| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Near-infrared fluorescent dye
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| 体外研究 (In Vitro) |
操作流程
一、蛋白样品预处理 1) 为优化标记效率,建议将待标记蛋白(如抗体)浓度配制为 2 mg/mL。 2) 确保蛋白溶液 pH 值为 8.5±0.5。若 pH 低于 8.0,可使用 1 M 碳酸氢钠溶液进行调整。 3) 若蛋白浓度低于 2 mg/mL,标记效率将显著下降。推荐将最终蛋白浓度控制在 2–10 mg/mL 范围内,以实现最佳标记效果。 4) 蛋白溶液应置于不含伯胺(如 Tris 或甘氨酸)且不含铵离子的缓冲体系中,以免干扰标记反应。 二、染料工作液配制(以 ICG-OSu 为例) 向 ICG-OSu 瓶中加入无水 DMSO,配制成 10 mM 储备液,并通过移液或涡旋使其充分溶解混匀。 三、染料用量计算 ICG-OSu 的使用量取决于待标记蛋白的量,建议染料与蛋白的摩尔比控制在 10:1 左右。 示例: 假设需标记 500 μL 浓度为 2 mg/mL 的 IgG(分子量 150,000),并将 1 mg ICG-OSu 溶解于 100 μL DMSO 中,则所需 ICG-OSu 体积计算如下: 1) IgG 的微摩尔数 = 浓度 (mg/mL) × 体积 (mL) / 分子量 (mg/mmol) = 2 × 0.5 / 150,000 = 6.7×10⁻⁶ mmol 2) ICG-OSu 所需微摩尔数 = IgG 微摩尔数 × 10 = 6.7×10⁻⁶ × 10 = 6.7×10⁻⁵ mmol 3) ICG-OSu 体积 (μL) = ICG-OSu 微摩尔数 × 分子量 (mg/mmol) / 浓度 (mg/μL) = 6.7×10⁻⁵ × 753.88 / 0.01 = 5.05 μL 四、标记反应步骤 1) 将适量新鲜配制的 10 mg/mL ICG-OSu 缓慢加入 0.5 mL 蛋白样品中,轻柔混匀后短暂离心,使液体集中于管底。避免剧烈振荡,以防蛋白变性。 2) 将反应管置于避光条件下,室温孵育 60 分钟,期间每隔 10–15 分钟轻柔颠倒混匀一次。 五、偶联产物纯化 以下为使用 Sephadex G-25 柱纯化染料-蛋白偶联物的示例流程: 1) 按说明书预处理 Sephadex G-25 层析柱。 2) 将反应混合液上样至柱床顶部。 3) 待样品液面进入柱床后,立即加入 PBS(pH 7.2–7.4)进行洗脱。 4) 继续使用 PBS(pH 7.2–7.4)冲洗层析柱,收集含目标偶联物的洗脱组分,合并后备用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
文献未对 ICG-OSu 本身进行独立的体内活性实验。所有体内成像和生物分布研究均使用最终缀合的探针TMTP1-PEG4-ICG或游离ICG染料作为对照进行[1]。
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| 酶活实验 |
TMTP1的环状结构(cTMTP1)设计与其先前研究保持一致。我们设计的荧光探针如下:将配备PEG4连接子的肿瘤靶向肽TMTP1与ICG衍生物ICG-OSu共价缀合,如图1a所示。采用固体载体2-氯三苯甲基氯来合成固相多肽。首先,按照预设序列合成氨基酸,将其与带有-NH2末端的PEG4连接,然后从树脂上切下。随后用MeOH/I2溶液进行氧化,使多肽序列通过二硫键环化。经过纯化和冻干后,将样品与等摩尔量的溶解于DMF中的ICG-OSu混合,并加入两倍体积的DIEA。通过LC-MS确认反应是否完全。反应完成后,直接对反应液进行分离纯化,然后冻干并包装。通过HPLC分析了TMTP1-PEG4-ICG的化学纯度,并进一步用LC-MS对化合物进行了评价。使用紫外-可见分光光度计测量了其光学吸收光谱,并与ICG进行了比较。[1]
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| 细胞实验 |
文献中未描述针对 ICG-OSu 的特定细胞实验。描述的细胞结合实验用于比较最终探针TMTP1-PEG4-ICG与游离ICG的靶向能力。
对于探针评估,将细胞(4T1、SiHa、HeLa、S12、HaCaT)以每孔1x10^5的密度接种于6孔板中,培养至约80%汇合。用冷PBS洗涤后,将细胞与1 µM的TMTP1-PEG4-ICG或游离ICG(作为对照)在冰上孵育1小时。然后洗涤细胞,收集并通过流式细胞术进行分析。对于阻断研究,在添加TMTP1-PEG4-ICG探针之前,用10 µM cTMTP1肽预处理细胞30分钟[1]。 |
| 动物实验 |
未描述单独使用ICG-OSu的动物实验方案。所描述的实验方案用于评估最终探针TMTP1-PEG4-ICG或游离ICG对照。
