X-press Tag Peptide

目录号: V59907 纯度: ≥98%
X-press 标签肽是一种 N 末端前导肽。
X-press Tag Peptide CAS号: 339988-16-8
产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
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  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
X-press标签肽是一种N端前导肽。抗Xpress抗体可以识别Xpress表位。因此,该肽可用于纯化X-press标签融合蛋白。
X-press标签肽(CAS号:339988-16-8)是一种短的化学合成肽序列,设计用作蛋白质纯化和检测的N端前导肽标签。它包含一个用于金属螯合亲和层析的多组氨酸序列、一个可被Anti-Xpress抗体识别的Xpress表位(一个特异性的8个氨基酸序列,DLYDDDDK)以及一个肠激酶切割位点(DDDDK),用于从目标蛋白上精确去除该标签。该标签来源于噬菌体T7基因10蛋白的一部分。该肽是一种用途广泛的分子生物学工具,可用于促进在各种表达系统(包括大肠杆菌、昆虫和哺乳动物细胞)中表达的重组融合蛋白的分离和表征。其氨基酸序列通常为Asp-Leu-Tyr-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys。
生物活性&实验参考方法
靶点
The X-press Tag Peptide itself is a peptide sequence, not a drug; therefore, it does not have a pharmacological target. Its molecular "target" is the specific binding site on the Anti-Xpress antibody (e.g., a monoclonal antibody raised against the Xpress epitope). The polyhistidine sequence targets nickel- or cobalt-charged nitrilotriacetic acid (NTA) resin used in immobilized metal affinity chromatography (IMAC). The enterokinase cleavage site is a substrate for the protease enterokinase, which recognizes and specifically cleaves after the lysine residue in the DDDDK sequence. This tag is used as a molecular tool to capture and purify proteins of interest, enabling the study of protein function, interactions, and structure without directly targeting a biological pathway.
体外研究 (In Vitro)
X-press标签肽并非药物,因此不具备传统意义上的药理“活性”。其活性体现在其与抗Xpress抗体和金属亲和树脂的结合能力上。与抗Xpress抗体的结合具有高度特异性,可用于Western印迹、ELISA、免疫沉淀(IP)和免疫荧光(IF)等实验中Xpress标签融合蛋白的检测和纯化。多组氨酸区域对镍离子和钴离子具有高亲和力,可在天然或变性条件下高效地一步纯化标记蛋白。该肽因其极低的非特异性结合,被认为在其预期用途中具有极高的有效性。它以高纯度(通常>95%)供应,并用于构建蛋白质表达实验的标准对照。
体内研究 (In Vivo)
作为一种研究工具,X-press标签肽并未在动物模型中进行疗效测试。由于它并非作为治疗药物用于动物,因此其“体内活性”并不具有意义。然而,该标签可用于研究体内递送的重组蛋白的表达。例如,可以将编码Xpress标签蛋白的病毒载体注射到小鼠体内,然后使用抗Xpress抗体检测特定组织中该蛋白的表达。该标签本身是惰性的,不会显著影响靶蛋白的生物活性或分布。此外,该肽还可用作ELISA和其他免疫测定中的封闭试剂,以降低使用抗Xpress抗体时的非特异性背景。
酶活实验
作为一种肽序列,X-press Tag 肽不用于传统的酶/受体结合分析。其与抗体的相互作用采用标准免疫分析方案进行评估。对于 ELISA,该肽直接包被于 96 孔板,或与载体蛋白(例如牛血清白蛋白 (BSA))偶联。封闭后,将孔板与不同浓度的 Anti-Xpress 抗体(一抗)在室温下孵育 1-2 小时。洗涤后,加入 HRP 标记的二抗,并用 TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)等底物显色。在 450 nm 处读取吸光度以生成结合曲线。表面等离子共振 (SPR) 可用于测量该肽与 Anti-Xpress 抗体的结合亲和力 (KD)。纯度和序列通过高效液相色谱 (HPLC) 和质谱 (MS) 进行确认。
细胞实验
X-press标签肽不直接添加到活细胞中;它用于检测细胞中表达的带标签蛋白。典型的细胞实验流程包括用编码包含X-press标签的融合蛋白的质粒或病毒载体转染或转导细胞。24-72小时后,裂解细胞,并使用金属亲和树脂(例如Ni-NTA琼脂糖)从细胞裂解液中纯化X-press标签蛋白。然后使用抗Xpress抗体通过SDS-PAGE和Western印迹分析纯化蛋白的存在和纯度。或者,将细胞固定、透化,并与抗Xpress抗体孵育,随后与荧光标记的二抗孵育,以通过荧光显微镜观察带标签蛋白的亚细胞定位。在这些实验中,该肽本身用作封闭剂或竞争剂。
