β-Amyloid (1-40) (TFA) (Amyloid Beta-Peptide (1-40) (human) TFA; Amyloid β-Peptide (1-40) (human) TFA)

目录号: V66468 纯度: ≥98%
β-淀粉样蛋白 (1-40) TFA 是 AD/阿尔茨海默病患者脑斑块中发现的主要蛋白质片段。
β-Amyloid (1-40) (TFA) (Amyloid Beta-Peptide (1-40) (human) TFA; Amyloid β-Peptide (1-40) (human) TFA) 产品类别: Others 13
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
β-淀粉样蛋白 (1-40) TFA 是阿尔茨海默病 (AD) 患者脑斑块中发现的主要蛋白质片段。
β-淀粉样蛋白 (1-40) (TFA) 是一种合成肽,对应于阿尔茨海默病患者脑斑块中发现的主要蛋白质片段。其序列为 DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV-OH,TFA 盐的分子量约为 4,327-4,443 g/mol。游离碱的 CAS 编号为 131438-79-4。该肽广泛用于阿尔茨海默病研究,以研究淀粉样蛋白聚集、神经毒性和潜在的治疗干预措施。本产品仅供研究使用。
生物活性&实验参考方法
靶点
β-Amyloid (1-40) targets neuronal cells and is implicated in the pathogenesis of Alzheimer's disease. The peptide aggregates to form amyloid plaques, which are a hallmark of the disease. These aggregates can interact with various cellular receptors, including NMDA receptors, and induce neurotoxicity through oxidative stress, calcium dysregulation, and inflammation. The peptide serves as a model system for studying Alzheimer's disease mechanisms and for screening potential therapeutic compounds.
体外研究 (In Vitro)
老年斑淀粉样蛋白的主要成分是生理性肽,称为β-淀粉样蛋白(1-40)和(1-42),它们存在于脑组织、脑脊液(CSF)和血浆中。正常衰老的特征是脑脊液中β-淀粉样蛋白(1-40)和(1-42)水平呈U形变化[1]。β-淀粉样蛋白(1-40)聚集的进一步研究:1. 将固体Aβ肽溶解于冷的六氟异丙醇(HFIP)中。将肽在室温下孵育至少1小时,以实现结构随机化和单体化。2. 蒸发去除HFIP后,将所得肽以薄膜形式保存在-20或-80°C下。 3. 膜溶解后,涡旋振荡,并用5 mM无水DMSO将其稀释至合适的浓度和缓冲液(无血清和酚红培养基)。4. 然后,将溶液置于4至8°C下48小时。将样品在4至8°C下以14,000g离心10分钟后,上清液中含有可溶性寡聚体。研究中,上清液被稀释10至200倍。根据最终应用的不同,采用不同的方法。
体外实验表明,β-淀粉样蛋白(1-40)对培养的神经元具有神经毒性作用。该肽会随时间聚集形成原纤维和寡聚体,这些是主要的毒性物质。它通过氧化应激、线粒体功能障碍和细胞凋亡等机制诱导细胞死亡。该肽还能激活小胶质细胞和星形胶质细胞,从而引发炎症反应。其聚集动力学和神经毒性通常通过使用神经元细胞系或原代神经元培养物进行的细胞实验进行评估。
体内研究 (In Vivo)
在体内,β-淀粉样蛋白(1-40)被用于构建动物阿尔茨海默病模型。脑室内或海马内注射该肽段可诱导啮齿动物模型出现淀粉样斑块形成、认知功能障碍和神经炎症。这些模型可用于研究疾病的发病机制,并评估潜在治疗化合物的疗效,包括淀粉样蛋白聚集抑制剂、抗炎药和神经保护药物。
酶活实验
β-淀粉样蛋白(1-40)的体外检测通常包括利用硫黄素T荧光监测其聚集动力学,硫黄素T可与淀粉样蛋白原纤维中的β-折叠结构结合。将肽段在37°C的缓冲溶液中孵育,并随时间测量荧光强度,以确定聚集的滞后期、延伸速率和最终聚集平台期。聚集体的形态可通过透射电子显微镜或原子力显微镜进行评估。这些检测方法用于筛选抑制淀粉样蛋白聚集的化合物。
细胞实验
体外细胞检测β-淀粉样蛋白(1-40)的方法采用SH-SY5Y、PC12等神经元细胞系或原代皮层神经元。将细胞用聚集体或寡聚体形式的肽处理,并使用MTT、CCK-8或LDH释放试验评估细胞活力。通过测量氧化应激、细胞凋亡和线粒体功能障碍的标志物来评估神经毒性。还可以评估该肽对神经元信号通路的影响,包括钙离子流和突触蛋白表达。采用标准细胞培养条件(37°C,5% CO₂)。
动物实验
β-淀粉样蛋白(1-40)的体内动物研究通常包括向啮齿动物脑室内或海马内注射。该肽溶解于无菌生理盐水或人工脑脊液中,并通过立体定位手术给药。研究终点包括:使用行为学测试(例如莫里斯水迷宫或新物体识别)评估认知功能;通过免疫组织化学方法测量淀粉样斑块负荷;通过评估小胶质细胞和星形胶质细胞活化来评估神经炎症;以及分析突触蛋白水平。所有操作均须遵守机构的动物护理和使用指南。
药代性质 (ADME/PK)
β-淀粉样蛋白(1-40)是一种合成肽,通常储存在-20°C或更低的温度下。为了保持其稳定性,运输时需使用干冰。该肽可溶于水或缓冲溶液,但由于其易随时间聚集,建议使用前配制新鲜溶液。三氟乙酸(TFA)盐形式可提高其溶解度和稳定性。该肽的聚集动力学受pH值、温度和离子强度的影响。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
β-淀粉样蛋白(1-40)并非治疗药物,仅供研究使用。该肽本身具有神经毒性,需要谨慎操作。处理该化合物时,应遵守标准的实验室安全预防措施,包括使用适当的个人防护装备。应在通风良好的区域操作该肽,并遵循正确的废物处理程序。该肽未获准用于人体治疗。
参考文献

[1]. Cerebrospinal fluid Abeta40 and Abeta42: natural course and clinical usefulness. Front Biosci. 2002 Apr 1;7:d997-1006.

其他信息
β-淀粉样蛋白(1-40)(TFA)(CAS#: 131438-79-4游离碱)是一种合成肽,对应于阿尔茨海默病患者脑斑块中发现的主要蛋白片段。其序列为DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV-OH,作为TFA盐的分子量约为4,327-4,443 g/mol。该肽广泛用于阿尔茨海默病研究。该化合物不是药物,未经过临床试验。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C194H295N53O58S.C2HF3O2
分子量
4443.84
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。  (2). 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~100 mg/mL (~22.50 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.2250 mL 1.1252 mL 2.2503 mL
5 mM 0.0450 mL 0.2250 mL 0.4501 mL
10 mM 0.0225 mL 0.1125 mL 0.2250 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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