在正常小鼠中生物分布的研究中,通过尾静脉向BALB/c小鼠静脉注射100 µL 25 µM TMTP1-PEG4-ICG,并使用IVIS系统进行48小时成像[1]。 在肿瘤靶向研究中,向荷4T1-luc或HeLa-luc肿瘤的小鼠(BALB/c或BALB/c nu)静脉注射100 µL 25 µM TMTP1-PEG4-ICG或等量的游离ICG。在阻断研究中,在探针给药前,小鼠预先注射100 µL 100 µM cTMTP1肽。对小鼠进行 48 小时的成像,并在指定的时间点切除器官进行离体成像 [1]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ICG-OSu,即吲哚菁绿N-羟基琥珀酰亚胺酯,是近红外染料吲哚菁绿(ICG)的胺反应性衍生物[1]。
它广泛用作构建模块,通过其反应性NHS酯基团与靶向配体(例如肽、抗体)偶联,用于设计体内成像探针[1]。 在本研究中,ICG-OSu与肿瘤靶向肽TMTP1(通过PEG4连接子)偶联,合成分子成像探针TMTP1-PEG4-ICG,旨在提高其肿瘤特异性,使其优于游离ICG[1]。 |
| 分子式 |
C49H53N3O7S
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|---|---|
| 分子量 |
828.026
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| 精确质量 |
827.36
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| CAS号 |
1622335-40-3
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| PubChem CID |
138376165
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| 外观&性状 |
Dark purple to black solid powder
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| LogP |
8.9
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| tPSA |
136
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
16
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| 重原子数目 |
60
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| 分子复杂度/Complexity |
1820
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(CCCCN1C2C=CC3=CC=CC=C3C=2C(C)(C)/C/1=C/C=C/C=C/C=C/C1C(C)(C)C2C3=CC=CC=C3C=CC=2[N+]=1CCCCCC(=O)ON1C(CCC1=O)=O)(=O)(=O)[O-]
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| InChi Key |
KDJUNNVUQBKNAY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C49H53N3O7S/c1-48(2)41(50(39-28-26-35-19-12-14-21-37(35)46(39)48)32-16-8-11-25-45(55)59-52-43(53)30-31-44(52)54)23-9-6-5-7-10-24-42-49(3,4)47-38-22-15-13-20-36(38)27-29-40(47)51(42)33-17-18-34-60(56,57)58/h5-7,9-10,12-15,19-24,26-29H,8,11,16-18,25,30-34H2,1-4H3
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| 化学名 |
4-[(2Z)-2-[(2E,4E,6E)-7-[3-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-6-oxohexyl]-1,1-dimethylbenzo[e]indol-3-ium-2-yl]hepta-2,4,6-trienylidene]-1,1-dimethylbenzo[e]indol-3-yl]butane-1-sulfonate
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| 别名 |
ICG-OSu; 1622335-40-3; ICG-NHS; ICG-NHS ester; ICG NHS ester;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 25 mg/mL (30.19 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2077 mL | 6.0384 mL | 12.0769 mL | |
| 5 mM | 0.2415 mL | 1.2077 mL | 2.4154 mL | |
| 10 mM | 0.1208 mL | 0.6038 mL | 1.2077 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。