ER-Tracker Green

目录号: V67102 纯度: ≥98%
ER-Tracker 染料是 BODIPY 系列染料与格列本脲结合的类似物。
ER-Tracker Green CAS号: 730931-46-1
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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纯度: ≥98%

产品描述
ER-Tracker染料是BODIPY系列染料的类似物,与格列本脲偶联。它能高选择性地结合内质网,且在低浓度下对细胞无毒。这类染料是一种环境敏感型探针。经甲醛处理后,它仍能保留部分荧光,并具有荧光寿命长、消光系数好的特点。格列本脲是一种ATP依赖性钾离子通道(Kir6、KATP)和CFTR氯离子通道阻滞剂,可结合于内质网。ER-Tracker不适用于固定细胞的染色。
ER-Tracker Green (ERTG)(CAS号:730931-46-1)是一种细胞渗透性荧光染料,可特异性地对活细胞中的内质网(ER)进行染色。其分子式为C₃₇H₄₂BClF₂N₆O₆S,分子量为783.09 g/mol。该染料是一种基于BODIPY的荧光探针,与格列本脲偶联,对内质网具有高选择性。其激发波长为504 nm,发射波长为511 nm。ER-Tracker Green是一种细胞渗透性活细胞染料,用于活细胞成像。经甲醛处理后,仍能保留部分荧光。该染料是一种环境敏感型探针。
生物活性&实验参考方法
靶点
ER-Tracker Green targets the endoplasmic reticulum (ER) through its glibenclamide moiety. Glibenclamide is a sulfonylurea that binds to sulfonylurea receptors, which are associated with ATP-sensitive potassium channels. However, in the context of ER-Tracker Green, the glibenclamide moiety provides specificity for the ER. The BODIPY fluorophore provides green fluorescence (Ex/Em=504/511 nm). The compound is cell-permeable and has low cytotoxicity at low concentrations.
体外研究 (In Vitro)
1. ER-Tracker 工作液的配制方法如下:1.1 配制储备液:将 100 μg ER-Tracker 溶解于 128 μL DMSO 中,配制成 1 mM 的储备液。注意:建议将储备液冷冻保存,避免在 -20°C 或 -80°C 避光条件下反复冻融。1.2 配制 ER-Tracker 工作液:使用 PBS 或无血清细胞培养基将储备液稀释至 100 nM 至 1 μM 的浓度。请务必根据实际情况调整 ER-Tracker 工作液的浓度。2. 将悬浮于 6 孔板(2.1)中的细胞进行染色。A. 在 4°C 下孵育 3 至 5 分钟,然后以 1000 g 离心,弃去上清液。用 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。每毫升含 1 x 10^6 个细胞。B. 加入 1 mL 工作液后,室温静置 5 至 30 分钟。a. 以 400 g 和 4°C 离心 3 至 4 分钟后弃去上清液。用 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。E. 将细胞重悬于 PBS 或无血清细胞培养基中。用于流式细胞仪监测或荧光显微镜观察。贴壁细胞 2.2 a. 将贴壁细胞培养在无菌盖玻片上。B. 将盖玻片从培养基中取出,用吸液器吸去多余的培养基。a. 加入 100 μL 工作液以完全覆盖细胞,轻轻摇晃,然后在室温下孵育 5 至 30 分钟。D. 每次洗涤后用培养基洗涤 5 分钟。用于流式细胞仪监测或荧光显微镜观察。注意:如果使用流式细胞术进行检测,则必须在染色前重悬细胞。
ER-Tracker Green 的体外活性在于其作为选择性内质网染料用于活细胞成像的功能。该染料是一种基于 BODIPY 的荧光探针,与格列本脲偶联,对内质网具有高度选择性。其激发/发射波长最大值分别为 504/511 nm。该染料可透过细胞膜,且在低浓度下具有低细胞毒性。它是一种环境敏感型探针,经甲醛处理后仍能保留部分荧光。
体内研究 (In Vivo)
ER-Tracker Green 不用作治疗剂。其体内用途仅限于对活细胞内质网进行标记的研究应用。该化合物不适用于全身治疗。
酶活实验
体外内质网染色实验中,ER-Tracker Green染料用于检测内质网。该染料在细胞培养基中以低浓度与活细胞孵育。这种细胞渗透性染料可进入细胞并选择性地对内质网进行染色。孵育后,洗涤细胞,并在激发波长为504 nm、发射波长为511 nm的荧光显微镜下进行分析。该染料适用于活细胞成像,并可用于内质网动态的延时研究。此外,由于甲醛处理后仍保留部分荧光,该染料也可在细胞固定后使用。
细胞实验
在体外细胞实验中,ER-Tracker Green 溶于 DMSO,并用细胞培养基稀释。将细胞与染料孵育一定时间后,洗涤,然后用荧光显微镜进行分析。绿色荧光(激发/发射波长 = 504/511 nm)可用于观察活细胞中内质网的结构和动态变化。
动物实验
ER-Tracker Green 通常不用于体内动物实验,因为该化合物主要用作细胞培养试剂。
药代性质 (ADME/PK)
由于ER-Tracker Green是一种研究用荧光染料而非候选药物,因此其药代动力学性质尚未得到表征。该化合物的分子量为783.09 g/mol,应储存于-20°C。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
ER-Tracker Green 仅供研究用途,不得用于人体治疗或诊断。处理此化学试剂时,应遵守标准的实验室安全预防措施。
参考文献

