| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Near-infrared fluorescent dye
The NHS ester functional group on ICG-OSu targets primary amines (-NH₂) on biomolecules such as proteins, antibodies, and peptides. The compound does not target specific enzymes or receptors but serves as a covalent labeling reagent that attaches the ICG fluorophore to amine-containing biomolecules for near-infrared imaging applications. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
实验方案
I. 蛋白质样品预处理 1) 为优化标记效率，建议将目标蛋白（例如抗体）配制成 2 mg/mL 的浓度。 2) 确保蛋白质溶液的 pH 值为 8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0，请使用 1 M 碳酸氢钠溶液进行调节。 3) 如果蛋白质浓度低于 2 mg/mL，标记效率将显著降低。建议将最终蛋白质浓度保持在 2–10 mg/mL 的范围内，以获得最佳标记效果。 4) 蛋白质溶液应使用不含伯胺（例如 Tris 或甘氨酸）和铵离子的缓冲体系，以避免干扰标记反应。 II.染料工作液的配制（以ICG-OSu为例） 向ICG-OSu小瓶中加入无水DMSO，配制成10 mM的储备液，并通过移液或涡旋振荡确保充分溶解和混合。 III. 染料用量计算 所需的ICG-OSu的量取决于待标记蛋白质的量。建议保持染料与蛋白质的摩尔比约为 10:1。 示例： 假设需要标记 500 μL 浓度为 2 mg/mL（分子量 150,000）的 IgG，并将 1 mg ICG-OSu 溶解于 100 μL DMSO 中，则所需 ICG-OSu 的体积计算如下： 1) IgG 的微摩尔数 = 浓度 (mg/mL) × 体积 (mL) / 分子量 (mg/mmol) = 2 × 0.5 / 150,000 = 6.7×10⁻⁶ mmol 2) 所需 ICG-OSu 的微摩尔数 = IgG 的微摩尔数 × 10 = 6.7×10⁻⁶ × 10 = 6.7×10⁻⁵ mmol 3) 体积ICG-OSu 的用量 (μL) = ICG-OSu 的微摩尔数 × 分子量 (mg/mmol) / 浓度 (mg/μL) = 6.7×10⁻⁵ × 753.88 / 0.01 = 5.05 μL IV. 标记反应步骤 1) 将适量新鲜配制的 10 mg/mL ICG-OSu 缓慢加入 0.5 mL 蛋白质样品中。轻轻混匀，然后短暂离心，收集管底液体。避免剧烈摇晃，以防止蛋白质变性。 2) 将反应管置于避光处，室温孵育 60 分钟。孵育期间，每隔 10-15 分钟轻轻颠倒试管以进行混匀。 V. 偶联物的纯化 以下是使用 Sephadex G-25 柱纯化染料-蛋白偶联物的示例步骤： 1) 根据制造商的说明预处理 Sephadex G-25 柱。 2) 将反应混合物上样至 Sephadex G-25 柱的顶部。 3) 样品进入柱床后，立即加入 PBS（pH 7.2-7.4）进行洗脱。 4) 继续用 PBS（pH 7.2-7.4）洗涤柱子，收集含有目标偶联物的洗脱液，并合并以备后续使用。 ICG-OSu 的体外活性是其作为近红外荧光标记试剂的功能。该化合物具有强烈的近红外荧光，发射波长大于750 nm，使其能够深入组织并降低背景荧光。NHS酯基团可与含胺生物分子共价连接，从而制备用于成像应用的荧光标记缀合物。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
该研究并未专门针对ICG-OSu进行独立的体内活性测定。所有体内成像和生物分布研究均使用最终偶联探针TMTP1-PEG4-ICG或游离ICG染料作为对照[1]。
ICG-OSu并非用作治疗剂。其体内用途是作为近红外成像应用的标记试剂。当与抗体等靶向配体偶联时，该染料可用于非侵入性近红外成像，以追踪动物模型中的生物分布和靶点结合情况。 |
| 酶活实验 |
TMTP1 (cTMTP1) 的环状结构设计与之前的研究一致。我们设计荧光探针的方法如下：将带有 PEG4 的肿瘤靶向肽 TMTP1 与 ICG 衍生物 ICG-OSu 共价偶联，如图 1a 所示。使用 2-氯三苯甲基氯作为固相载体合成固相多肽。首先，根据预定序列合成氨基酸，将其与带有 -NH2 尾的 PEG4 连接，并从树脂上切下。然后用 MeOH/I2 溶液氧化，并通过二硫键形成环状多肽序列。纯化和冻干后，将样品与溶解在 DMF 中的等摩尔量的 ICG-OSu 混合，并加入两倍体积的 DIEA。通过 LC-MS 检测反应是否完全。反应完成后，直接分离纯化反应溶液，然后冻干并包装。采用高效液相色谱法 (HPLC) 分析了 TMTP1-PEG4-ICG 的化学纯度，并进一步采用液相色谱-质谱联用 (LC-MS) 对其进行了评估。使用紫外-可见分光光度计测量了其光吸收光谱，并与 ICG 进行了比较。[1]体外 ICG-OSu 标记实验包括将 NHS 酯与含胺生物分子在合适的缓冲液（通常 pH 7-9）中孵育。该反应通过伯胺对 NHS 酯羰基的亲核攻击进行，形成稳定的酰胺键，并释放出 N-羟基琥珀酰亚胺作为副产物。标记效率可通过测量偶联产物的荧光强度来评估。
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| 细胞实验 |
本研究未描述专门针对ICG-OSu的细胞检测方法。文中描述的细胞结合实验用于比较最终探针TMTP1-PEG4-ICG与游离ICG的靶向能力。
在探针评估中，将细胞（4T1、SiHa、HeLa、S12、HaCaT）以每孔1×10⁵个细胞的密度接种于6孔板中，培养至约80%汇合。用冰冷的PBS洗涤后，将细胞与1 µM的TMTP1-PEG4-ICG或游离ICG（作为对照）在冰上孵育1小时。然后洗涤、收集细胞，并通过流式细胞术进行分析。在阻断实验中，细胞先用 10 µM cTMTP1 肽预孵育 30 分钟，然后再加入 TMTP1-PEG4-ICG 探针 [1]。在体外细胞实验中，ICG-OSu 首先通过 NHS 酯-胺反应与抗体、蛋白质或其他靶向配体偶联。然后纯化标记的偶联物，并将其添加到细胞培养基中与靶细胞孵育。洗涤后，通过荧光显微镜或流式细胞仪分析细胞。近红外荧光具有深层组织穿透性和低背景噪声。 |
| 动物实验 |
未描述单独使用ICG-OSu的动物实验方案。所描述的实验方案用于评估最终探针TMTP1-PEG4-ICG或游离ICG对照。
