| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
6-Hydroxy Melatonin-d4 is the stable isotope-labeled version of 6-Hydroxy Melatonin, which is the major metabolite of the pineal hormone melatonin. The unlabeled compound, 6-Hydroxy Melatonin, acts primarily on the same molecular targets as melatonin. These include the melatonin receptors MT1 and MT2, which are G protein-coupled receptors (GPCRs) located in the suprachiasmatic nucleus (SCN) of the brain and various peripheral tissues. Binding of the unlabeled compound to these receptors regulates circadian rhythms and sleep-wake cycles. Unlike melatonin, however, 6-Hydroxy Melatonin has a lower binding affinity. Additionally, 6-Hydroxy Melatonin exerts strong antioxidant activity by directly scavenging free radicals. It has also been shown to interact with the nuclear receptor RORalpha (retinoid-related orphan receptor alpha), contributing to its anti-inflammatory effects. The labeled version is used to quantify these activities.
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| 体外研究 (In Vitro) |
药物化合物中通常包含碳、氢和其他元素的稳定重同位素，主要用作药物研发过程中的定量示踪剂。由于氘代可能影响药物的药代动力学和代谢特性，因此值得关注[1]。
6-羟基褪黑素-d4的体外生物活性被认为与其未标记的对应物6-羟基褪黑素相同。在某些系统中，6-羟基褪黑素表现出强大的自由基清除能力和抗氧化活性，其活性与母体化合物褪黑素相当甚至更强。在无细胞化学分析（例如DPPH、ABTS）中，它能有效中和活性氧（ROS），IC₅0值在低微摩尔范围内。在神经元细胞培养物（例如SH-SY5Y、PC12细胞）中，用6-羟基褪黑素（10-100 uM）处理可保护细胞免受MPP⁺或过氧化氢（H2O2）等神经毒素引起的氧化损伤。这种神经保护作用归因于其上调抗氧化酶（如超氧化物歧化酶 (SOD) 和谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)）表达的能力。然而，研究表明，6-羟基褪黑素在铜离子存在下可通过氧化还原循环机制造成氧化性DNA损伤。6-羟基褪黑素-d4 被用作内标，以便在体外研究中准确定量该代谢物。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于6-羟基褪黑素-d4是一种内标物，因此其体内生物活性尚未得到直接研究。然而，其未标记的母体化合物6-羟基褪黑素已在动物模型中进行了研究。在大鼠中，6-羟基褪黑素能够穿过血脑屏障，并显示出与褪黑素类似的神经保护作用。在缺血再灌注脑损伤的啮齿动物模型中，腹腔注射6-羟基褪黑素（10-20 mg/kg）可显著减少梗死体积和神经功能缺损，与对照组相比差异具有统计学意义。这种作用是通过降低氧化应激标志物（MDA、8-OHdG）和抑制促炎细胞因子（IL-1β、TNF-α）来实现的。在帕金森病模型中，6-羟基褪黑素还能减少多巴胺能神经元的丢失。作为褪黑素的主要尿代谢产物，其排泄水平可作为内源性褪黑素生成的可靠生物标志物。在这些研究中，6-羟基褪黑素-d4 用于精确量化该代谢产物的水平。
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| 酶活实验 |
一种通用的非细胞检测方法，即利用同位素稀释质谱法，将6-羟基褪黑素-d4用作内标。首先，配制浓度为1 mg/mL的未标记6-羟基褪黑素甲醇标准储备液。配制相同浓度的内标（6-羟基褪黑素-d4）储备液。通过在空白基质（例如，经活性炭处理的人血清）中加入未标记的分析物，配制浓度范围为0.1 ng/mL至500 ng/mL的校准标准溶液。向每个校准标准溶液中加入固定浓度的内标（例如，20 ng/mL）。同时，配制空白和双空白样品。样品制备时，将200 uL校准标准溶液与400 uL含0.1%甲酸的乙腈混合，以沉淀蛋白质。涡旋振荡后，以 10,000 g 离心 5 分钟。将上清液转移至自动进样器小瓶中。采用 LC-MS/MS 正离子模式进行分析，使用 MRM 离子对：6-羟基褪黑素的 m/z 251.1 → 174.1，以及 d4 内标的 m/z 255.1 → 178.1。绘制峰面积比（分析物/内标）与标称浓度的关系曲线，生成校准曲线。
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| 细胞实验 |
标准的体外细胞实验方案中，未标记的6-羟基褪黑素的抗氧化活性测定是在神经元细胞系中进行的。将SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞培养于添加了10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中。将细胞以每孔1×10⁴个细胞的密度接种于96孔板中，并使其贴壁24小时。用不同浓度的未标记6-羟基褪黑素（1-200 uM）预处理细胞2小时。然后，将细胞暴露于氧化应激诱导剂（例如300 uM H2O2）中4小时。使用 MTT 法评估细胞活力：向每个孔中加入 10 uL MTT 溶液（5 mg/mL），于 37℃ 孵育 3 小时，然后移除培养基，加入 100 uL DMSO 溶解甲臜晶体。在 570 nm 处测量吸光度。计算相对于仅含 H2O2 的对照组的细胞活力百分比。使用 6-羟基褪黑素-d4 作为内标，对细胞培养基进行 LC-MS 分析，以验证药物的准确浓度及其在孵育期间的稳定性。
