| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 1mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Fluorescent dye
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Mag-Fura-2 AM 工作液制备方法
1.1 储备液配制 使用无水 DMSO 溶解 Mag-Fura-2 AM 粉末,制备浓度为 10 mM 的储备液。 注意:配制好的储备液需分装避光保存,建议存放于 -20℃ 或 -80℃ 环境中。 1.2 工作液配制 将储备液用预热的 HBSS 缓冲液稀释,获得 1-10 μM 的 Mag-Fura-2 AM 工作液。 注意:工作液浓度可根据实验需求调整,且需新鲜配制使用。 悬浮细胞染色流程 2.1 细胞预处理 离心收集细胞,用 PBS 洗涤两次(每次 5 分钟),调整细胞密度至 1×10⁶/mL。 2.2 染料孵育 加入 1 mL 工作液,室温避光孵育 5-30 分钟。 2.3 去除染料 400 g 离心 3-4 分钟,小心移除上清液。 2.4 洗涤步骤 用 PBS 重复洗涤细胞两次(每次 5 分钟)。 2.5 检测准备 最后用 1 mL HBSS 重悬细胞,即可进行荧光显微镜或流式细胞仪检测。 贴壁细胞染色方案 3.1 细胞培养 将细胞接种于无菌盖玻片上进行培养。 3.2 培养基去除 取出盖玻片,吸除表面残留培养基。 3.3 染色处理 加入 100 μL 工作液,轻柔晃动确保完全覆盖细胞,室温孵育 5-30 分钟。 3.4 洗涤与观察 吸除染料后,用新鲜培养基洗涤 2-3 次(每次 5 分钟),随后进行荧光显微镜观察。 |
| 酶活实验 |
在Hanks’-HPES缓冲液(pH 7.45)中,在37摄氏度下用10微摩尔的mag-fura-2乙酰氧基甲酯孵育10分钟,突触体可以装载mag-fura-2-,而不会显著干扰其ATP含量。发现突触体内游离Mg2+浓度([Mg2+]i)取决于外部Mg2+浓度,当培养基中Mg2+的浓度从1增加到8 mM时,从0.8增加到1.25 mM。在含有5 mM Mg2+的培养基中,通过用Na+离子载体莫能菌素(0.2 mM)或藜芦碱(0.2 mM。通过在含有68 mM KCl和68 mM NaCl的培养基中孵育突触体进行的质膜去极化对[Mg2+]i没有影响。当突触体外Mg2+浓度为1和8 mM时,通过在外部Na+被胆碱替代的培养基中孵育突会体来逆转Na+梯度,使[Mg2+]i分别增加到1.6和2.2 mM。我们得出结论,Na+/Mg2+交换在突触体的质膜中起作用。在培养基中存在Mg2+的情况下,突触体外ATP,而不是ADP或腺苷,将[Mg2+]i从1.1+/-0.1增加到1.6+/-0.1 mM。不可水解的ATP类似物腺苷5'-(β-γ-亚氨基)三磷酸拮抗了ATP的作用,但本身对[Mg2+]i没有影响。结论是Mg2+通过突触体质膜的转运受到胞外ATP酶或胞外蛋白激酶活性的调节[1]。
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| 参考文献 |
| 分子式 |
C30H30N2O19
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|---|---|
| 分子量 |
722.56
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| 精确质量 |
985.26
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| 元素分析 |
C, 49.87; H, 4.19; N, 3.88; O, 42.07
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| CAS号 |
130100-20-8
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| PubChem CID |
131176
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.436 g/cm3
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| 沸点 |
797.5ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
436.1ºC
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| 蒸汽压 |
1.96E-25mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.554
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| LogP |
2.467
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| tPSA |
317.88
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
21
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| 可旋转键数目(RBC) |
26
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| 重原子数目 |
51
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| 分子复杂度/Complexity |
1240
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC(=O)OCOC(=O)CN(CC(=O)OCOC(=O)C)C1=CC2=C(C=C1OCC(=O)OCOC(=O)C)C=C(C3=NC=C(C(=O)OCOC(=O)C)O3)O2
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| InChi Key |
PCDUVTXECKTHBH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H30N2O19/c1-16(33)42-12-46-26(37)9-32(10-27(38)47-13-43-17(2)34)21-7-22-20(5-23(21)41-11-28(39)48-14-44-18(3)35)6-24(50-22)29-31-8-25(51-29)30(40)49-15-45-19(4)36/h5-8H,9-15H2,1-4H3
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| 化学名 |
acetyloxymethyl 2-[5-[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethoxy]-6-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]-1-benzofuran-2-yl]-1,3-oxazole-5-carboxylate
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| 别名 |
130100-20-8; Mag-fura-2-acetoxymethyl ester; Mag-fura-2 AM; Mag-fura-2-AM; MFAME; MAG-FURA-2, AM; Magfura-2-AM; acetyloxymethyl 2-[5-[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethoxy]-6-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]-1-benzofuran-2-yl]-1,3-oxazole-5-carboxylate;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3840 mL | 6.9198 mL | 13.8397 mL | |
| 5 mM | 0.2768 mL | 1.3840 mL | 2.7679 mL | |
| 10 mM | 0.1384 mL | 0.6920 mL | 1.3840 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。