| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent dye; PKH26 does not bind to a specific molecular target. Its mechanism of action is based on the non-specific, stable integration of its lipophilic aliphatic tails into the lipid bilayer of cell membranes, including plasma membranes and organelle membranes. It partitions into the lipid region without covalent bonding to membrane proteins, enabling uniform labeling of the entire cell surface. This physical insertion mechanism allows PKH26 to label virtually any cell type containing a lipid membrane, including eukaryotic cells, bacteria, parasites, and exosomes.
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. PKH 26 工作液的制备
1.1 储备液的制备 将 1 mg PKH 26 溶解在 1 mL DMSO 中，以获得 1 mM 的储备液。 注意：建议将储备液在 -20°C 和 -80°C 下避光保存，并避免反复冻融。 1.2 PKH 26 工作液的配制 用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液，得到浓度为 5-10 μM 的工作液。 注意：请根据实际需要调整 PKH 26 工作液的浓度。 2. 细胞染色 2.1 悬浮细胞（6 孔板） a. 在 4°C 下以 1000g 离心 3-5 分钟，弃去上清液，用 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度为 1×10⁶/mL。 b. 加入 1 mL 工作液，在室温下孵育 10-45 分钟。 c. 在 4°C 下以 400g 离心 3-4 分钟，弃去上清液。 d. 用 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。 e. 用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。使用荧光显微镜或流式细胞术进行观察。 2.2 贴壁细胞 a. 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 b. 从培养基中取出盖玻片，吸去多余的培养基。 c. 加入 100 μL 工作液，轻轻摇动使其完全覆盖细胞，在室温下孵育 5-30 分钟。 d. 用培养基洗涤两次，每次 5 分钟。使用荧光显微镜或流式细胞术进行观察。 储存 -80°C 保存，为期 1 年，需避光。 注意事项 1. 请根据实际实验情况调整 PKH 26 工作液的浓度。 2. 本品仅供研发使用，不得用于药物、家庭或其他用途。 3. 为了您的安全和健康，操作时请穿着白大褂并佩戴一次性手套。 PKH-26 是一种亲脂性荧光染料，可稳定地整合到细胞膜中，且不干扰表面标志物的表达。它不会损害标记靶细胞的活力。在加载 PKH-26 后4小时，靶细胞中凋亡或PI阳性细胞的百分比未发生变化。在 PKH-26 染色后4小时，功能性效应/靶细胞相互作用所需的表面抗原（包括CD54、CD58、HLA-ABC、HLA-DR、CD33、CD34、Mel-1和Mel-2）的表达未显示显著变化。在所有测试的活细胞中，PKH-26 标记至少可稳定维持72小时而无荧光强度损失。凋亡的靶细胞显示略微降低的 PKH-26 强度，但仍可被清晰地区分为 PKH-26 阳性靶细胞。[1] 体外研究表明，PKH26能够高效标记多种细胞类型（通常标记率>99%），且不显著影响细胞活力、增殖或生物活性。MTT实验证实PKH26与成骨细胞具有细胞相容性，对细胞生长无负面影响。在外泌体标记方面，100 μM PKH26在37°C孵育10分钟可高效标记外泌体。然而，共培养实验表明PKH26可通过细胞碎片转移至未标记细胞，提示染料并非仅存留于原始标记细胞中。在神经干细胞研究中，5 μM PKH26在第1天可标记100%的细胞，尽管第1天活力和增殖短暂下降，但到第7天恢复正常。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PKH26在体内具有显著的稳定性，荧光可检测长达100天以上，适用于长期细胞示踪研究。在小鼠模型中，静脉注射PKH26标记的人外周血淋巴细胞后显示快速分布，可在24小时内监测其循环动力学。在大鼠颅骨缺损模型中，种植于支架上的PKH26标记成骨细胞在骨缺损区域未显示明显毒性迹象。在胃癌异种移植模型中，PKH26标记的CIK细胞标记率达99.37%，经局部、静脉或腹腔注射后肿瘤生长均被显著抑制。然而，研究表明PKH26可通过标记的细胞碎片转移至宿主组织，可能导致移植细胞的假阳性识别。