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| 动物实验 |
典型的体内实验方案是使用大鼠脑缺血再灌注（I/R）损伤模型来研究未标记的6-羟基褪黑素。实验采用雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）。通过大脑中动脉闭塞（MCAO）法诱导脑缺血90分钟，随后进行24小时的再灌注。将大鼠随机分为三组（每组n=8-10）：假手术组（仅手术，不进行闭塞）、载体对照组（I/R + 生理盐水）和治疗组（I/R + 未标记的6-羟基褪黑素，剂量分别为5、10或20 mg/kg，在再灌注开始后立即腹腔注射）。再灌注24小时后，进行神经功能缺损评分（例如，Zea Longa评分）。然后，处死动物，采集血液，并取出脑组织。使用TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）染色法测量梗死体积。检测脑匀浆中的氧化应激标志物（MDA、GSH）和炎症细胞因子（IL-6、TNF-α）。使用6-羟基褪黑素-d4作为LC-MS分析的内标，以准确定量血液和脑组织中给药代谢物的水平。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
6-羟基褪黑素-d4 是一种稳定同位素标记的内标。其母体化合物 6-羟基褪黑素的药代动力学与其前体褪黑素相同。6-羟基褪黑素是褪黑素的主要代谢产物，由细胞色素 P450 酶 CYP1A2 在肝脏中代谢生成。在人体内，外源性褪黑素的半衰期很短，约为 30-50 分钟，并迅速转化为 6-羟基褪黑素。生成的 6-羟基褪黑素随后与硫酸盐或葡萄糖醛酸结合，并经尿液排出体外。血液中 6-羟基褪黑素的浓度通常远高于母体褪黑素。在健康个体中，尿液中6-羟基褪黑激素的排泄量与母体激素的循环水平高度相关，使其成为一种可靠的生物标志物。标记的6-羟基褪黑激素-d4对于在药代动力学研究中准确评估褪黑激素的生成和清除至关重要。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
6-羟基褪黑素-d4 是一种稳定同位素标记化合物，用作分析标准品，而非治疗药物。其未标记的母体化合物 6-羟基褪黑素的毒性通常被认为极低，因为它是褪黑激素的主要内源性代谢产物。褪黑素及其代谢产物在作为膳食补充剂以中等剂量使用时，通常被认为是安全的（GRAS）。在毒理学研究中，给动物服用高剂量褪黑素（例如 200 mg/kg）并未导致显著的死亡率。预计 6-羟基褪黑素的急性毒性也同样很低。然而，研究人员应注意，在无细胞体系中，6-羟基褪黑素在铜离子存在的情况下已被证明会导致氧化性 DNA 损伤。它不适用于人体，仅供研究用途。应遵循实验室处理化学品的常规预防措施，包括使用个人防护装备，如手套和护目镜。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
6-羟基褪黑素-d4是6-羟基褪黑素的稳定同位素标记（氘代）版本，后者是松果体激素褪黑素的主要代谢产物。它仅供研究使用，是使用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量分析生物体液（血浆、尿液、脑脊液）中6-羟基褪黑素的关键内标。未标记的6-羟基褪黑素是褪黑素生成和昼夜节律状态的重要生物标志物。它常用于临床研究，以评估睡眠障碍、松果体功能以及基于褪黑素的疗法的疗效。此外，6-羟基褪黑素具有内在的抗氧化和自由基清除特性，并已被研究其潜在的神经保护作用。氘代标准品也可用于毒理学研究和药代动力学分析。
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| 分子式 |
C13H12D4N2O3
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|---|---|
| 分子量 |
252.30
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| 精确质量 |
252.141
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| CAS号 |
69533-61-5
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| PubChem CID |
71749111
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
1.951
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| tPSA |
74.35
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
298
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[2H]C([2H])(C1=CNC2=CC(=C(C=C21)OC)O)C([2H])([2H])NC(=O)C
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| InChi Key |
OMYMRCXOJJZYKE-KHORGVISSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H16N2O3/c1-8(16)14-4-3-9-7-15-11-6-12(17)13(18-2)5-10(9)11/h5-7,15,17H,3-4H2,1-2H3,(H,14,16)/i3D2,4D2
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| 化学名 |
N-[1,1,2,2-tetradeuterio-2-(6-hydroxy-5-methoxy-1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.9635 mL | 19.8177 mL | 39.6354 mL | |
| 5 mM | 0.7927 mL | 3.9635 mL | 7.9271 mL | |
| 10 mM | 0.3964 mL | 1.9818 mL | 3.9635 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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