动物实验
目前尚无使用X-press标签肽作为给药物质的体内动物实验。该肽用于研究动物体内蛋白质的表达和定位。典型的鼠类实验方案包括通过尾静脉注射或气管内给药,注射编码目标Xpress标签蛋白的重组腺相关病毒(AAV)或慢病毒。2-4周后,处死小鼠并收集组织(例如肺、肝、脑)。将组织匀浆后,使用Ni-NTA琼脂糖进行Xpress标签纯化,或进行SDS-PAGE电泳,然后用抗Xpress抗体进行Western blotting,以确认重组蛋白的表达。定位方面,使用抗Xpress抗体作为一抗,对组织切片进行免疫组织化学(IHC)染色。该肽可用作封闭剂,以验证这些检测中抗体的特异性。
药代性质 (ADME/PK)
X-press Tag肽是一种合成肽,其药代动力学特性尚未进行药物开发研究。作为一种肽,如果全身给药,它会被血液和组织中的蛋白酶迅速降解。其血浆半衰期很短,可能只有几分钟。由于含有多个天冬氨酸残基,该肽具有亲水性,并且在pH值接近中性的水性缓冲液(例如PBS,即磷酸盐缓冲液)中可溶。由于其分子量小且缺乏亲脂性,因此无法透过细胞膜。长期储存时,冻干粉末应储存在-20℃并防潮。溶液应分装后储存在-80℃,最长可保存六个月,以避免反复冻融循环,因为反复冻融循环会导致肽降解。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
X-press Tag肽的毒性尚未得到广泛研究,因为它并非供人类服用的药物。作为一种由天然氨基酸组成的短肽,它通常被认为毒性极低。在标准实验室使用中,它被视为低危害化学品。然而,与所有合成肽一样,应采取预防措施,避免吸入、摄入和皮肤接触,因为它可能具有轻微刺激性。在典型实验中使用的浓度(纳克至微克/毫升)下,该肽不被认为具有遗传毒性或细胞毒性。它仅供研究使用,不得用于任何临床、诊断或治疗用途。处置应按照当地关于非危险生物废物的法规进行。
其他信息
X-press标签肽(序列:DLYDDDDK)是一种广泛应用于分子生物学的亲和标签。它以合成肽的形式商业化销售,常用于使用Anti-Xpress抗体的实验中作为标准品或对照。Xpress表位是Invitrogen(现为Thermo Fisher Scientific)的注册商标,该标签包含在其专有的表达载体中,例如pTrcHis、pBAD/His和pRSET系列。该标签具有双重优势:多聚组氨酸部分可实现快速纯化,而Xpress表位则可实现灵敏检测。肠激酶切割位点允许根据需要从目标蛋白中去除标签,以便研究天然蛋白。对于需要稳定表达和纯化重组蛋白系统的研究人员而言,本产品是必不可少的工具。本产品仅供研究用途,未经批准用于人体治疗或诊断。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C41H59N9O20
分子量
997.96
精确质量
997.388
CAS号
339988-16-8
PubChem CID
10290593
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.455±0.06 g/cm3(Predicted)
沸点
1548.9±65.0 °C(Predicted)
LogP
0
tPSA
500
氢键供体(HBD)数目
16
氢键受体(HBA)数目
22
可旋转键数目(RBC)
33
重原子数目
70
分子复杂度/Complexity
1910
定义原子立体中心数目
8
SMILES
CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N
InChi Key
FWMNKRVHBHKBMO-VXBMVYAYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C41H59N9O20/c1-18(2)11-23(45-34(62)21(43)13-29(52)53)35(63)46-24(12-19-6-8-20(51)9-7-19)36(64)47-26(15-31(56)57)38(66)49-28(17-33(60)61)40(68)50-27(16-32(58)59)39(67)48-25(14-30(54)55)37(65)44-22(41(69)70)5-3-4-10-42/h6-9,18,21-28,51H,3-5,10-17,42-43H2,1-2H3,(H,44,65)(H,45,62)(H,46,63)(H,47,64)(H,48,67)(H,49,66)(H,50,68)(H,52,53)(H,54,55)(H,56,57)(H,58,59)(H,60,61)(H,69,70)/t21-,22-,23-,24-,25-,26-,27-,28-/m0/s1
化学名
(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-carboxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]hexanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O: ≥ 100 mg/mL (100.20 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.0020 mL 5.0102 mL 10.0204 mL
5 mM 0.2004 mL 1.0020 mL 2.0041 mL
10 mM 0.1002 mL 0.5010 mL 1.0020 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们