5-Bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl phosphate sodium

别名: 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐; 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸二钠盐; 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸二钠水合物;5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸二钠盐[生物化学用];5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸钠
目录号: V66103 纯度: ≥98%
5-溴-4-氯-1H-吲哚-3-基磷酸钠广泛用作生物化学和分子生物学中磷酸酶测定的底物。
5-Bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl phosphate sodium CAS号: 102185-33-1
产品类别: Biochemical Assay Reagents
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
100mg
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产品描述
5-溴-4-氯-1H-吲哚-3-基磷酸钠广泛用作生物化学和分子生物学中磷酸酶活性测定的底物。该化合物可被磷酸酶转化为一种黄色化合物,可通过分光光度法或荧光法轻松测定。此外,它还可用作酶促反应中的有效试剂以及研究信号转导通路的工具。
5-溴-4-氯-1H-吲哚-3-基磷酸钠(BCIP钠)是一种广泛使用的碱性磷酸酶(ALP)显色底物。其分子式为C8H4BrClNO4P·2Na,分子量为433.85。经ALP脱磷酸化后,BCIP钠二聚化形成蓝紫色沉淀,可用于印迹和组织化学检测。
生物活性&实验参考方法
靶点
Alkaline phosphatase (ALP) is the primary molecular target. The phosphate group on BCIP is specifically hydrolyzed by ALP, releasing the indolyl intermediate which then oxidizes to form a colored product. No other phosphatases typically produce this reaction.
体外研究 (In Vitro)
对于生命科学相关研究而言,5-溴-4-氯-1H-吲哚-3-基磷酸钠是一种可作为有机物质或生物材料的生化试剂。
在无细胞检测中,BCIP 对 ALP 具有高度的灵敏度和特异性。在 37°C 的 Tris 缓冲液(pH 9.0-9.5)中,BCIP 可被 ALP 快速去磷酸化(可检测到低至 0.01 U/mL 的活性)。该反应产生深蓝色沉淀(λmax 615 nm),可通过分光光度法或目测法进行测量。
体内研究 (In Vivo)
BCIP不用于活体动物,因此不具有体内活性。它是一种用于体外组织化学和印迹分析的试剂。未见全身活性报道。
酶活实验
将固定有ALP偶联抗体的硝酸纤维素膜与BCIP(0.15 mg/mL)和NBT(0.3 mg/mL)在碱性磷酸酶缓冲液(100 mM Tris-HCl pH 9.5,100 mM NaCl,5 mM MgCl2)中于室温避光孵育5-30分钟。反应用水洗涤终止,产生紫色条带。
细胞实验
细胞染色时,将固定在载玻片上的细胞或组织切片与ALP标记的一抗或二抗孵育,洗涤后,再与BCIP/NBT底物溶液(制备方法同上)于37℃孵育10-60分钟。阳性染色表现为蓝紫色沉淀。可使用核固红进行复染。
动物实验
目前尚无针对BCIP的体内动物实验方案,它主要用于离体组织切片染色。对于全组织染色,胚胎或组织需先进行固定、透化处理,然后与ALP标记的探针孵育,再用BCIP/NBT溶液染色数小时至过夜,最后进行透明化和成像。
药代性质 (ADME/PK)
由于BCIP并非全身给药,因此其药代动力学特性不适用。BCIP是一种不稳定的底物;储备液(10 mg/mL,溶于DMF)应储存于-20℃并避光。碱性缓冲液中的工作液可稳定保存数小时。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
一般毒性:BCIP 的急性毒性较低。本产品对眼睛和皮肤有刺激性。安全数据表建议避免吸入或吞食。应采取标准的实验室安全防护措施(手套、护目镜)。本品不可食用。
其他信息
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BCIP 通常与 NBT(硝基蓝四唑)联用,构成 BCIP/NBT 系统,用于蛋白质印迹、Southern 印迹、免疫组织化学和原位杂交。该反应产生稳定的、不溶的紫色沉淀,且不会褪色。本产品仅供科研使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C8H4BRCLNNA2O4P
分子量
370.43
精确质量
368.854
CAS号
102185-33-1
PubChem CID
6097197
外观&性状
White to off-white solid powder
沸点
580.2ºC at 760 mmHg
熔点
300°C
闪点
304.7ºC
蒸汽压
2.65E-14mmHg at 25°C
LogP
3.931
tPSA
98.02
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
18
分子复杂度/Complexity
303
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC(=C(C2=C1NC=C2OP(=O)([O-])[O-])Cl)Br.[Na+].[Na+]
InChi Key
OAZUOCJOEUNDEK-UHFFFAOYSA-L
InChi Code
InChI=1S/C8H6BrClNO4P.2Na/c9-4-1-2-5-7(8(4)10)6(3-11-5)15-16(12,13)14;;/h1-3,11H,(H2,12,13,14);;/q;2*+1/p-2
化学名
disodium;(5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl) phosphate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.6996 mL 13.4978 mL 26.9957 mL
5 mM 0.5399 mL 2.6996 mL 5.3991 mL
10 mM 0.2700 mL 1.3498 mL 2.6996 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们