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| 酶活实验 |
PKH26并非为无细胞酶/受体结合实验而设计，因其需要脂质膜进行整合。对于外泌体标记（一种无细胞应用），推荐以下流程：将外泌体与100 μM PKH26染料溶液（每100 μg外泌体加入50 μL PKH26染料溶液）在37°C避光环境下孵育10分钟。随后加入20 mL PBS终止染色反应。通过差速离心获得PKH26标记的外泌体，重悬于500 μL PBS中用于后续应用。对于红细胞标记，PKH26可稳定整合到红细胞膜脂质部分，用于制备吞噬实验所需的标记探针。
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| 细胞实验 |
在进行 PKH-26 细胞毒性实验时，将靶细胞（如人黑色素瘤细胞系、原代白血病AML原始细胞或T2细胞）转移到试管中，并用无血清培养基洗涤两次。然后将细胞重悬于加载缓冲液中，与新鲜配制的 PKH-26（1 mM乙醇储存液）在室温下孵育40分钟。对于肿瘤细胞的加载，小细胞（淋巴细胞）使用0.8 µL PKH-26，或0.5 µL PKH-26 溶于200 µL 加载缓冲液中，最终最佳浓度为2 µM。在摇动下缓慢加入染料溶液以避免细胞染色过度。在室温下摇动30-40分钟后，通过与人血清在室温下孵育30秒来终止染色。然后将细胞沉淀转移到新试管中，并用含10%人血清的RPMI洗涤两次。
将 PKH-26 标记的靶细胞（5×10³个细胞/孔）与效应细胞在96孔V形底培养板中共同孵育，推荐的标准孵育时间为3小时。之后收集细胞，加入1 mL PBS并离心。然后将细胞重悬于100 µL 高钙annexinV结合缓冲液中，加入5 µL annexinV-FITC，在室温下避光染色10分钟。在流式细胞术分析前立即每100 µL结合缓冲液中加入0.1 µg 碘化丙啶（PI）。 分析时，通过设门选择 PKH-26 阳性靶细胞群。特异性细胞毒性的百分比使用以下公式计算：(特异性ann阳性细胞%) = ([样品ann阳性细胞数 - 对照ann阳性细胞数] / [样品总事件数 - 对照ann阳性细胞数]) × 100。研究发现，同时进行PI染色并不能增加annexinV-FITC染色所获得的信息，因为PI单阳性靶细胞很少见。[1] 标准PKH26细胞标记流程如下：收集细胞，洗涤后重悬于稀释液C中，浓度为2×10⁷细胞/mL。将PKH26染料稀释于稀释液C中至2×10⁻⁶ M。等体积混合细胞悬液和染料溶液，快速混匀，室温孵育2-5分钟。加入等体积血清或1% BSA孵育1分钟终止染色。随后用完全培养基洗涤细胞三次以去除未结合的染料。对于肿瘤细胞标记，建议使用新鲜配制的PKH26（0.5-0.8 μL 1 mM储存液于200 μL loading buffer中）在室温下孵育40分钟。标记后的细胞可用于增殖研究、共培养实验或流式细胞术分析。标记效率通常超过99%。 |
| 动物实验 |
典型体内PKH26细胞示踪流程：按上述方法标记细胞，充分洗涤后重悬于无菌PBS中至所需浓度（如10×10⁶细胞/200 μL）。通过选定途径给予标记细胞悬液：静脉注射（尾静脉）、腹腔注射或局部注射（瘤周或心肌内）。对于示踪研究，在预定时间点（如移植后2周）处死动物，采集目标组织（如肝脏、肿瘤）进行冰冻切片。在荧光显微镜下检查组织切片，检测PKH26阳性细胞。可在相同切片上进行特异性标记物（如白蛋白用于肝细胞分化）的免疫荧光染色。在SCID小鼠模型中，在不同时间点（10分钟、30分钟、60分钟、24小时）采集血样以评估循环动力学。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
PKH26由于其膜整合机制而表现出独特的药代动力学特性。该染料在体内具有显著的持久性，标记后荧光可检测长达100天或更久。静脉注射PKH26标记细胞后，循环细胞呈现快速初始分布，注射后30分钟约50%的细胞仍留在循环中，60分钟时约30%。至24小时，外周血中仍可检测到少量标记细胞。染料稳定整合到细胞膜中，不被快速清除或代谢。然而，当细胞死亡崩解后，含有PKH26的碎片可被宿主细胞吞噬，导致染料转移，在非移植细胞中产生假阳性信号。在正常条件下，活细胞无明显染料泄漏，完整细胞间也无显著染料转移。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PKH26通常被认为具有低细胞毒性。体外研究证实，PKH26标记的细胞保留了正常的生物活性、增殖能力和与未标记对照相当的活力。MTT实验和alamar blue实验表明，与未标记对照相比，PKH26不抑制脂肪干细胞的增殖，也未显示出毒性。然而，有报道称存在一些短暂效应：在5 μM浓度下，PKH26在标记后第1天降低细胞活力和增殖，但到第7天这些效应恢复正常。过度标记会导致膜完整性和细胞恢复能力丧失。在体内，PKH26标记的成骨细胞植入骨缺损区域未见明显毒性迹象。其他染料（如Hoechst 33342）曾有延迟细胞毒性的报道，但PKH26未见此现象。总体而言，在推荐浓度下使用，PKH26被认为是安全的细胞示踪染料。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PKH-26 在流式细胞术细胞毒性测定中用作靶细胞的荧光示踪剂，以区分靶细胞和效应细胞。它是标准⁵¹Cr释放测定法的可靠替代方法，避免了使用放射性同位素。PKH-26 测定法允许在单细胞水平上直接评估靶细胞死亡（早期凋亡、膜损伤）。该测定法与⁵¹Cr释放测定法显示出良好的相关性（r² = 0.9777），尽管 PKH-26 测定法显示的细胞毒性百分比略高。该测定法可在短至1.5-3小时内完成。使用刀豆素A阻断穿孔素途径可完全抑制在 PKH-26 测定法中测得的细胞毒性活性。抗原特异性T细胞的频率（例如通过四聚体染色测量）不一定与 PKH-26 测定法测量的细胞毒性活性相关。[1]
