MitoTracker Deep Red FM

目录号: V67107 纯度: ≥98%
MitoTracker Deep Red FM 是一种红色荧光染料,选择性积累在线粒体基质中。
MitoTracker Deep Red FM CAS号: 873315-86-7
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
2mg
5mg
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产品描述
MitoTracker Deep Red FM 是一种红色荧光染料,可选择性地聚集在线粒体基质中。MitoTracker Deep Red FM 通过与半胱氨酸残基的游离巯基反应,共价结合于线粒体蛋白,从而实现对线粒体膜电位的染色,且染色过程独立于膜电位。激发/发射波长为 644/665 nm。(储存方法:避光保存。)
MitoTracker Deep Red FM(CAS 编号:873315-86-7)是一种远红外荧光染料,专门用于活细胞中线粒体的染色。其分子量为 543.57 g/mol。该染料可选择性地聚集在线粒体基质中,其聚集程度取决于线粒体膜电位 (Δψ)。 MitoTracker Deep Red FM 通过与半胱氨酸残基的游离巯基反应,以共价键结合线粒体蛋白,从而实现对线粒体膜电位的染色,且染色过程独立于膜电位本身。该染料的激发/发射波长为 644/665 nm 或 633/650-750 nm。MitoTracker Deep Red FM 适用于活细胞或组织的染色,可用于标记线粒体并间接检测线粒体膜电位的变化。
生物活性&实验参考方法
靶点
Fluorescent dye
MitoTracker Deep Red FM targets mitochondria in live cells. The dye does not target a specific protein or enzyme but instead accumulates in active mitochondria due to their membrane potential. Upon accumulation in the mitochondrial matrix, the dye covalently binds to mitochondrial proteins through reaction with free thiol groups of cysteine residues. This covalent binding allows the dye to be retained in mitochondria even after the loss of membrane potential, enabling the study of mitochondrial morphology and dynamics independently of membrane potential.
体外研究 (In Vitro)
MitoTracker Deep Red FM 使用指南
I. 工作液配制
1. 储备液配制
将 MitoTracker Deep Red FM 溶解于 DMSO 中,配制 1 mM 储备液。例如:将 50 μg 试剂加入 92 μL DMSO 中溶解。
注意:储备液应分装后避光保存于 -20°C 或 -80°C。

2. 工作液配制
使用预热的无血清细胞培养基或 PBS 将储备液稀释 1:5000 至 1:50000,得到 20–200 nM 的染色工作液。
建议:工作液浓度可根据实验条件进行优化,并应在使用前立即配制。

II.细胞染色步骤
1. 悬浮细胞染色
- 收集细胞,用PBS洗涤两次(每次5分钟),并将细胞密度调整至1×10⁶/mL;
- 加入1 mL工作液,室温避光孵育15-45分钟;
- 400 g离心3-4分钟,弃上清;
- 用PBS洗涤两次;
- 将细胞重悬于无血清培养基或PBS中,然后使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

2. 贴壁细胞染色
- 将细胞培养于无菌盖玻片上,染色前去除培养基;
- 加入100 μL工作液,确保完全覆盖细胞层,室温避光孵育15-45分钟;
- 移除工作液,并用新鲜培养基洗涤2-3次(每次5分钟);
- 直接进行荧光观察。

III. 储存条件
避光保存于-20℃,可保存长达一年。

IV. 注意事项
- 原液应分装,避光保存,避免反复冻融。在-20℃下可稳定保存约一个月,在-80℃下可稳定保存长达六个月;
- 工作液浓度应根据实际细胞类型和染色效果进行优化;
- 本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗、食品或药品用途;
- 操作时请穿戴实验服和一次性手套,以确保安全。
MitoTracker Deep Red FM 的体外活性在于其能够选择性地对活细胞中的线粒体进行染色。该染料呈现明亮的远红外荧光,激发/发射波长最大值分别为 644/665 nm,具有极佳的信噪比和极低的背景自发荧光。染色效果取决于线粒体膜电位,活性线粒体积累的染料更多。该染料可透过细胞膜,并可在低纳摩尔浓度下使用,从而最大限度地降低细胞毒性。它可用于可视化和分析线粒体的形态、分布和动态变化。由于其远红外发射光谱,MitoTracker Deep Red FM 可与其他荧光染料进行多重标记。
体内研究 (In Vivo)
目前尚未报道MitoTracker Deep Red FM具有显著的体内药理活性,因为该化合物主要用作线粒体染色研究工具,而非治疗药物。该染料不适用于全身治疗。
酶活实验
由于 MitoTracker Deep Red FM 是一种线粒体染料,而非靶向特定酶或受体的药物,因此体外结合试验不适用于它。该化合物与线粒体的相互作用基于其膜电位依赖性的积累以及与线粒体蛋白的共价结合。
细胞实验
在体外细胞实验中,MitoTracker Deep Red FM 溶于 DMSO 中配制成储备液,然后用细胞培养基稀释至推荐浓度(通常为 50-200 nM)。将细胞与染料在 37°C 下孵育 15-45 分钟,使染料在活性线粒体中积累。孵育后,用新鲜培养基洗涤细胞以去除过量的染料,并通过荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。使用 633-644 nm 激光激发远红外荧光,并在 665-750 nm 处检测。该染料适用于活细胞成像,可用于线粒体动力学的延时研究。
动物实验
在体内动物实验中,MitoTracker Deep Red FM 通常不用作全身成像剂。然而,该染料可用于对从动物模型中获取的组织进行离体线粒体分析。该染料也可用于对组织切片或分离的线粒体进行染色。
药代性质 (ADME/PK)
由于MitoTracker Deep Red FM是一种研究用荧光染料而非候选药物,因此其药代动力学特性尚未得到表征。该化合物应以粉末形式在-20°C下避光保存,最长可达3年;或以溶液形式在-20°C下避光保存,最长可达6个月。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
该染料仅供研究用途,不可用于人体治疗或诊断。处理此化学试剂时,应遵守标准实验室安全预防措施,包括避光。
参考文献

[1]. MitoTracker labeling in primary neuronal and astrocytic cultures: influence of mitochondrial membrane potential and oxidants. J Neurosci Methods. 2001 Jan 15;104(2):165-76.

其他信息
MitoTracker Deep Red FM 是一种远红色荧光染料,选择性地染色活细胞中的线粒体。该染料依赖于膜电位在活跃的线粒体中积累,并与线粒体蛋白质共价结合。它广泛用于细胞生物学研究,以研究线粒体的形态、分布和动态。该染料与活细胞成像、流式细胞术和与其他荧光探针的多重标记兼容。它没有临床或治疗应用,且未获得监管批准。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C34H36CL2N2
分子量
543.569046974182
CAS号
873315-86-7
外观&性状
Blue to dark blue solid powder
SMILES
ClCC1C=CC(=CC=1)CN1C2C=CC=CC=2C(C)(C)/C/1=C\C=C\C=C\C1C(C)(C)C2C=CC=CC=2[N+]=1C.[Cl-]
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 125 mg/mL (229.96 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.8397 mL 9.1984 mL 18.3969 mL
5 mM 0.3679 mL 1.8397 mL 3.6794 mL
10 mM 0.1840 mL 0.9198 mL 1.8397 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们