| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Protein kinase C (PKC), particularly the conventional (cPKC: alpha, beta, gamma) and novel (nPKC: delta, ε, η, θ) isoforms, is the primary molecular target. DHG mimics the natural DAG second messenger, binding to the C1 domain of PKC with an affinity in the micromolar range.
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| 体外研究 (In Vitro) |
尽管 1,2-二己酰基-sn-甘油的生物活性尚未得到充分表征，但预计其行为与 1,2-二辛酰基-sn-甘油类似 [1,2]。
在无细胞实验中，1,2-二己酰基-sn-甘油在Ca2+和磷脂酰丝氨酸(PS)存在的情况下可激活蛋白激酶C(PKC)。PKC激活的EC50约为1-10 uM。它还能激活嵌合蛋白(一种Rac GAP)和其他一些含有C1结构域的蛋白质。底物磷酸化可通过合成肽进行测定。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
DHG注射入小鼠体内或应用于组织后，可激活蛋白激酶C (PKC)，并诱导下游效应，例如增加神经递质释放、平滑肌收缩和胰岛素分泌。然而，其短酰基链导致代谢迅速，限制了其在体内的作用持续时间。
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| 酶活实验 |
二酰甘油激酶 (DGK) 催化二酰甘油的 ATP 依赖性磷酸化生成磷脂酸，已在原核生物和真核生物中得到研究。最近，在盘基网柄菌 (Dictyostelium discoideum) 中发现了一种与人 DGK-θ 高度相似的蛋白质 DGKA。使用中链二酰甘油 1,2-二辛酰-sn-甘油 (DiC8) 进行测定时，DGKA 被证实具有 DGK 活性。要全面了解 DGK 的催化和调控机制及其生理功能，需要对其生化和动力学特性进行深入研究。本报告分析了 DGKA 的这些特性。该酶以米氏方程的方式催化 DiC8 和另一种中链二酰甘油 DiC6 (1,2-二己酰-sn-甘油) 的磷酸化。有趣的是，使用生理相关的长链DAG时，DGKA的动力学取决于底物表面浓度和所用去垢剂。当表面底物浓度低于或等于3.5 mol%时，在辛基葡糖苷混合胶束中，DGKA相对于本体底物浓度（1,2-二油酰基-sn-甘油）表现出米氏动力学特征。然而，在较高的表面浓度下，初始反应速率与本体底物浓度之间呈S形关系。相比之下，在Triton X-100混合胶束中，DGKA在所有表面浓度下均表现出相对于本体底物浓度的S形动力学特征。最后，我们发现磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酸（PA）能显著增强DGKA的催化活性[1]。
PKC活性测定：将纯化的PKC（5-10 ng）与1,2-二己酰基-sn-甘油（1-100 uM）、0.1 mM CaCl2、100 ug/mL PS、10 uM ATP（含[γ-32P]ATP）以及PKC底物肽（例如Ac-MBP(4-14)）混合于20 mM HEPES缓冲液（pH 7.4）和1 mM DTT中。于30℃孵育5-10分钟。通过滤膜结合法或闪烁计数法测定32P掺入肽的量。 |
| 细胞实验 |
人类精子顶体反应（AR）的发生至少需要两条信号转导通路的激活。本研究旨在阐明其中两条通路——蛋白激酶A（PKA）通路和蛋白激酶C（PKC）通路——的特征，并确定在获能精子中诱导AR的过程中，这两条通路之间是否存在“串扰”。我们以剂量依赖的方式测试了每条通路的刺激剂。计算了ARmax、ED50和ΔARmax（%ARmax-%ARcontrol）值。PKA通路刺激剂福斯克林和二丁酰环磷酸腺苷（dbcAMP）分别在1.0 μM和1.0 mM浓度下诱导了ARmax。福斯克林的ED50和ΔARmax值分别为0.01 μM和17%，dbcAMP的ED50和ΔARmax值分别为0.069 mM和13%。我们测试了两种PKC通路激活剂：合成二酰甘油（DG）和佛波醇二酯。1,2-二油酰-sn-甘油和1,2-二辛酰-sn-甘油是PKC激活第二信使DG的类似物，它们均在50 μM浓度下诱导了ARmax。1,2-二油酰-sn-甘油的ED50和ΔARmax值分别为33 μM和24%，1,2-二辛酰-sn-甘油的ED50和ΔARmax值分别为34.8 μM和34%。4β-佛波醇-12,13-二癸酸酯是一种PKC激活剂，在0.1 μM浓度下诱导了ARmax。其ED50和ΔARmax值分别为0.021 μM和26%。在精子获能期结束时，并在用诱导剂刺激（ARmax剂量）之前，分别加入每种激酶的抑制剂。PKA抑制剂KT5720导致福斯克林和dbcAMP诱导的AR呈剂量依赖性降低。PKC抑制剂Calphostin C阻止了1,2-二油酸酯和4β-佛波醇-12,13-二癸酸酯对AR的刺激。为了研究通路间的“串扰”，进行了以下实验：（1）将各通路的刺激剂组合，并在各自的ARmax和ED50浓度下进行测试；（2）用激酶抑制剂预处理精子，然后用另一种通路刺激剂进行刺激；（3）在ED50浓度下测试PKA或PKC抑制剂以及PKA和PKC刺激剂的组合。实验（1）的结果表明，ED50浓度下的AR反应具有累加性，而ARmax剂量下则没有。 (2) 的结果表明，一种激酶抑制剂可以阻止另一种通路激活剂诱导雄激素受体（AR）的表达。(3) 的结果表明，一种激酶抑制剂可以阻止两种通路激活剂联合使用诱导AR的表达。综上所述，目前的研究结果提示，PKA和PKC通路之间存在一种趋同的串扰机制，该机制最终导致人类精子AR的表达[2]。
细胞（例如 CHO-K1、PC12 或原代神经元）经血清饥饿处理后，用 1,2-二己酰基-sn-甘油（1-50 uM）处理 5-60 分钟。DMSO 浓度应保持在 0.5% 以下。细胞反应包括 PKC 转位至细胞膜（通过 GFP-PKC 融合蛋白可视化）、ERK1/2 磷酸化以及葡萄糖摄取增加。若要观察长期效应（例如，下调），则需处理 24-48 小时。 |
| 动物实验 |