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| 分子式 |
C59H97IN2
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|---|---|
| 分子量 |
961.319370031357
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| 精确质量 |
960.669
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| 元素分析 |
C, 73.71; H, 10.17; I, 13.20; N, 2.91
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| CAS号 |
154214-55-8
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| PubChem CID |
162642097
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| 外观&性状 |
Brown to reddish brown solid powder
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| tPSA |
6.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
36
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| 重原子数目 |
62
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| 分子复杂度/Complexity |
1200
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C([N+]1=C(C(C)(C)C2C=CC=CC1=2)C=CC=C1C(C2C=CC=CC=2N1CCCCCCCCCCCCCC)(C)C)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC.[I-]
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| InChi Key |
XOOOYQALQHJRCY-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C59H97N2.HI/c1-7-9-11-13-15-17-19-21-22-23-24-25-26-27-28-30-32-34-36-42-51-61-55-47-40-38-45-53(55)59(5,6)57(61)49-43-48-56-58(3,4)52-44-37-39-46-54(52)60(56)50-41-35-33-31-29-20-18-16-14-12-10-8-2;/h37-40,43-49H,7-36,41-42,50-51H2,1-6H3;1H/q+1;/p-1
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| 化学名 |
2-[(E,3E)-3-(3,3-dimethyl-1-tetradecylindol-2-ylidene)prop-1-enyl]-1-docosyl-3,3-dimethylindol-1-ium;iodide
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| 别名 |
PKH 26; PKH-26; PKH26; 154214-55-8;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 1.67 mg/mL (1.74 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.0402 mL | 5.2012 mL | 10.4024 mL | |
| 5 mM | 0.2080 mL | 1.0402 mL | 2.0805 mL | |
| 10 mM | 0.1040 mL | 0.5201 mL | 1.0402 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
18:1-18:1-C11 BODIPY 505/515 TG
18:1-6:0 DNP-C11 BODIPY 505/515 TG
Anisoin
18:1-C11 BODIPY 505/515-C11 BODIPY 505/515 TG
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