| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The molecular target of Asfotase alfa is the alkaline phosphatase (ALP) deficiency that underlies hypophosphatasia. Hypophosphatasia (HPP) is caused by mutations in the ALPL gene, leading to deficient activity of tissue-nonspecific alkaline phosphatase (TNAP). Asfotase alfa replaces the missing TNAP enzyme, which is essential for bone mineralization. The deca-aspartate domain targets the fusion protein to the bone microenvironment. The mechanism involves the hydrolysis of inorganic pyrophosphate (PPi), an inhibitor of mineralization, thereby promoting physiological bone mineralization.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，Asfotase alfa (ENB-0040) 是一种靶向骨的碱性磷酸酶。它具有与天然 TNAP 酶相似的酶活性，能够催化正磷酸单酯和水转化为醇和正磷酸盐。其十天冬氨酸 (D10) 结构域使其能够与骨中的羟基磷灰石结合，并且对钙化组织具有更高的亲和力。研究表明，Asfotase alfa 能够水解无机焦磷酸盐 (PPi) 和磷酸吡哆醛 (PLP)，这两种物质是 TNAP 的天然底物，从而在体外促进矿化过程。
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| 体内研究 (In Vivo) |
阿斯福他酶α（0.5-8.2 mg/kg；皮下注射，每日一次，持续43天）的剂量反应关系为HPP的药理疗效提供了重要的证据[1]。
在体内，Asfotase alfa 可提高 Akp2-/- 基因敲除小鼠（一种严重的婴儿低磷酸酯酶症模型）的存活率、骨矿化程度和骨长度，并预防足部、肋骨、下肢和颌骨的矿化缺陷。在 Akp2-/- 小鼠中，以 0.5、2.0 或 8.2 mg/kg 的剂量（皮下注射，每日一次，持续 43 天）给予 Asfotase alfa 治疗，结果显示存活率、体重、骨长度和矿化程度均呈剂量依赖性，表明其具有显著疗效。 |
| 酶活实验 |
阿司匹林α的标准生化检测方法是碱性磷酸酶（ALP）活性测定。该测定使用显色底物，例如对硝基苯磷酸酯（pNPP）。反应混合物包含阿司匹林α（或组织样品）、pNPP和适当的缓冲液（例如，1 M二乙醇胺，pH 9.8，含0.5 mM氯化镁）。反应在37℃下孵育15-30分钟。通过405 nm处的吸光度测量对硝基苯酚（pNP）的生成量。一个ALP活性单位定义为每分钟水解1 umol pNPP所需的酶量。该测定用于确认药物的酶活性。
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| 细胞实验 |
Asfotase alfa 的体外细胞检测是一种利用原代成骨细胞或间充质干细胞 (MSCs) 进行的矿化检测。将细胞在含或不含 Asfotase alfa (0.1-10 ug/mL) 的成骨分化培养基（含 β-甘油磷酸钠和抗坏血酸）中培养 14-21 天。采用茜素红 S (ARS) 或 von Kossa 染色法评估矿化情况，以定量钙沉积。或者，也可以通过酶法测定培养基中焦磷酸盐 (PPi) 的水解情况，并通过 qPCR 检测骨矿化标志物（例如骨钙素、Osterix、Runx2）的表达。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： Akp2−/− 基因敲除小鼠[1]
剂量： 0.5、2.0 和 8.2 mg/kg 给药途径： 皮下注射；每日一次，持续 43 天 实验结果： 剂量依赖性地提高了小鼠的存活率、骨矿化程度，并预防了足部、肋骨、下肢和颌骨的矿化缺陷，延长了中位生存期，增加了体重和骨长度。每日剂量与达到健康体重之间存在明显的相关性，ED80（可预防 80% 小鼠骨缺陷的剂量）在这些部位分别为 3.2、2.8 和 2.9 mg/kg/天。所有治疗组的尿液中焦磷酸盐 (PPi) 浓度均持续升高。 本研究在婴儿低磷酸酯酶症的Akp2-/-基因敲除小鼠模型中评估了Asfotase alfa的体内疗效。新生Akp2-/-小鼠会出现严重的骨骼畸形和癫痫发作，并在14天内死亡。治疗在出生时或出生后24小时内开始。Asfotase alfa的给药剂量分别为0.5、2.0和8.2 mg/kg，每日一次皮下注射，持续43天。终点指标包括存活率、中位生存时间、体重、股骨长度（通过X光或卡尺测量）以及通过微型CT测量的骨矿化程度（骨体积/总体积、小梁厚度、骨矿物质密度）。采用von Kossa染色或Goldner三色染色对骨切片进行组织学染色，以评估矿化程度。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
阿斯福他酶α是一种大型糖蛋白（分子量约为161,123 Da），分子式为C7108H11008N1968O2206S56。它通过皮下注射给药。在人体内，其血浆半衰期为5至20天，具体数值取决于年龄和给药方案。在Akp2-/-小鼠中，每日一次皮下注射8.2 mg/kg，持续43天。该药物旨在靶向骨骼，从而在作用部位实现长期滞留。体外实验表明，该化合物在推荐的储存条件（2-8℃）下稳定，不应冷冻。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
阿斯福他酶α已在低磷血症的临床试验和上市后监测中进行了评估。临床试验中最常见的不良反应（发生率≥10%）包括注射部位反应（例如瘀伤、疼痛、肿胀、红斑）、发热、头痛、呕吐、低磷血症和感觉异常。部分患者报告了严重的超敏反应（过敏性休克）。注射部位也观察到了脂肪代谢障碍（局部脂肪丢失或脂肪堆积）。动物研究表明，该药物总体耐受性良好，在治疗剂量下未报告明显的全身毒性。该药物由医护人员给药。
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| 参考文献 |
[1]. Yadav MC, et al. Dose response of bone-targeted enzyme replacement for murine hypophosphatasia. Bone. 2011 Aug;49(2):250-6.
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| 其他信息 |
阿司匹林α（Enb-0040）以商品名Strensiq（Alexion Pharmaceuticals公司）获批用于治疗围产期、婴儿期和青少年期发病的低磷酸酯酶症（HPP）。该药于2015年获得美国食品药品监督管理局（FDA）的突破性疗法认定，并在美国获批上市，2016年在欧盟获批上市。它是一种首创的骨靶向酶替代疗法，旨在解决低磷酸酯酶症导致的碱性磷酸酶（ALP）缺乏的根本原因。该药已广泛应用于HPP的临床治疗，并显著改善了患儿的预后。其CAS注册号为1174277-80-5。
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| CAS号 |
1174277-80-5
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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