-didecanoate

别名: 12,13-二癸酸佛波醇;12,13-二癸酸佛波醇的
目录号: V59692 纯度: ≥98%
Phorbol-12,13-didecanoate 是一种抗病毒 TPA 化合物和肿瘤促进剂。
Phorbol-12,13-didecanoate CAS号: 24928-17-4
产品类别: Others 12
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
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产品描述
佛波醇-12,13-二癸酸酯是一种抗病毒TPA化合物和肿瘤促进剂。它可以引起含肌动蛋白结构的变化。
佛波醇-12,13-二癸酸酯是一种合成佛波醇酯,也是一种特性明确、效力强大的蛋白激酶C (PKC) 激活剂。它被广泛认为是一种抗病毒TPA化合物和肿瘤促进剂。作为一种研究工具,它有助于研究PKC介导的信号通路,这些通路调控细胞分化、增殖和基因表达。它也被称为PDD,在各种生物学实验中常与佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯 (PMA) 进行比较。该化合物仅供研究使用,不得用于诊断或治疗用途。
生物活性&实验参考方法
靶点
Phorbol-12,13-didecanoate targets protein kinase C (PKC) family isozymes by binding to the C1 domain, similar to the endogenous activator diacylglycerol (DAG). This binding leads to PKC activation and subsequent downstream signaling cascades. Additionally, the compound is an agonist of the transient receptor potential vanilloid 4 (TRPV4) channel, which may be independent of PKC activation.
体外研究 (In Vitro)
佛波醇-12,13-二癸酸酯(PDD)作为蛋白激酶C(PKC)激活剂,在体外表现出强效活性,其效力与PMA相当。它具有显著的抗病毒活性,能以6.0 +/- 0.9 nM的EC50值抑制基孔肯雅病毒(CHIKV)的复制,且具有较高的选择性指数。此外,它还显示出抗HIV活性,在MT4细胞中对HIV-1的EC50值为1.2 nM,对HIV-2的EC50值为0.2 nM。该化合物能快速且可逆地抑制培养细胞的电耦合,并诱导肌动蛋白结构发生改变。它是一种强效的NO促进剂,并能促进培养肝细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。PDD能显著改变体外早期传代正常人皮肤细胞的生长特性。
体内研究 (In Vivo)
在体内,佛波醇-12,13-二癸酸酯在两阶段皮肤癌变模型中表现出强效的促肿瘤作用。在鸡胚绒毛尿囊膜和兔角膜实验中,它以剂量依赖的方式刺激血管生成,这一特性与其促肿瘤活性密切相关。活性促肿瘤剂TPA和PDD能够激活蛋白激酶C(PKC),并被发现可以刺激血管生成,而4α-佛波醇-12,13-二癸酸酯(非活性立体异构体)则没有这种作用。PDD还能诱导炎症反应,并且已被证明在体内可引起猪空肠的分泌反应。
酶活实验
佛波酯激活蛋白激酶C (PKC) 的体外效力通常使用基于[γ-32P]ATP的激酶活性测定法进行测定。将PKC酶与PDD(0.1 nM-10 uM)和磷脂(例如磷脂酰丝氨酸)在PKC底物肽存在下孵育。终止反应后,测定掺入的放射性。对于结合研究,采用[3H]佛波醇12,13-二丁酸酯 (PDBu) 置换测定法,使用大鼠脑突触体或重组PKC。PDD也用于基于细胞的PKC易位测定。非活性立体异构体4α-佛波醇12,13-二癸酸酯 (4α-PDD) 常用作阴性对照,因为它能结合PKC但不激活PKC。
细胞实验
对于基于细胞的检测,将细胞(例如 Vero 细胞、MT4 细胞、成纤维细胞)培养于多孔板中,并用浓度范围为 1 nM 至 10 uM 的佛波醇-12,13-二癸酸酯 (PDD) 处理不同时间点。通过测量病毒诱导的细胞病变效应或感染 5-7 天后通过 MTT 法检测细胞活力来评估抗病毒活性。通过免疫荧光检测 PKC 从胞质溶胶到细胞膜的转位,或通过蛋白质印迹法检测下游磷酸化靶点(例如 ERK1/2 或 MARCKS)来测量 PKC 的激活。PDD 对人皮肤成纤维细胞增殖的抑制作用是通过 PKC 介导的,其中 β 异构体的 IC50 小于 0.1 nM,而 α 异构体则无活性。
动物实验