在麻醉大鼠中，可脑室内注射DHG（10-100 μg）以研究PKC依赖性行为效应，例如记忆增强。对于全身性研究，可进行静脉注射（1-10 mg/kg），但该化合物清除迅速。对于离体血管研究，将分离的主动脉环与DHG（1-30 μM）孵育以诱导收缩。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学：由于其酰基链较短，DHG 能被细胞迅速吸收。在体内，它被二酰甘油脂肪酶快速水解（血浆半衰期约为 2-5 分钟），并进一步代谢。它不具有口服生物利用度。制剂：溶于 DMSO（储备液浓度为 10-100 mM），然后用缓冲液或生理盐水稀释（最终 DMSO 浓度 <1%）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：DHG在微摩尔浓度下毒性相对较低。高剂量（啮齿动物静脉注射>50 mg/kg）时，可能因PKC过度激活而引起低血压和呼吸窘迫。它具有刺激性。操作时请戴手套。禁止用于人体。
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| 参考文献 |
[1]. Ostroski, M., Tu-Sekine, B., and Raben, D.M. Analysis of a novel diacylglycerol kinase from Dictyostelium discoideum: DGKA. Biochemistry 44(30), 10199-10207 (2005).
[2]. Doherty, C.M., Tarchala, S.M., Radwanska, E., et al. Characterization of two second messenger pathways and their interactions in eliciting the human sperm acrosome reaction. J. Androl. 16(1), 36-46 (1995). |
| 其他信息 |
1,2-二己酰甘油是一种1,2-二甘油酯。
1,2-二己酰基-sn-甘油是一种常用的蛋白激酶C (PKC) 激活剂，广泛应用于信号转导研究。与佛波酯类（例如PMA）不同，它代谢不稳定，能够提供更符合生理的瞬时激活作用。此外，它比长链二酰甘油 (DAG) 更易溶于水，便于细胞培养。本产品仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C15H28O5
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|---|---|
| 分子量 |
288.38
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| 精确质量 |
288.193
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| CAS号 |
30403-47-5
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| PubChem CID |
152222
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| 外观&性状 |
To be determined
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| 密度 |
1.0±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
372.0±9.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
123.7±12.2 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.457
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| LogP |
3.72
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| tPSA |
72.83
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
14
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
265
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCCCC(=O)OC[C@H](CO)OC(=O)CCCCC
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| InChi Key |
DRUFTGMQJWWIOL-ZDUSSCGKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H28O5/c1-3-5-7-9-14(17)19-12-13(11-16)20-15(18)10-8-6-4-2/h13,16H,3-12H2,1-2H3/t13-/m0/s1
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| 化学名 |
[(2S)-2-hexanoyloxy-3-hydroxypropyl] hexanoate
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| HS Tariff Code |
2917190090
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~7 mg/ml
PBS (pH 7.2): ~0.25 mg/ml DMF: ~20 mg/ml Ethanol: >50 mg/ml |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4676 mL | 17.3382 mL | 34.6765 mL | |
| 5 mM | 0.6935 mL | 3.4676 mL | 6.9353 mL | |
| 10 mM | 0.3468 mL | 1.7338 mL | 3.4676 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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