| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Thioredoxin (Trx).
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| 体外研究 (In Vitro) |
Trx-red (NBL-SS) 具有诸多优势,包括高荧光信号、短响应时间和红色发射。硫氧还蛋白 (Trx) 是一种普遍存在的氧化还原调节蛋白,主要参与细胞增殖、分化和死亡[1]。用 Trx-red (NBL-SS; 5 μM; 0–30 min) 处理 HeLa 细胞会导致荧光强度出现明显的、时间依赖性的升高[1]。
在无细胞检测中(例如,使用纯化的重组硫氧还蛋白),Trx-red 对硫氧还蛋白表现出高度选择性,而对其他细胞还原剂(如谷胱甘肽 (GSH) 和半胱氨酸)的选择性较低。加入硫氧还蛋白(通过 NADPH/硫氧还蛋白还原酶系统)后,该探针在 λem=661 nm 处显示出快速(0-30 分钟)且浓度依赖性的红色荧光增强。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
也可以使用 Trx-red(NBL-SS;10 μM;30 分钟)对 6 日龄斑马鱼幼虫中的硫氧还蛋白进行成像[1]。
在细胞研究中,用 5 uM Trx-red 孵育的 HeLa 细胞显示出明显的细胞内荧光强度随时间增强,验证了其检测内源性 Trx 活性的能力。该探针具有细胞渗透性,在工作浓度下无细胞毒性,并且与标准活细胞成像技术兼容。 |
| 酶活实验 |
典型的荧光测定:配制反应混合物,其中包含纯化的重组人硫氧还蛋白(Trx,例如 5 nM)、大肠杆菌硫氧还蛋白还原酶(0.5 U/mL)、0.2 mM NADPH 和不同浓度的 Trx-red,溶于 100 mM PBS 缓冲液(pH 7.4)中,于 37℃ 下反应。使用酶标仪,以激发波长 λex=615 nm 和发射波长 λem=661 nm,每 1 分钟监测一次荧光强度,持续 30 分钟。对照孔中不添加 Trx 或 NADPH。
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| 细胞实验 |
将细胞(例如 HeLa 细胞)接种于 96 孔黑色板中(每孔 10,000 个细胞),过夜培养。移除培养基,用 PBS 洗涤。加入 100 uL 含 5 uM Trx-red 的 DMEM 培养基。将细胞置于 37℃、5% CO2 条件下孵育 0-30 分钟。用 PBS 洗涤两次,加入新鲜的无酚红 DMEM 培养基。使用配备 Cy5 滤光片组(激发/发射波长 615/661 nm)的荧光显微镜采集图像。荧光强度可使用 ImageJ 软件进行定量分析。
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| 动物实验 |
斑马鱼幼体是活体动物中硫氧还蛋白(Trx)成像的理想对象。受精后第6天,将斑马鱼幼体置于含有10 μM Trx-red的胚胎培养基中,于28℃孵育30分钟。用新鲜培养基清洗幼体三次,每次5分钟。用0.02%三卡因麻醉幼体。将幼体置于载玻片上,使用激发波长λex=561 nm、发射波长λem=650-750 nm的共聚焦显微镜进行成像。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
基于尼罗蓝骨架和高氯酸盐的高溶解度,Trx-red预计在啮齿动物体内具有中等血浆蛋白结合率和约2-3小时的半衰期(t1/2)。其代谢可能涉及硫氧还蛋白对二硫键的还原,以及潜在的II相葡萄糖醛酸化。全身给药后,Trx-red会在Trx高表达的组织(例如肝脏、肾脏)中蓄积。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外 MTT 实验(使用 HeLa 细胞)表明,在浓度高达 50 μM 的情况下,该化合物在 24 小时内细胞毒性较低(细胞存活率 >90%),证实其适用于活细胞成像。斑马鱼实验表明,在成像浓度(10 μM,30 分钟)下未观察到形态异常或死亡。目前尚无长期毒性研究数据。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
该探针是一种用于研究硫氧还蛋白生物学,特别是癌症和神经退行性疾病中氧化还原调控的研究工具。其开发基于荧光团依赖的二硫键断裂机制。Trx-red尚未进行临床试验,不适用于人体治疗或诊断;它仅是一种实验室研究试剂。
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| 分子式 |
C29H32N3O8S2.CLO4
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|---|---|
| 分子量 |
714.15
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| 精确质量 |
713.111
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| CAS号 |
2368978-96-3
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| PubChem CID |
162642073
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| 外观&性状 |
Dark purple to black ointment
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| tPSA |
261
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
15
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| 可旋转键数目(RBC) |
16
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| 重原子数目 |
47
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| 分子复杂度/Complexity |
1180
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
COC(=O)CC[N+](=C1C=CC2=NC3=C(C=C(C4=CC=CC=C43)NC(=O)OCCSSCCO)OC2=C1)CCC(=O)OC.[O-]Cl(=O)(=O)=O
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| InChi Key |
XFNWDHNXIAUEQX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H31N3O8S2.ClHO4/c1-37-26(34)9-11-32(12-10-27(35)38-2)19-7-8-22-24(17-19)40-25-18-23(20-5-3-4-6-21(20)28(25)30-22)31-29(36)39-14-16-42-41-15-13-33;2-1(3,4)5/h3-8,17-18,33H,9-16H2,1-2H3;(H,2,3,4,5)
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| 化学名 |
[5-[2-(2-hydroxyethyldisulfanyl)ethoxycarbonylamino]benzo[a]phenoxazin-9-ylidene]-bis(3-methoxy-3-oxopropyl)azanium;perchlorate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 50 mg/mL (70.01 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4003 mL | 7.0013 mL | 14.0027 mL | |
| 5 mM | 0.2801 mL | 1.4003 mL | 2.8005 mL | |
| 10 mM | 0.1400 mL | 0.7001 mL | 1.4003 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。