在正常小鼠中生物分布的研究中，通过尾静脉向BALB/c小鼠静脉注射100 µL 25 µM TMTP1-PEG4-ICG，并使用IVIS系统进行48小时成像[1]。 在肿瘤靶向研究中，向荷4T1-luc或HeLa-luc肿瘤的小鼠（BALB/c或BALB/c nu）静脉注射100 µL 25 µM TMTP1-PEG4-ICG或等量的游离ICG。在阻断研究中，在探针给药前，小鼠预先注射100 µL 100 µM cTMTP1肽。对小鼠进行48小时成像，并在特定时间点切除器官进行离体成像[1]。 对于体内动物实验，ICG-OSu与靶向配体偶联后注射到动物模型中。近红外发射具有深层组织穿透性和低背景荧光，使其适用于体内成像研究。带有ICG-OSu的偶联物可用于动物模型，以追踪生物分布和靶点结合情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
ICG-OSu的药代动力学性质尚未得到充分表征。该化合物的分子量为828.03 g/mol。应在-20°C下避光保存。NHS酯对水分敏感，应在无水条件下操作。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
ICG-OSu仅供研究用途，不得用于人体治疗或诊断。处理此化学试剂时，应遵守标准的实验室安全预防措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ICG-OSu，即吲哚菁绿N-羟基琥珀酰亚胺酯，是近红外染料吲哚菁绿（ICG）的氨基反应性衍生物。
它广泛用作设计体内成像探针的构建块，通过将其反应性NHS酯基团与靶向配体（例如肽、抗体）偶联。 在本研究中，ICG-OSu与肿瘤靶向肽TMTP1（通过PEG4连接子）偶联，以合成分子成像探针TMTP1-PEG4-ICG，旨在提高其肿瘤特异性，使其优于游离ICG。 ICG-OSu（ICG NHS酯）是吲哚菁绿的NHS酯活化衍生物，用于高效生物偶联到含氨基的生物分子。它是一种广泛用于设计体内成像探针的近红外荧光剂。该化合物没有临床或治疗应用。 |
| 分子式 |
C49H53N3O7S
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|---|---|
| 分子量 |
828.026
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| 精确质量 |
827.36
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| CAS号 |
1622335-40-3
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| PubChem CID |
138376165
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| 外观&性状 |
Dark purple to black solid powder
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| LogP |
8.9
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| tPSA |
136
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
16
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| 重原子数目 |
60
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| 分子复杂度/Complexity |
1820
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(CCCCN1C2C=CC3=CC=CC=C3C=2C(C)(C)/C/1=C/C=C/C=C/C=C/C1C(C)(C)C2C3=CC=CC=C3C=CC=2[N+]=1CCCCCC(=O)ON1C(CCC1=O)=O)(=O)(=O)[O-]
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| InChi Key |
KDJUNNVUQBKNAY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C49H53N3O7S/c1-48(2)41(50(39-28-26-35-19-12-14-21-37(35)46(39)48)32-16-8-11-25-45(55)59-52-43(53)30-31-44(52)54)23-9-6-5-7-10-24-42-49(3,4)47-38-22-15-13-20-36(38)27-29-40(47)51(42)33-17-18-34-60(56,57)58/h5-7,9-10,12-15,19-24,26-29H,8,11,16-18,25,30-34H2,1-4H3
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| 化学名 |
4-[(2Z)-2-[(2E,4E,6E)-7-[3-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-6-oxohexyl]-1,1-dimethylbenzo[e]indol-3-ium-2-yl]hepta-2,4,6-trienylidene]-1,1-dimethylbenzo[e]indol-3-yl]butane-1-sulfonate
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| 别名 |
ICG-OSu; 1622335-40-3; ICG-NHS; ICG-NHS ester; ICG NHS ester;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 25 mg/mL (30.19 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2077 mL | 6.0384 mL | 12.0769 mL | |
| 5 mM | 0.2415 mL | 1.2077 mL | 2.4154 mL | |
| 10 mM | 0.1208 mL | 0.6038 mL | 1.2077 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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