在两阶段皮肤癌模型中,佛波醇-12,13-二癸酸酯(PDD)的体内促肿瘤方案已得到充分建立。雌性CD-1小鼠(6-7周龄)背部皮肤剃毛后,首先用亚致癌剂量的DMBA(100-200 μg丙酮溶液,单次局部涂抹)进行初始处理。一周后,通过局部涂抹PDD(2.5-10 μg,通常每周两次,持续20-30周)进行促肿瘤处理。每周计数肿瘤,并通过组织病理学进行确认。血管生成研究采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验,将PDD直接涂抹于CAM上,72小时后评估血管生成情况。TPA和PDD在浓度低至10⁻⁷ M时均具有促肿瘤作用。
药代性质 (ADME/PK)
佛波醇-12,13-二癸酸酯的详细药代动力学数据有限,但研究表明其代谢在不同物种间存在差异。与TPA不同,PDD在啮齿动物成纤维细胞和人肝癌细胞中的降解速度要慢得多,其半衰期可达数天而非数小时。其主要代谢产物是几乎没有活性的佛波醇-12-癸酸酯,以及活性比PDD低17-40倍的佛波醇-13-癸酸酯。作为一种高度亲脂性化合物(LogP ≈ 7.3),它很容易穿过细胞膜,预计具有显著的组织分布和皮肤渗透性。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
佛波醇-12,13-二癸酸酯被归类为强效皮肤刺激物、肿瘤促进剂和疑似致癌物。根据安全数据表,它具有急性毒性,危险说明包括H300(吞咽致命)、H310(皮肤接触致命)和H330(吸入致命)。吸入后可能引起过敏或哮喘症状或呼吸困难(H334),并被怀疑具有致癌性(H351)。其非活性立体异构体4α-佛波醇-12,13-二癸酸酯(4α-PDD)不具有肿瘤促进作用,也不会激活蛋白激酶C(PKC)。处理该化合物时必须极其谨慎,并使用适当的个人防护装备。
参考文献
[1]. Enomoto T, et al. Tumor promoters cause a rapid and reversible inhibition of the formation and maintenance of electrical cell coupling in culture. Proc Natl Acad Sci U S A. 1981 Sep;78(9):5628-32.
其他信息
佛波醇-12,13-二癸酸酯是一种蛋白激酶C (PKC) 激活剂和肿瘤促进剂,它能以高亲和力与PKC的C1结构域结合,模拟二酰甘油 (DAG) 的作用。作为炎症剂,它的效力比PMA强,但作为肿瘤促进剂的效力较弱。该化合物也是TRPV4通道的激活剂,其无活性的立体异构体4α-PDD是一种选择性TRPV4激动剂。其抗病毒活性可能通过激活PKC介导,从而干扰病毒复制。佛波醇-12,13-二癸酸酯尚未获准用于临床。该产品仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C40H64O8
分子量
672.93
精确质量
672.46
CAS号
24928-17-4
PubChem CID
452543
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
密度
1.14g/cm3
沸点
734.2ºC at 760 mmHg
闪点
212.4ºC
蒸汽压
6.92E-25mmHg at 25°C
折射率
1.546
LogP
7.313
tPSA
130.36
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
21
重原子数目
48
分子复杂度/Complexity
1220
定义原子立体中心数目
8
SMILES
CCCCCCCCCC(OC1C(C)C2(O)C3C=C(C)C(=O)C3(O)CC(=CC2C2C(C)(C)C12OC(CCCCCCCCC)=O)CO)=O
InChi Key
DGOSGFYDFDYMCW-MWRBZVGOSA-N
InChi Code
InChI=1S/C40H64O8/c1-7-9-11-13-15-17-19-21-32(42)47-36-28(4)39(46)30(24-29(26-41)25-38(45)31(39)23-27(3)35(38)44)34-37(5,6)40(34,36)48-33(43)22-20-18-16-14-12-10-8-2/h23-24,28,30-31,34,36,41,45-46H,7-22,25-26H2,1-6H3/t28-,30+,31-,34-,36-,38-,39-,40-/m1/s1
化学名
[(1S,2S,6R,10S,11R,13S,14R,15R)-13-decanoyloxy-1,6-dihydroxy-8-(hydroxymethyl)-4,12,12,15-tetramethyl-5-oxo-14-tetracyclo[8.5.0.02,6.011,13]pentadeca-3,8-dienyl] decanoate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.4860 mL 7.4302 mL 14.8604 mL
5 mM 0.2972 mL 1.4860 mL 2.9721 mL
10 mM 0.1486 mL 0.7430 mL 1.4860 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们