HKOH-1

目录号: V67138 纯度: ≥98%
HKOH-1是一种高灵敏度的绿色荧光探针,可特异性检测活细胞中的·OH。
HKOH-1 CAS号: 2031170-96-2
产品类别: Reactive Oxygen Species
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
Other Sizes
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
HKOH-1是一种高灵敏度的绿色荧光探针,可特异性检测活细胞中的·OH自由基。其最大激发波长和发射波长分别为500 nm和520 nm。
HKOH-1 是一种高灵敏度和高选择性的绿色荧光探针,可用于检测活细胞中的内源性羟基自由基 (·OH)。它在天然状态下不发荧光,但经·OH 选择性脱芳基化后,会释放出二氯荧光素荧光团,从而产生强烈的荧光增强信号。
生物活性&实验参考方法
靶点
Hydroxyl radicals (·OH) are the primary molecular target. The probe is designed for the selective detection of ·OH over other reactive oxygen species (ROS).
体外研究 (In Vitro)
1. HKOH-1 工作液的制备 1.1 制备储备液。将 1 mg HKOH-1 用 135 μL 无水 DMSO 稀释,配制成 10 mM 的储备液。建议将 HKOH-1 储备液分装后避光保存于 -20°C 或 -80°C。1.2 制备工作液 使用预热的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液,配制 1-10 μM 的 HKOH-1 工作液。注意:请根据实际情况调整 HKOH-1 工作液的浓度。2. 细胞染色(悬浮细胞) 2.1 离心细胞,加入 PBS,洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度为 1×10⁶/mL。2.2 加入 1 mL HKOH-1 工作液,室温静置 5 至 30 分钟。 2.3 以 400 g 离心 3-4 分钟,然后去除上清液。2.4 加入 PBS 后,用 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。2.5 将细胞重悬于 1 mL PBS 或无血清培养基中,并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。3. 贴壁细胞染色 3.1 使用无菌盖玻片培养贴壁细胞。3.2 将盖玻片从培养基中取出后,吸出多余的培养基。3.3 用 100 μL 染料工作液完全覆盖细胞,轻轻摇晃,孵育 5-30 分钟。3.4 吸出染料工作液,并用培养基洗涤两次,每次 5 分钟后,使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。
HKOH-1 是一种高灵敏度和高选择性的荧光探针,用于检测内源性羟基自由基。它在 500 nm 处有吸收峰,并且在·OH 存在下表现出强烈的荧光增强信号。其激发/发射最大值分别为 500/520 nm。
体内研究 (In Vivo)
目前尚无该化合物的具体体内活性数据。然而,作为活性物质的荧光探针,类似化合物通常用于活细胞和动物模型中·OH的实时成像。
酶活实验
标准实验方案包括在室温下,将HKOH-1(例如,5 uM)与不同浓度的羟基自由基生成体系在缓冲溶液(例如,pH 7.4的PBS缓冲液)中孵育。然后用分光光度计测量荧光强度(激发/发射波长:500/520 nm)。
细胞实验
细胞成像的一般方案包括将细胞接种在共聚焦培养皿中,并在 37°C 下用 HKOH-1(例如,1-10 uM)孵育 20-30 分钟。洗涤后,用氧化应激诱导剂处理细胞以产生内源性·OH,并使用共聚焦显微镜(激发/发射:500/520 nm)对荧光进行成像。
动物实验
典型的体内成像方案包括将优化浓度的HKOH-1通过静脉或腹腔注射到活体动物模型中。经过适当的循环时间(例如30分钟至2小时)后,将动物置于体内成像系统下,以监测·OH诱导的荧光。
药代性质 (ADME/PK)
小分子探针的通用药代动力学特性不适用,因为这些化合物通常用于急性成像。然而,其制剂可以溶于PBS或生理盐水中,并添加DMSO等助溶剂,以用于体内实验。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
成像探针的总体毒性被认为较低。对于HKOH-1,目前尚无具体的毒性研究报道。在类似的实验中,在细胞模型中用浓度高达10 μM的HKOH-1孵育24小时,结果显示其具有良好的生物相容性,且未观察到明显的细胞毒性。
参考文献

[1]. HKOH-1: A Highly Sensitive and Selective Fluorescent Probe for Detecting Endogenous Hydroxyl Radicals in Living Cells. Angew Chem Int Ed Engl. 2017 Oct 9;56(42):12873-12877.

[2]. HKOH-1: A Highly Sensitive and Selective Fluorescent Probe for Detecting Endogenous Hydroxyl Radicals in Living Cells. Angew Chem Int Ed Engl. 2017 Oct 9;56(42):12873-12877.

其他信息
HKOH-1 是一种用于研究氧化应激及相关疾病的研究工具。该探针的开启响应具有低背景噪声,使其成为羟基自由基高对比度成像的理想选择。本产品仅供研究使用,不得用于诊断或治疗用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C26H12CL2I2O6
分子量
745.084830284119
精确质量
743.81
CAS号
2031170-96-2
PubChem CID
122647002
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
7.5
tPSA
85.2
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
36
分子复杂度/Complexity
841
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C12(C3=C(C=C(OC4=CC(I)=C(O)C(I)=C4)C(Cl)=C3)OC3=C1C=C(Cl)C(O)=C3)C1=C(C=CC=C1)C(=O)O2
InChi Key
BZWBSIJSVLAKAF-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C26H12Cl2I2O6/c27-16-7-14-21(9-20(16)31)35-22-10-23(34-11-5-18(29)24(32)19(30)6-11)17(28)8-15(22)26(14)13-4-2-1-3-12(13)25(33)36-26/h1-10,31-32H
化学名
2',7'-dichloro-3'-hydroxy-6'-(4-hydroxy-3,5-diiodophenoxy)spiro[2-benzofuran-3,9'-xanthene]-1-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 180 mg/mL (241.58 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.3421 mL 6.7107 mL 13.4214 mL
5 mM 0.2684 mL 1.3421 mL 2.6843 mL
10 mM 0.1342 mL 0.6711 mL 1.3421 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们