[1]. A functional equivalent of endoplasmic reticulum and Golgi in axons for secretion of locally synthesized proteins. Mol Cell Neurosci. 2009 Feb;40(2):128-42.

[2]. A functional equivalent of endoplasmic reticulum and Golgi in axons for secretion of locally synthesized proteins. Mol Cell Neurosci. 2009 Feb;40(2):128-42.

[3]. Fluorescent substrates for flow cytometric evaluation of efflux inhibition in ABCB1, ABCC1, and ABCG2 transporters. Anal Biochem. 2013 Jun 1;437(1):77-87.

其他信息
ER-Tracker Green (CAS#: 730931-46-1) 是一种细胞可渗透的荧光染料,专门用于在活细胞中染色内质网。它是一种基于BODIPY的探针,与格列本脲结合,激发/发射波长为504/511 nm。该化合物没有临床或治疗应用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C37H42BCLF2N6O6S
分子量
783.09179353714
精确质量
782.263
CAS号
730931-46-1
PubChem CID
168008655
外观&性状
Brown to reddish brown solid powder
tPSA
159
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
9
可旋转键数目(RBC)
12
重原子数目
54
分子复杂度/Complexity
1610
定义原子立体中心数目
0
SMILES
ClC1C=C(C(NCCC2C=CC(=CC=2)S(NC(NC2CCCCC2)=O)(=O)=O)=O)C(=C(C=1)NC(CCC1C=CC2=CC3=C(C)C=C(C)N3[B-]([N+]2=1)(F)F)=O)OC
InChi Key
DOQZRTREFZBLMY-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C37H42BClF2N6O6S/c1-23-19-24(2)46-33(23)22-29-12-11-28(47(29)38(46,40)41)13-16-34(48)44-32-21-26(39)20-31(35(32)53-3)36(49)42-18-17-25-9-14-30(15-10-25)54(51,52)45-37(50)43-27-7-5-4-6-8-27/h9-12,14-15,19-22,27H,4-8,13,16-18H2,1-3H3,(H,42,49)(H,44,48)(H2,43,45,50)
化学名
5-chloro-N-[2-[4-(cyclohexylcarbamoylsulfamoyl)phenyl]ethyl]-3-[3-(2,2-difluoro-10,12-dimethyl-1-aza-3-azonia-2-boranuidatricyclo[7.3.0.03,7]dodeca-3,5,7,9,11-pentaen-4-yl)propanoylamino]-2-methoxybenzamide
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 50 mg/mL (63.85 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.2770 mL 6.3850 mL 12.7699 mL
5 mM 0.2554 mL 1.2770 mL 2.5540 mL
10 mM 0.1277 mL 0.6385 mL 1.2770 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们